《Antiviral Research》：Newcastle disease virus TS09-C strain provides long-lasting protection against virulent strain after
in-ovo immunization
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本研究发现NDV疫苗株TS09-C通过促进CD8+ T细胞增殖和抑制炎症反应，在蛋内接种后提供至少12个月的长期保护，显著降低病毒组织滴定度和病理损伤，RNA测序显示142个免疫相关基因表达变化，其中124个基因下调涉及先天免疫通路。
冯鹤龙|杨俊杰|姜丽人|索晓宇|朱玉桥|尚宇|王宏才|曾哲|姚伦|罗庆平|文国元
中国湖北省农业科学院畜牧兽医科学研究所，武汉
摘要
< />卵内疫苗，能够提供至少12个月的长期保护，对抗强毒NDV。TS09-C显著降低了组织中的病毒滴度，减轻了组织病理损伤，并在感染后诱导了CD8+ T细胞的增殖。通过RNA-Seq分析，比较TS09-C卵内组与PBS组，发现了142个与免疫相关的差异表达基因（DEGs），其中包括18个上调基因和124个下调基因。这些基因涉及的先天免疫途径，如NOD样、Toll样、RIG-I样、细胞因子-细胞因子受体相互作用途径以及所有相关基因（包括促炎细胞因子IL-1B、IL-6、IL-18等）均显著下调。这些结果表明，NDV株TS09-C是一种具有长期保护效果的疫苗候选者，其保护作用可能归因于它能够诱导CD8+ T细胞的增殖并抑制炎症反应。
引言
< />副粘病毒科中的Avulavirus属。尽管广泛实施了疫苗接种，但在接种过的鸡群中仍频繁发生ND疫情（Kondakova等人，2025年）。使用活疫苗进行ND控制是许多国家的常见策略。传统的接种方法（如眼药水滴注、饮水、气溶胶等）效率较低或生物安全性较差（Sokale等人，2017年；Wen等人，2017年）。卵内接种是在孵化后期进行的接种方法，由于其能够确保快速且均匀地传递疫苗，在孵化时提供相当程度的保护，并减少人为错误（Peebles，2018年；Eldemery等人，2023年），因此在家禽产业中具有吸引力。目前，已有针对多种禽类疾病的卵内疫苗获得批准，如马立克病（MD）、ND、传染性法氏囊病、鸡痘和球虫病（Peebles，2018年）。在美国，超过90%的孵化场使用卵内接种来预防MD（Eldemery等人，2023年）。然而，商业化的活疫苗（如LaSota、Clone-30和V4）存在安全隐患，因为它们会导致孵化后鸡只存活率低并引发严重的组织病理损伤（Mast等人，2006年；Dilaveris等人，2007年；Ramp等人，2012年）。
此前，我们通过连续传代V4株于BHK-21细胞中，并通过终点稀释法纯化了新的NDV株TS09-C（Wen等人，2012年）。研究表明，TS09-C株作为卵内疫苗使用时，对18日龄的无特定病原体（SPF）鸡胚和商业鸡胚是安全且具有免疫原性的（Wen等人，2017年；Fan等人，2020年）。该疫苗能为孵化后的鸡只提供至少三个月的强保护，使其能够抵御强毒NDV的攻击（Fan等人，2020年）。在本研究中，我们进一步评估了TS09-C株作为卵内疫苗所引发的临床保护持续时间和免疫反应。
伦理声明
所有动物实验均获得了中国湖北省农业科学院机构动物护理和使用委员会的批准（许可编号05/2023），并由该委员会监督。所有鸟类均通过向胸肌注射Zoletil?（tiletamine–zolazepam，Virbac，法国）进行麻醉，剂量为0.18 ml/kg，在完全麻醉后进行颈椎脱位操作，通过确认无眼睑反射来确认麻醉效果。
TS09-C作为卵内疫苗的安全性和免疫原性
为了评估TS09-C作为卵内疫苗的安全性和免疫原性，如图1A所示，TS09-C卵内组的孵化率和存活率均为95.0%，PBS组为97.5%，TS09-C孵化后组的存活率为100%。在TS09-C卵内组中，HI抗体可在7至360日龄期间检测到；在TS09-C孵化后组中，HI抗体可在7至56日龄期间检测到（图1B），其中21日龄时两组HI滴度最高。TS09-C卵内组的HI滴度显著高于
讨论
目前的ND疫苗保护期通常较短，仅持续3个月。为了有效控制ND，鸡只每年需要接种多次（Shi等人，2024年）。虽然多次接种有效控制了ND，但免疫成本和农场中NDV的传播负担显著增加（Hu等人，2022年）。本研究证实，TS09-C株作为卵内疫苗至少提供了100%的致命保护
作者贡献声明
罗庆平：概念构思。姚伦：数据整理。曾哲：数据整理。朱玉桥：数据整理。索晓宇：实验研究。王宏才：数据整理。尚宇：数据整理。冯鹤龙：撰写初稿、数据整理、概念构思。文国元：撰写、审稿与编辑、概念构思。姜丽人：实验研究、数据整理。杨俊杰：撰写初稿、实验研究、数据整理数据可用性声明
所有测序数据已存放在NCBI，访问号为PRJNA1273286和PRJNA1271742。本研究使用SPF鸡胚作为动物模型，消除了自然条件下的部分干扰因素，所得结果属于概念验证类型的数据。
利益冲突声明
作者声明没有已知的可能影响本文研究的利益冲突。
资助
本研究得到了中国国家自然科学基金（项目编号U23A20239、32302869）、中国农业研究系统专项基金（编号CARS-41）、湖北省科技重大项目（2023BBB034、2025BBB007）、武汉市科技创新专项项目（2023020302020573）以及湖北省现代农业产业技术体系（第四批）-家禽与蛋品产业技术体系（2023HBSTX4-04）的支持。
利益冲突声明
作者声明没有已知的可能会影响本文研究的财务利益或个人关系。
