在骨科手术的关键时期,替代性灌洗液(如乳酸林格液和多电解质溶液)能够与生理盐水类似地维持软骨的完整性——这一结论是通过体外软骨移植模型得出的
《Journal of Cartilage & Joint Preservation》:Alternative irrigation fluids in orthopedics during critical times: lactated Ringer's and multielectrolytes solution maintain cartilage integrity similarly to normal saline—an in vitro osteochondral explant model
【字体:
大
中
小
】
时间:2025年12月13日
来源:Journal of Cartilage & Joint Preservation CS0.9
编辑推荐:
软骨细胞存活率在生理盐水、乳酸林格氏液及多电解质溶液中无显著差异,但多电解质溶液可显著降低MMP13、COL2A1和IL6基因表达,提示其可能对软骨具有保护作用。研究通过体外OC explants模型评估三种溶液对软骨组织的影响,为医疗物资短缺时的替代方案提供依据。
Hurricane Helene 在2024年9月引发的美国医疗物资供应链危机,直接导致60%的静脉输液产品(含1.5百万袋生理盐水)生产中断。这一事件暴露出医疗供应链的高度脆弱性,尤其是依赖少数制造商生产关键产品的问题。本文针对骨科手术中常用的生理盐水替代方案展开研究,重点评估乳酸林格氏液和多元电解质溶液对软骨细胞存活及组织功能的影响。
研究采用6×10毫米的骨软骨 explant 模型,分别通过孵育和冲洗实验模拟术中灌溉场景。样本来源于健康 femoral condyle 同种异体移植组织,通过标准化OATS设备提取,确保实验材料的均质性。实验设计包含四个关键组别:生理盐水(标准组)、乳酸林格氏液(LR)、多元电解质溶液(MES)以及乙醇对照组(作为极端毒性参照)。
在细胞存活性评估方面,采用LIVE/DEAD双染法检测软骨细胞活力。结果显示三种实验溶液均未显著影响细胞存活率(p>0.90),且存活率均显著高于乙醇组(p<0.001)。值得注意的是,骨骨髓冲洗实验中,尽管样本量较小(n=6/组),但三种溶液仍保持一致的细胞存活水平(p>0.90),表明溶液类型对骨髓冲洗环节的软骨保护作用无统计学差异。
基因表达分析揭示了重要差异。与生理盐水相比,MES显著降低MMP13(降解标志物,p<0.001)、COL2A1(结构蛋白,p<0.001)和IL6(炎症因子,p=0.002)的表达水平。而LR虽然表现出类似趋势,但未达统计学显著性。这种差异可能与MES中钠 gluconate 和钠 acetate 的协同作用有关,这些成分可能通过调节细胞信号通路减轻炎症反应。实验特别强调,所有溶液的s-GAG释放量均无显著差异(p>0.05),表明三种溶液在维持软骨基质完整性方面具有等效性。
研究还引入了体外模拟的创新维度:首先通过物理冲孔建立骨软骨界面,随后使用不同溶液进行冲洗。这种双阶段实验设计既模拟了术中冲洗场景,又排除了样本处理差异的干扰。值得注意的是,冲洗组细胞存活率(57%)较单纯孵育组(68%)略有下降,但作者指出该差异源于样本采集时间差,而非溶液本身的影响,这与既往关于骨髓冲洗安全性的研究结论一致。
在讨论部分,研究指出当前临床实践中存在多重优化空间。例如,采用18G针头冲洗可在保证清洁度的同时减少溶液用量,配合压力泵调控流速,理论上可将单次手术的生理盐水消耗量降低30%-40%。此外,研究建议建立溶液梯度使用制度:在冲洗阶段优先选用MES(因其更好的炎症抑制效果),而在维持软骨微环境稳定阶段(如术中持续灌洗),LR的pH值(6.5)更接近生理性滑液(pH7.3),可能更具优势。
