《Clinical Breast Cancer》：Novel and known fibrinogen gene mutations in Chinese pediatric patients with congenital dysfibrinogenemia: genetic and functional characterization
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先天性纤维蛋白原缺乏症（CD）儿童病例研究，通过凝血检测（Clauss法及PT-dF）联合基因测序（FGA/FGB/FGG基因）发现2例新突变（FGA c.113G>A；FGG c.902G>T），并首次报道中国儿童同型异型FGB c.292G>A病例，所有患者无症状但存在凝血活性异常，提示需个体化监测策略。
Juan Huang|Duocai Wang|Ying Wang|Yongqiang Yang|Dong Peng|Meizhu Luo|Xiaoying Fu
深圳市儿童医院实验室医学科，中国深圳 518000
摘要
目的
先天性纤维蛋白原血症（CD）是一种罕见的遗传性疾病，由纤维蛋白原的质异常引起，导致功能性纤维蛋白原水平与抗原性纤维蛋白原水平不一致。基因检测在确诊和阐明表型异质性方面起着关键作用。本研究旨在强调将凝血检测与基因检测相结合的诊断价值，并通过新型突变的临床病例突出CD的临床异质性。
设计和方法
五名偶然被诊断为CD的儿科患者在深圳市儿童医院接受了治疗。他们的 peripheral blood 样本被用于检测凝血参数，包括使用Clauss方法测定的纤维蛋白原活性（FIB:C）、由凝血酶原时间（PT）衍生的纤维蛋白原（PT-dF），以及活化部分凝血活酶时间、PT、凝血酶时间和血栓弹性图（TEG）。通过Sanger测序技术分析了FGA、FGB和FGG基因的突变情况。
结果
两名无关患者携带已知的FGG基因杂合突变（c.902G > A；p.Arg301His）。另外发现了两种新的杂合突变：FGA（c.113G > A；p.Arg38Lys）和FGG（c.902G > T；p.Arg301Leu）。还有一名患者携带FGB基因的纯合突变（c.292G > A；p.Ala98Thr），这种变异在文献中仅有两次报道。所有患者均无症状。凝血检测显示FIB:C水平持续降低，而PT-dF正常，这是CD的特征。TEG分析显示纤维蛋白原相关参数存在变异，但未观察到一致的基因型-表型相关性。
结论
本研究扩展了儿童CD的遗传和表型谱系，报告了两种新的突变，并记录了这些变异在中国患者群体中的首例病例。鉴于无症状儿科患者可能存在的长期风险和诊断复杂性，需要制定个性化的监测和管理策略。进一步的研究有助于评估新型突变的功能后果及其对儿童止血系统的影响。
引言
纤维蛋白原是一种可溶的血浆糖蛋白，由三种结构相关的多肽链α、β和γ组成，分别由FGA、FGB和FGG基因编码，这些基因均位于4号染色体的长臂上。纤维蛋白原在凝血级联反应的最终阶段转化为纤维蛋白，从而在止血过程中起核心作用，并参与血小板聚集和纤维蛋白溶解[1][2]。
任何编码纤维蛋白原的基因发生突变都可能导致定量异常（无纤维蛋白原血症或纤维蛋白原减少）或质异常（纤维蛋白原血症）。先天性纤维蛋白原血症（CD）是一种罕见的遗传性疾病，其特征是纤维蛋白原结构异常但抗原水平正常，通常由杂合错义突变引起。虽然CD主要以常染色体显性或共显性方式遗传，但也存在罕见的常染色体隐性形式[3]。
CD的实验室诊断基于功能性纤维蛋白原水平与抗原性纤维蛋白原水平之间的差异——具体来说，使用Clauss方法测得的纤维蛋白原活性（FIB:C）降低，而使用凝血酶原时间（PT）衍生方法（PT-dF）测得的纤维蛋白原水平正常。其他凝血参数如活化部分凝血活酶时间（aPTT）和PT通常正常。如果PT-dF/Clauss比值超过1.43，或Clauss/PT比值低于0.7，则可支持CD的诊断[4]。
临床上，CD具有高度异质性：约55%的患者无症状，25%的患者可能出现出血症状，20%的患者可能出现静脉或动脉血栓[5]。许多患者是在常规术前或术前检查中偶然被诊断出来的，这表明CD的实际患病率可能被低估了。此外，基因型-表型相关性往往不一致，给临床管理和风险分层带来了复杂性。
几乎所有已记录的纤维蛋白原血症病例（99.3%）都是由杂合错义突变引起的，其中FGA的外显子2和FGG的外显子8是突变热点，分别占报告突变的87.9%和88.9%[6]。尽管有这些发现，但导致表型变异的分子机制仍不甚清楚。将基因分析与家族研究相结合可能有助于阐明特定突变的影响以及环境或表观遗传因素的调节作用[7]。
在本研究中，我们描述了五名偶然被诊断为CD的中国儿科患者，这是针对这一人群的少数队列级研究之一。我们发现了新的和之前报道过的纤维蛋白原突变，包括两种在先前任何人群中均未记录过的新型变异。此外，还对三个家族进行了家系分析，以探讨遗传模式和基因型-表型关联。这些发现不仅扩展了儿童CD的突变谱系，还强调了在这一独特人群中早期识别和个性化监测策略的重要性。
凝血检测
凝血检测
在获得书面知情同意后，从所有受试者和可用的家庭成员处采集了外周静脉血样本。凝血检测包括使用Clauss方法测定的FIB:C（该方法使用冻干的人源含钙凝血酶，浓度约为80 NIH单位/mL），以及使用PT衍生方法测定的PT-dF。其他参数还包括aPTT、PT和凝血酶时间（TT）。所有凝血检测均在STA R-Evolution分析仪（Diagnostica Stago）上进行。
人口统计和临床特征
2023年至2024年间，共研究了五名无关的中国儿科CD患者。这些患者来自五个不同的家庭，在部分病例中还分析了额外的家庭成员。所有患者在诊断时均无症状，病情是在常规实验室检查或术前评估中偶然发现的。诊断时的年龄范围为1至15岁。病例1是在术前评估中发现的。
讨论
本研究报道了五名中国儿科CD患者，包括两种新的突变、一种常见突变和一种罕见的纯合变异。所有患者均无症状，并在常规实验室检测中偶然被诊断出CD。CD的诊断通过凝血检测和基因分析得到确认。如CD通常所见，所有患者的纤维蛋白原活性（Clauss方法）均降低，而PT-dF正常。这种不一致性是CD的典型特征。
伦理声明
本研究遵循《赫尔辛基宣言》（2013年修订版）进行，并获得了深圳市儿童医院伦理委员会的批准。
CRediT作者贡献声明
Juan Huang： 方法学、数据管理。
Duocai Wang： 方法学、数据管理。
Ying Wang： 监督、项目管理、方法学、数据分析。
Yongqiang Yang： 研究、数据管理。
Dong Peng： 文章撰写-审阅与编辑、方法学、研究。
Meizhu Luo： 方法学、数据管理。
Xiaoying Fu： 验证、监督、项目管理、资金获取、概念构思。
利益冲突声明
作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。
致谢
本研究得到了
广东省高水平医院建设基金会、广东省高水平医院建设基金（编号ynkt2021-zz39，资助人Wujiao Li）、
深圳市科技计划（编号JCYJ20210324142201004）和
深圳市医学项目（编号SZSM202211033）的支持。
