破壁灵芝孢子粉通过调控上皮-间质转化（EMT）抑制甲状腺乳头状癌的机制研究

《Scientific Reports》：Study on the anti-tumor effect of Wall-broken ganoderma lucidum spore powder on papillary thyroid cancer

本研究针对甲状腺乳头状癌（PTC）现有疗法耐药性强、副作用大等问题，系统探讨了传统中药破壁灵芝孢子粉（BGLSP）的抗肿瘤作用。研究人员通过体外细胞实验（TPC-1、K1、KTC-1细胞系）和裸鼠移植瘤模型，发现BGLSP可剂量依赖性地抑制PTC细胞增殖与迁移，并通过激活caspase-8/caspase-3通路诱导凋亡。尤为重要的是，BGLSP通过上调E-cadherin、ZO-1等上皮标志物，下调N-cadherin、Vimentin及转录因子Snail、ZEB1，逆转EMT进程。该研究为BGLSP作为PTC潜在天然辅助疗法提供了实验依据，推动了中药抗肿瘤机制的现代化阐释。

　　

甲状腺癌是全球发病率增长最快的恶性肿瘤之一，近40年来发病率飙升约313%，其中乳头状癌（PTC）占甲状腺癌病例的80%。虽然手术、放射性碘治疗等传统手段具有一定效果，但耐药性和副作用成为临床难题。在这一背景下，传统中药的多靶点、低毒性优势备受关注。灵芝作为“上品”药材，其孢子粉富含三萜类等活性成分，但天然孢子壁难以消化，限制了生物利用度。破壁处理（BGLSP）能否破解这一瓶颈，并在PTC治疗中发挥作用？浙江大学医学院团队在《Scientific Reports》发表的研究，首次系统揭示了BGLSP通过调控上皮-间质转化（EMT）通路抑制PTC的分子机制。

研究采用细胞活力检测（CCK-8法）、克隆形成实验、流式细胞术、划痕愈合与Transwell迁移实验、Western blot蛋白分析及裸鼠移植瘤模型等关键技术，结合人PTC细胞系（TPC-1、K1、KTC-1）和动物实验，多维度评估BGLSP的抗肿瘤效果。

Anti-proliferative effects of BGLSP in PTC cells

研究通过CCK-8实验发现，BGLSP处理24小时后可剂量依赖性地抑制三种PTC细胞系的活力。在1 mg/mL浓度下，BGLSP显著降低细胞克隆形成能力，其中TPC-1细胞在200、400、600个细胞/皿的接种密度下，克隆数分别减少约90%、84%和65%。免疫荧光染色进一步显示，BGLSP处理组细胞核增殖标志物Ki-67蛋白表达下降约28%，证实其抑制增殖的作用。

Pro-apoptotic activity of BGLSP in PTC cells

流式细胞术检测显示，BGLSP可剂量依赖性诱导PTC细胞凋亡。Western blot分析表明，1 mg/mL BGLSP显著激活caspase-8和cleaved caspase-3蛋白表达，说明凋亡通过外源性途径启动。这一结果在三种细胞系中一致，提示BGLSP具有广谱促凋亡作用。

Anti-migratory effects through EMT modulation

划痕实验和Transwell实验表明，BGLSP处理24小时后显著抑制细胞迁移能力，其中TPC-1细胞迁移距离减少80%，穿透能力下降55%。细胞骨架荧光染色显示，BGLSP处理组细胞伪足结构减少，形态趋于稳定。Western blot结果显示，BGLSP上调上皮标志物E-cadherin和ZO-1，下调间质标志物N-cadherin、Vimentin及EMT相关转录因子Snail、ZEB1，证实其通过逆转EMT抑制迁移。

BGLSP inhibits tumor growth in vivo

在裸鼠移植瘤模型中，每日灌胃2 mg/kg BGLSP连续21天，可显著抑制肿瘤体积和重量。免疫组化显示Ki-67阳性区域减少，H&E染色可见肿瘤细胞核缩小、核分裂指数降低。Western blot进一步验证体内实验中EMT标志物和凋亡相关蛋白的变化与体外结果一致。

研究结论指出，BGLSP通过抑制增殖、诱导凋亡和逆转EMT三重作用机制抑制PTC进展。其活性成分（如三萜类、多糖等）的多靶点特性为开发低毒辅助疗法提供了新思路。尽管研究存在成分不明、机制深度不足等局限，但作为首次将BGLSP抗PTC作用与EMT通路关联的系统研究，为中药现代化和个性化肿瘤治疗奠定了实验基础。未来通过活性成分纯化、结构修饰及临床转化探索，有望推动BGLSP从传统药材走向精准医疗舞台。