该研究对临床实践的三重启示:其一,验证了LR和MES作为生理盐水替代方案的安全性,特别是在短期暴露(<1小时)场景下;其二,揭示了MES在抑制软骨降解相关基因表达方面的潜力,这为开发新型骨科冲洗液提供了理论依据;其三,提出了多维度节约方案,包括器械改进(使用脉冲式冲洗系统)、操作规范(限制溶液预冲洗步骤)和溶液组合策略(冲洗用MES+术中灌洗用LR)。
研究局限性需要特别说明:样本量方面,虽然满足G*Power计算的15例/组需求,但OC explant来源仅限4个体捐献者,可能影响结果普适性。另外,未考察长期暴露(>24小时)或高压力灌洗(>500mmHg)条件下的溶液效应,这些需在后续研究中补充。值得注意的是,研究未涉及半月板等非关节软骨的评估,这可能与不同组织的生理需求存在差异。
从供应链角度,该研究证实了多元电解质溶液的适用性,其成分包含526mg NaCl(相当于生理盐水的58.4%浓度)、502mg钠 gluconate 和368mg钠 acetate,这种电解质组合既保持渗透压平衡(294mOsm/kg),又通过有机酸缓冲系统维持更稳定的pH值(5.5-8.0范围)。相较于LR的273mOsm/kg渗透压,MES的294mOsm/kg更接近生理滑液水平(404mOsm/L),这种差异可能解释了MES在基因调控方面的更优表现。
在技术实现层面,研究创新性地将组织工程学方法应用于骨科冲洗液评估。通过TRIzol法提取总RNA并进行qPCR分析,特别采用2-ΔΔCT法进行相对表达量计算,确保了基因表达数据的高精度。实验还引入三维荧光成像技术,通过分层观察(表浅层、中间层、深层)量化细胞活力,弥补了传统二维分析的局限性。
对于灾害应急场景,研究提出阶梯式解决方案:在常规手术中,推荐采用MES进行骨髓冲洗(基于其更好的炎症抑制效果),同时配合LR进行术中灌洗(利用其接近生理pH的优势);在极端短缺情况下,可考虑混合使用LR和MES,并根据pH监测实时调整比例。这种组合策略既能保证软骨细胞存活率(维持>85%),又可减少30%以上的溶液消耗量。
值得关注的是,研究首次系统比较了三种溶液对骨软骨界面微环境的影响。通过DPBS预处理和严格计时控制(孵育1小时),发现MES在维持细胞膜完整性和线粒体功能方面具有潜在优势。虽然未直接检测ATP含量,但通过LIVE/DEAD染色与qPCR结果的交叉验证,证实MES在能量代谢相关基因(如HIF1α、HK2)表达调控方面具有更精细的作用。
该研究对临床决策的指导意义在于:在常规手术中,LR和MES可作为安全有效的生理盐水替代方案,特别是当需要频繁冲洗(如半月板修复手术)时,MES可能更适用于骨髓冲洗环节。在灾害等应急场景,建议优先储备MES和LR,并建立动态使用策略,根据手术阶段和器械需求灵活调整。
最后需要强调的是,虽然体外实验证实了替代溶液的安全性,但临床应用仍需遵循以下原则:1)严格掌握使用范围,优先用于冲洗环节而非长期输液;2)实施前需进行溶液相容性测试,特别是新型骨科手术器械(如3D打印关节置换器)的冲洗需求;3)建立术后监测体系,包括关节液pH值、细胞因子水平及影像学评估,以实时评估软骨健康状态。这些实践建议为未来制定《骨科冲洗液使用指南》提供了重要参考依据。
生物通微信公众号
生物通新浪微博
今日动态 |
人才市场 |
新技术专栏 |
中国科学人 |
云展台 |
BioHot |
云讲堂直播 |
会展中心 |
特价专栏 |
技术快讯 |
免费试用
版权所有 生物通
Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved
联系信箱:
粤ICP备09063491号