综述：动物模型中包含感觉神经的皮瓣再敏化效果评估——文献的系统性回顾

《Journal of Polymer Materials》：Evaluation of Resensibilization in Flaps Containing Sensory Nerves in the Animal Model – a Systematic Review of the Literature

皮肤瓣再感觉化评估方法研究：系统综述分析行为测试与免疫组化标记的应用价值。

　　
近年来，皮肤移植术后神经再支配问题在显微外科领域备受关注。传统手术更注重血管的吻合而忽视神经的修复，导致术后患者常面临感觉迟钝甚至神经性溃疡的困扰。基于此，本研究通过系统性文献综述，系统梳理了动物模型中神经再生评估方法的进展，为临床实践提供了新的技术路径参考。

在方法学层面，研究者采用PRISMA框架对PubMed、Embase和Cochrane Library数据库进行系统性检索，最终纳入15项动物实验研究（421只实验动物）。值得注意的是，研究样本主要来自大鼠（397只）和小鼠（24只），实验设计涵盖不同类型的皮瓣手术（如腹壁浅动脉皮瓣、背部皮肤岛状皮瓣等）和神经处理技术（神经外膜吻合、神经移植、 crush损伤模型等）。时间跨度从1990年到2022年，研究周期从数天到数月不等，为不同阶段的神经再生研究提供了数据支持。

在评估体系中，研究团队创新性地将行为学测试与分子生物学标记相结合。行为学方面，重点采用CTM肌腱反射测试，通过量化触觉与痛觉刺激的反射范围，构建了包括常规 mastectomy（CM）、皮肤保留式 mastectomy（SSM）和乳头保留式 mastectomy（NSM）在内的对比模型。实验数据显示，CM组的CTM反射面积在术后12周达到12.4±1.0 cm2，显著优于SSM（4.2±0.6 cm2）和NSM（4.4±0.6 cm2），而阴性对照组始终未出现有效反射（图2）。这种差异可能与手术方式对神经干的损伤程度直接相关，CM组最大程度的皮肤暴露为神经再生提供了更优的基础环境。

免疫组化方面，研究团队重点分析了PGP 9.5和CGRP两大神经再生标志物。PGP 9.5作为泛神经元标记物，在追踪神经纤维分布方面表现出色。例如，在皮肤缺血模型中，PGP 9.5阳性纤维在术后第7天已出现在周围组织中，第12天扩展至皮瓣边缘，第24天形成完整的神经再生网络。而CGRP作为痛觉神经特异性标记物，在直接神经吻合组（DN）中显示出更显著的再生特征：真皮层神经吻合组的CGRP阳性纤维密度在术后4周达到80%，而皮下神经吻合组仅为40%。值得注意的是，在 crush损伤模型中，CGRP的再生速度较神经移植组快2.5倍，这可能与机械损伤刺激了神经干侧支循环的开放有关。

实验设计还特别关注了神经血管协同再生机制。在比较不同缺血模型时发现，短暂缺血（24小时）组神经再生速度较持续缺血（72小时以上）组快40%，但后者在24天后神经再生密度反超前者。这种矛盾现象可能与持续缺血诱发的炎症微环境促进神经胶质细胞增殖有关。研究同时发现，保留血管神经束的皮瓣（n=32）在术后第7天就出现PGP 9.5阳性神经末梢，而完全离断血管神经的皮瓣（n=28）则需要延长至第21天才能检测到相同水平标记物，这为临床手术方案优化提供了依据。

在技术革新方面，研究团队提出了"真皮神经再生优先"理论。通过对比真皮层与皮下神经吻合（DN dermal vs subdermal）发现，真皮吻合组的CTM反射强度在术后4周达到2.8±0.3，而皮下吻合组仅为1.6±0.2。免疫组化数据显示，真皮层神经吻合后，CGRP阳性纤维在术后第7天就覆盖了表皮层的60%，而皮下吻合组需要延长至第21天才能达到同等效果。这种差异可能源于真皮层丰富的神经末梢网络为新生神经提供了更优的解剖定位。

值得关注的是，研究首次系统揭示了神经再生的时间窗特征。通过建立不同时间点的评估模型，发现神经再生存在显著的阶段性：0-7天为神经轴突延伸期，7-21天为髓鞘再生期，21-60天为功能整合期。在早期再生阶段（0-7天），PGP 9.5标记的神经纤维每日延伸速度达0.5mm，而在髓鞘再生阶段（7-21天），CGRP标记的痛觉纤维密度每周提升15%-20%。这种时间动态变化提示，临床评估应结合时间节点选择不同的检测指标。

研究还发现，神经吻合方式直接影响再生效果。在比较三种吻合技术（直接神经吻合、神经移植、 crush损伤）时，直接神经吻合组的CTM反射恢复速度最快（术后4周完全恢复），其次是crush损伤组（术后8周），而神经移植组需12周才能达到同等效果。免疫组化数据显示，神经移植组的PGP 9.5阳性纤维密度仅为直接吻合组的60%，CGRP阳性纤维密度更低。这提示机械损伤刺激可能比生物性移植更能促进神经再生。

在临床转化方面，研究团队提出了"三阶段神经再生评估体系"：急性期（0-14天）以神经轴突延伸为主，采用CGRP标记物检测；恢复期（15-42天）关注髓鞘再生，PGP 9.5标记物更敏感；稳定期（≥43天）则需综合评估功能恢复，建议结合行为学测试和蛋白质组学分析。这种分阶段评估方法可提高临床诊断的准确性，例如在急性期发现CGRP阳性纤维缺失可能提示神经吻合失败。

最后，研究团队前瞻性地提出了整合蛋白质组学技术的必要性。传统方法依赖单一标志物（如PGP 9.5或CGRP），而蛋白质组学分析可同时检测超过200种再生相关蛋白。初步实验显示，在神经再生第14天，蛋白质组学可检测到15种差异表达的再生标志物，其中BDNF、NGF和TGF-β在CGRP阳性神经纤维密度与临床感觉恢复评分（SSRS）间呈现显著正相关（r=0.82，p<0.01）。这种多维度的评估体系将有助于建立更精准的神经再生预测模型。

本研究对临床实践具有多重启示：首先，应优化皮瓣设计以减少神经损伤，例如采用"Z"字切口可降低神经分支损伤风险达40%；其次，神经吻合手术应优先考虑真皮层吻合技术，其感觉恢复效果较皮下吻合提升30%；再者，临床评估应建立时间节点的检测标准，急性期以CGRP检测为主，恢复期以PGP 9.5为辅，稳定期结合行为学测试。最后，建议开展多中心前瞻性研究，建立包含神经再生标志物、影像学特征和临床评估的综合数据库，为未来制定神经再生临床指南奠定基础。

这些发现不仅推动了基础神经再生研究的发展，更为临床实践提供了可操作的技术方案。后续研究可进一步探索不同神经类型（如运动神经与感觉神经）的再生差异，以及干细胞移植与神经吻合的协同效应。通过整合行为学评估、免疫组化分析和蛋白质组学技术，有望在3-5年内建立国际通用的神经再生评估标准，显著提升临床治疗水平。