Pinellia ternata与Coptidis Rhizoma的草药组合通过NLRP3介导的焦亡作用抑制幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）的定植

《Journal of Ethnopharmacology》：Pinellia ternata–Coptidis Rhizoma herb pair suppresses Helicobacter pylori colonization via NLRP3-mediated pyroptosis

幽门螺杆菌定植抑制与NLRP3介导吡罗醇症通路激活机制研究。黄连-半夏配伍（BXHL）通过抑制细菌粘附和激活NLRP3通路发挥抗定植作用，同时维持肠道菌群多样性，为新型辅助疗法提供依据。

　　
幽门螺杆菌（H. pylori）感染作为全球性公共卫生问题，其耐药性增强和传统治疗方案局限性已成为研究热点。本研究聚焦于中医经典药对 BXHL（黄连片参+黄连根茎），通过多维度实验验证其抑制 H. pylori 定植的新机制，并评估对肠道菌群的影响。该研究突破传统抗生素治疗框架，为消化系统疾病提供创新干预策略。

研究团队首先系统解析了 BXHL 复方的化学成分。通过液相色谱-串联质谱联用技术（LC-MS/MS），在正离子模式下检测到黄连素、掌叶防己碱等生物碱类成分，负离子模式下则分离出吴茱萸碱等特征化合物。这种双模式质谱分析不仅明确了复方有效成分，更揭示了不同离子化模式下活性物质的分布特征。

在体外实验中，研究构建了人胃上皮细胞（GES-1）与 H. pylori 共培养模型，模拟感染微环境。实验数据显示，BXHL 处理组在 24 小时内即可使幽门螺杆菌粘附量降低 62.3%，较单一成分治疗提升 18.7%。特别值得注意的是，该复方在 72 小时培养周期内仍保持稳定抑菌效果，且未观察到明显细胞毒性，这与其复方的协同作用机制密切相关。

体内实验采用 Balb/c 小鼠模型，通过人工胃模拟液构建慢性感染模型。结果显示，BXHL 灌胃治疗可显著降低胃黏膜 H. pylori 定植密度（P<0.001），其抑菌效果与标准四联疗法相当但副作用更少。组织病理学分析表明，给药组胃腺颈部粘液分泌量增加 1.8 倍，这可能与黄连素调节胃液pH值有关。

机制研究揭示了 BXHL 抑制 H. pylori 定植的双重作用机制：一方面通过阻断细菌 adhesin（粘附素）-宿主受体相互作用，显著降低幽门螺杆菌与胃上皮细胞间的结合力（抑制率 79.2%）；另一方面激活 NLRP3 介导的吡罗汀通路，使 caspase-1 活性恢复至对照组的 83.6%。特别在 H. pylori cagA 蛋白表达方面，BXHL 组较对照组下降 54.7%，而 pepsinogen I 水平提升 31.4%，提示其可能通过调节胃黏膜屏障功能发挥作用。

针对肠道菌群的研究采用 16S rRNA测序技术，发现 BXHL 组较四联疗法组操作菌群α多样性指数提高 18.5%，厚壁菌门/拟杆菌比值回归至健康对照组水平（P=0.032）。代谢组学分析显示，菌群产生的短链脂肪酸（SCFA）总量增加 42.3%，其中丁酸浓度提升达 67.8%，这可能与黄连根中的小檗碱通过调节肠道菌群代谢途径有关。

研究创新性地构建了"药物-宿主-菌群"三元作用模型：BXHL 通过直接抑制 H. pylori 膜电位（改变电位值从-147mV至-123mV），同时激活宿主免疫应答（使IL-1β分泌量增加 2.3倍），并维持肠道菌群稳态（Shannon 指数从3.21提升至3.58）。这种多靶点协同作用机制解释了为何该复方在治疗 14 天后仍保持 91.2%的根除率，且 3 个月内复发率仅为 7.4%。

在质量控制方面，研究团队建立了严格的LC-MS/MS检测标准，采用双柱分离技术（C18和 C8反相柱串联）实现 98.7%的化合物回收率。特别针对易受热分解的黄连素，开发了氮气保护下的液相色谱分离方法，确保检测灵敏度和稳定性。

该研究为传统医学现代化提供了重要范例。首先，证实了中药复方通过调节宿主免疫通路（NLRP3/caspase-1）抑制细菌定植的新机制；其次，发现黄连片参与黄连根茎的配伍比例（1:0.75）时抑菌活性最佳；更重要的是，揭示了传统药对在维持肠道菌群平衡方面的独特优势，这与其"整体调节"理论高度契合。

在临床转化方面，研究提出 BXHL 作为四联疗法增效剂的可行性。动物实验显示，联用 BXHL可使抗生素耐药率从 32.7%降至 6.1%。临床前药代动力学研究显示，黄连素在胃部达峰浓度（Cmax）达 4.2μg/mL，而小檗碱的肠肝循环率（SLI）为 0.38，这种分布特性使其能有效作用于幽门螺杆菌定植部位。

需要特别指出的是，该研究首次系统揭示了传统药对 BXHL 对 H. pylori 感染微生物组的影响。通过宏基因组测序发现，给药组厚壁菌门丰度提升 2.1倍，而变形菌门下降 35.6%，这种菌群结构变化与炎症因子（IL-6、TNF-α）水平下降（分别降低 41.3%和 28.7%）呈显著正相关（r=0.762，P<0.01）。

该成果在基础研究层面具有突破性意义：首次证实 NLRP3 通路在幽门螺杆菌定植过程中起关键作用，且该通路被抑制后会导致细菌胞内存活率提升 3.8倍。在应用层面，为开发新型抗生素耐药性克服策略提供了理论依据，其推荐的给药方案（餐前30分钟服用，每日3次）已通过初步临床验证（n=56，有效率92.1%）。

后续研究建议可重点关注以下方向：1）建立 BXHL 复方指纹图谱数据库，实现不同产地药材的质量控制；2）开展多中心临床试验，验证其在根除率（目标>90%）、复发率（目标<5%）和安全性（不良事件发生率<3%）方面的优势；3）解析 NLRP3 通路下游靶点（如 NLRC5、NLRP6）的详细调控网络，为开发靶向药物提供依据。

该研究成功将传统医学理论转化为现代科学语言，为复方现代化研究提供了方法论范例。通过建立"成分-靶点-通路-表型"四级关联模型，不仅解释了黄连片参协同黄连根茎的作用机制，更揭示了中药复方多靶点、网络化的作用特点，这对破解抗生素耐药难题具有重要参考价值。