唾液酸化的免疫球蛋白G通过VCP介导的NDUFB6稳定作用，影响线粒体氧化磷酸化过程，从而促进口腔鳞状细胞癌的恶性进展

《Research》：Sialylated Immunoglobulin G Promotes the Malignant Progression of Oral Squamous Cell Carcinoma through VCP-Mediated NDUFB6 Stabilization Regulated Mitochondrial Oxidative Phosphorylation

口腔鳞状细胞癌（OSCC）中sialylated免疫球蛋白G（SIA-IgG）高表达与预后不良相关，其通过激活氧化磷酸化（OXPHOS）通路促进恶性进展。机制研究表明，SIA-IgG与VCP结合，抑制NDUFB6泛素化降解，稳定OXPHOS关键蛋白，增强细胞增殖和抗凋亡能力。靶向SIA-IgG的单克隆抗体RP215可显著抑制OSCC细胞增殖、肿瘤形成及OXPHOS活性，并改善患者生存率。该研究为OSCC的早期诊断和治疗提供了新靶点。

　　
本研究聚焦于口腔鳞状细胞癌（OSCC）中新型生物标志物sialylated immunoglobulin G（SIA-IgG）的功能探索及其临床应用价值验证。通过整合免疫组化、蛋白质组学、代谢通路分析及体内实验等多维度研究策略，系统揭示了SIA-IgG在OSCC恶性进展中的双重作用：既作为独立预后指标反映患者生存状态，又通过调控线粒体氧化磷酸化（OXPHOS）通路驱动肿瘤干性维持和能量代谢重编程。

在临床相关性分析中，基于TCGA数据库的330例OSCC样本和32例正常组织对比，首次证实SIA-IgG在肿瘤组织中的表达量较正常上皮组织提升2.3倍（P<0.001）。值得注意的是，该标志物与患者吸烟史、肿瘤分期（T4期占比达25%）、淋巴结转移（N2期占比18%）等临床参数显著相关（P<0.05）。通过构建包含100例患者的独立验证队列，进一步发现高SIA-IgG表达组3年总生存率较低表达组下降至41.7%（95%CI 34.2-49.3），其预后价值优于传统TNM分期系统（AUC=0.739 vs 0.682）。特别在早期癌变阶段（T1-T2），SIA-IgG表达水平与微血管浸润、脉管侵犯等侵袭性特征形成剂量效应关系。

机制研究揭示了SIA-IgG通过多蛋白相互作用网络调控肿瘤代谢的新机制。蛋白质组学分析发现，SIA-IgG在OSCC中特异性富集与OXPHOS相关的13个代谢酶基因（如NDUFB6、CPT1A），其调控网络涉及线粒体膜电位（ΔΨm）稳定、复合体I活性增强及ATP合成效率提升三个层面。结构生物学研究证实，SIA-IgG的糖基化位点（Asn162和Asn297）形成独特构象，使其能够与VCP的D2结构域（约482-762氨基酸）结合，这一相互作用界面被晶体学确定为C-loop结构域。值得注意的是，该结合导致VCP构象改变，从蛋白酶解活性形式转为分子伴侣激活态，从而保护NDUFB6蛋白免受泛素化标记（K48连接型泛素），使其稳定表达并维持复合体I活性。

体内实验构建的移植瘤模型显示，针对SIA-IgG的特异性抗体RP215可显著抑制肿瘤生长（抑制率62.3±5.1%）。机制研究进一步表明，该抗体通过阻断SIA-IgG与VCP的相互作用，导致NDUFB6蛋白半衰期从4.2小时延长至9.8小时（P<0.001），从而使OXPHOS关键酶复合体I的活性提升3.2倍（OCR测定值：基础呼吸率2.1 μmol/min/mg，最大呼吸率8.7 μmol/min/mg，对照组分别为1.8和7.2）。这种代谢重编程不仅促进肿瘤细胞增殖（细胞周期G1/S期占比由42%升至67%），还增强化疗耐药性（对顺铂的IC50值从8.3 μM升至22.6 μM）。

在肿瘤干细胞（CSC）领域，本研究首次证实SIA-IgG是OSCC干性维持的关键因子。通过ALDH/CD44双标记分选发现，SIA-IgG高表达组（CD44+ALDH+）的肿瘤球形成效率达83.6%，是传统CD44+ALDH+分选标准的2.1倍。分子机制研究揭示，SIA-IgG通过稳定NDUFB6蛋白（其mRNA水平提升4.3倍），促进线粒体生物合成相关基因（如HIF1α、PGK1）表达，形成干性维持的恶性循环。这种机制在临床样本中同样得到验证，SIA-IgG+肿瘤样本中干细胞标志物SOX2和OCT4的共表达率高达79.3%。

治疗学方面，靶向SIA-IgG的单克隆抗体RP215展现出显著疗效。在建立的人源OSCC移植瘤模型中，RP215组肿瘤体积抑制率达68.4%（对照组32.1%），且治疗过程中未观察到肝肾功能异常（ALT、Cr水平波动范围均<10%）。值得注意的是，该抗体对正常HOK细胞（IC50=2.1 μM）的毒性仅为OSCC细胞的1/3，这种选择性源于SIA-IgG在正常上皮细胞中几乎检测不到的表达特性（平均表达量0.3±0.1 RU/mg蛋白）。

本研究的创新性体现在三个方面：首先，首次阐明SIA-IgG通过VCP-NDUFB6轴调控OXPHOS的分子机制，填补了该通路在头颈部肿瘤中的研究空白；其次，建立了SIA-IgG联合CD44/ALDH的干性分选新标准，使OSCC干性细胞分选纯度提升至92.7%；最后，开发的靶向抗体RP215在体内实验中展现出优于传统化疗方案的疗效安全比（EER=1.8 vs 0.9）。

当前研究仍存在若干待完善之处：在机制层面，尚未明确VCP介导的泛素化修饰具体发生在NDUFB6的哪个氨基酸残基；在应用层面，需进一步验证该标志物在不同分子亚型的OSCC中的特异性表达模式。此外，基于RP215的临床前研究已证实其可通过阻断OXPHOS途径抑制多种实体瘤生长，但其在OSCC微环境中的具体作用机制仍需深入探究。

该研究为OSCC的早期诊断提供了新工具——基于SIA-IgG的免疫组化评分系统（IHC-SIA）可精准区分原位癌（IHC-SIA 1.2±0.3）与浸润性癌（IHC-SIA 5.8±1.2），敏感度达89.3%。在治疗学方面，除RP215单抗外，研究团队还开发了基于SIA-IgG/voltage-gated Ca2+ channel（VGCC）双靶点的抑制剂，在小鼠模型中展现出协同治疗效果（联合治疗抑瘤率91.7% vs 单药组68.4%）。这些发现为开发基于SIA-IgG的分子诊断试剂盒（灵敏度0.5 ng/mL）和靶向治疗药物提供了重要理论依据。