帕夫拉西亚宁在头颈鳞癌荧光引导手术中的阴性研究：靶点表达验证对精准医学的重要启示

《Molecular Imaging》：Evaluation of Pafolacianine (Cytalux?) for Fluorescence-Guided Surgery in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma: A Negative Study with Important Clinical Implications

本研究针对头颈鳞状细胞癌(HNSCC)手术切缘阳性率高(10-30%)的临床难题，系统评估了首个FDA批准的肿瘤特异性荧光显像剂帕夫拉西亚宁（Pafolacianine，Cytalux?）的应用潜力。通过体外结合实验、体内异种移植模型成像和临床标本免疫组化分析，发现HNSCC中叶酸受体-α(FR-α)表达水平有限且异质性高，导致帕夫拉西亚宁肿瘤靶向性差、信背比低。该阴性结果明确了帕夫拉西亚宁不适用于HNSCC荧光引导手术，为精准医学中靶点表达验证提供了关键证据，避免了不必要的临床资源浪费。

　　

在头颈部肿瘤手术中，外科医生常常面临一个严峻挑战：如何在复杂解剖结构中精准切除肿瘤组织的同时最大限度保留重要功能结构？头颈鳞状细胞癌(HNSCC)作为最常见的头颈部恶性肿瘤，其手术切缘阳性率高达10-30%，意味着相当比例的患者术后切缘仍残留癌细胞。这种情况不仅增加了局部复发风险，还迫使患者接受辅助放化疗，显著影响生活质量和长期生存。

荧光引导手术(FGS)技术的出现为这一难题带来了新的解决思路。通过肿瘤特异性荧光显像剂，外科医生能够在术中实时可视化肿瘤组织，提高切除精度。帕夫拉西亚宁（Pafolacianine，商品名Cytalux^?）作为首个获得FDA批准的肿瘤靶向荧光显像剂，已在卵巢癌手术中展现出临床价值。其作用机制基于对叶酸受体-α(FR-α)的特异性靶向，该受体在多种实体瘤中过度表达。

那么，这个在卵巢癌中表现优异的显像剂能否为HNSCC患者带来同样的福音？范德比尔特大学医学中心的研究团队在《Molecular Imaging and Biology》上发表的最新研究给出了明确答案——遗憾的是，帕夫拉西亚宁在HNSCC中的应用前景十分有限。

研究人员采用多层次实验设计验证帕夫拉西亚宁在HNSCC中的适用性。关键技术方法包括：利用多株HNSCC细胞系进行体外结合实验；建立小鼠异种移植模型进行体内荧光成像；对来自头颈癌组织库的16例临床标本（8例肿瘤与8例正常配对组织）进行FR-α和FR-β免疫组化分析；以Panitumumab-IRDye800CW作为阳性对照剂。

FR-α表达分析

临床标本免疫组化结果显示，HNSCC肿瘤组织与正常组织间FR-α表达无显著差异（p>0.05）。62.5%的肿瘤样本呈现低表达（评分0-2），仅12.5%显示高表达（评分6-9），且表达模式呈现高度异质性。不同解剖亚位（喉、口咽、口腔）的肿瘤均显示相似的低表达水平，表明FR-α表达不足是HNSCC的普遍特征而非特定部位现象。

体外结合研究

剂量反应分析显示，所有测试的HNSCC细胞系在1小时和24小时时间点均表现出最低限度的帕夫拉西亚宁摄取。荧光强度值与FR-α阴性对照A549细胞系相当或更低，表明观察到的荧光可能代表非特异性结合而非FR-α介导的摄取。时间进程分析显示，延长孵育时间并未显著增加帕夫拉西亚宁结合。

体内荧光成像与生物分布

体内成像研究证实了体外观察到的差劲肿瘤靶向性。离体组织分析显示，帕夫拉西亚宁在肾脏（符合叶酸化合物肾清除特性）、皮肤和肝脏组织中积累最高，肿瘤组织荧光水平在所有分析组织中排名最低。皮肤平均荧光强度(MFI)值显著高于肿瘤值（p<0.01），这种非靶组织的高积累可能造成术中背景荧光干扰。

与Panitumumab-IRDye800CW的比较分析

与帕夫拉西亚宁形成鲜明对比的是，靶向表皮生长因子受体(EGFR)的Panitumumab-IRDye800CW在HNSCC异种移植模型中表现出强大的肿瘤靶向性和优异对比度。这种成功靶向反映了EGFR在80-90% HNSCC病例中的过度表达，进一步佐证了选择适当分子靶点对荧光引导手术成功的重要性。

本研究通过多模式评估提供了明确证据，表明帕夫拉西亚宁因HNSCC中FR-α表达不足和肿瘤信背比差而在此领域应用价值有限。观察到的MFI值远低于临床效用阈值，且皮肤等非靶组织的优先积累会产生显著背景荧光，可能干扰手术决策。

这一阴性发现强调了靶点表达验证在精准医学方法中的关键作用。与卵巢癌（80-90%病例显示FR-α过度表达）不同，HNSCC中FR-α表达有限且异质性高，这解释了帕夫拉西亚宁在不同癌种中表现差异的生物学基础。此类阴性研究对循证临床决策至关重要，可防止不必要的资源分配和患者暴露于无效干预措施。

该研究不仅为HNSCC荧光引导手术领域提供了重要参考，也凸显了阴性结果在科学研究中的价值——阻止类似研究的重复进行，避免努力重复和资源错配，同时指引领域关注更有前景的替代靶向策略。随着精准手术时代的到来，此类严谨的靶点验证研究将为个体化癌症治疗奠定坚实基础。