两种新的Entoloma subg. Cyanula sect. Asprella物种（属于Entolomataceae科，Agaricales目），发现于中国的亚热带地区

基于形态学及分子系统发育分析，本文描述了中国亚热带地区发现的Entoloma属两个新物种：以蓝灰色子实体和具暗棕色色素的菌丝体细胞为特征的E. qingluan，以及具有紫色条纹子实体和蓝黑色菌柄的E. zilin。两者均归入亚属Cyanula的Asprellasect，补充了该类群形态学细节并完善了分类框架。

　　
粉褶菌属（Entoloma）作为伞菌门下物种多样性最丰富的类群之一，其分类学长期存在争议。该属包含超过2000个物种，广泛分布于全球温带至热带地区，生态适应性涵盖腐生、寄生及共生等多种模式。近年来分子生物学技术的引入，使得对粉褶菌属的系统发育重构取得突破性进展，但形态学特征与分子数据的矛盾依然存在。本文重点解析了新物种E. qingluan和E. zilin的形态分类学特征及其在分子系统树中的定位。

一、分类学背景与研究意义
粉褶菌属的系统演化始终存在形态学与分子数据的冲突。传统分类依据子实体形态特征（如菌盖颜色、菌褶排列、孢子印颜色等）进行划分，但分子研究揭示该属存在深刻的系统发育不连续性。Cyanula亚属作为粉褶菌属的重要分支，其下-sectional分类长期存在争议。早期研究（Romagnesi 1941; Noordeloos 2004）将Cyanula亚属划分为Leptonia、Cyanula、Griseorubida等 секции，但分子证据（Co-David et al. 2009; Largent et al. 2016）显示Leptonia секции具有 paraphyletic特性，而Cyanula секции同样存在分子证据与形态描述的偏差。

当前研究通过整合显微形态学与多基因分子系统发育分析（包含ITS和LSU基因序列），成功将中国发现的两个新物种归类于Asprella subsection。该 subsection的特征包括：striate（条纹状）或squamulose（鳞片状）菌盖表面，蓝色菌柄，以及poliopus型菌褶边缘（Noordeloos et al. 2022a）。这种分类框架突破了传统形态学界限，为理解粉褶菌属的演化提供了新视角。

二、新物种的形态特征
1. E. qingluan（青鸾粉褶菌）
- 子实体特征：小型三褶菌型子实体，菌盖直径6-8毫米，呈现蓝灰色至蓝黑色渐变，菌盖中央颜色更深。菌褶离生，边缘 sterile（无性），菌褶表面可见轮纹状排列的菌丝体。
- 分子证据：ITS序列PX426788与LSU序列PX426795显示其与E. exile（异褶粉褶菌）亲缘关系最近（BI-PP=1.0），但菌盖颜色和质地差异显著。显微观察发现其 pileipellis（菌盖下层菌丝）细胞含有深褐色 vacuolar pigment（胞内色素），这一特征与已知Cyanula亚属物种存在区别。
- 分类争议：形态上介于Cistocruentata和Cyaneolilacina之间，但分子系统发育树显示其独立成簇（图1），支持将其作为新亚种处理。

2. E. zilin（紫麟粉褶菌）
- 子实体特征：小型伞菌型子实体，菌盖直径8-10毫米，表面覆盖灰色紫红色鳞片，菌盖边缘呈现蓝色晕染。菌柄蓝色，长度达25毫米，表面密布白色绒毛。
- 关键鉴别特征：菌盖表面具有 striations（条纹），菌柄蓝黑色，菌褶边缘 fertile（有性生殖）。显微观察显示其 pileipellis由圆柱状细胞构成，细胞壁含大量 sepia brown（棕褐色） vacuolar pigment。
- 系统发育地位：分子分析将其归入Asprella subsection的Cyaneolilacina亚sectio，但与模式种E. cyaneolilacinum存在显著差异，主要体现在菌盖鳞片密度和菌柄颜色变化梯度上。

三、研究方法的创新性
1. 显微形态与分子证据的整合：
- 采用5% KOH溶液和1% Congo red染色技术，结合扫描电镜观察，精确记录cheilocystidia（缘胞）和pileipellis（菌盖下层菌丝）的显微结构。
- 开发双步PCR扩增策略，通过 touchdown程序（65-52℃梯度）提高序列扩增成功率，最终获得89条相关序列（62个ITS，27个LSU）用于系统发育分析。

2. 分子系统发育模型优化：
- 首次将TPM2u+F+I+G4模型应用于ITS数据分析，结合TPM3u+F+I+G4模型处理LSU序列，显著提高拓扑结构置信度（ML-BP≥95%）。
- 采用混合贝叶斯方法（MRBAYES）与最大似然法（IQ-TREE）并行分析，解决传统单一方法导致的支持率偏差问题。

四、分类学意义与生态启示
1. Cyanula亚属的系统演化：
- 研究揭示该亚属存在形态与分子数据的显著分歧，例如E. qingluan在形态上更接近Cistocruentata секции，但分子证据显示其与Exilia секции亲缘关系更近。
- Asprella subsection的 polyphyletic特性被再次证实，其中6个亚sectio（Asprella、Exilia、Cistocruentata等）均呈现非单系群特征。

2. 中国粉褶菌多样性：
- 首次在中国记录到Asprella subsection的多样性，填补了该区域分类空白。两个新物种的发现使中国Cyanula亚属已知物种数从17个增至19个。
- 生态位分析显示，新物种多分布于常绿阔叶林下层腐殖质层，与宿主菌丝网络存在协同进化关系。

五、技术挑战与未来方向
1. 当前局限：
- 微观结构测量标准尚未统一，例如cheilocystidia的长度测量存在10-15%误差。
- 分子数据中存在大量未发表的GenBank序列（如OM987263、PX426788等），影响系统发育树的完全重构。

2. 建议研究方向：
- 开发基于宏基因组学的快速鉴定技术，解决传统形态学鉴定耗时长的问题。
- 建立中国粉褶菌属的分子数据库，整合ITS、LSU及tef1基因的多重标记数据。
- 加强与保护生物学结合，评估新物种的遗传多样性及濒危等级。

六、应用价值展望
1. 食用安全评估：两个新物种菌盖颜色与某些食用菌（如E. asperllum）高度相似，需开展毒性检测及分子鉴别研究。
2. 生态指示作用：其偏好腐殖质丰富的林下环境，可作为评估森林生态系统健康的重要指标。
3. 药用开发潜力：菌丝体提取物显示抑制白色念珠菌（Candida albicans）的活性（实验数据未发表）。

本研究通过形态-分子协同分类框架，成功描述了两个新物种，为伞菌分类学提供了方法论创新。其揭示的Cyanula亚属系统发育复杂性，提示未来研究需整合更多分子标记（如tef1、rpb2）和形态学特征（如spore print颜色、菌丝体解剖结构）。该成果已提交至中国微生物学会伞菌类群委员会，并纳入GBIF（全球生物多样性信息网络）实时更新系统。