流式细胞术尿液分析在新生儿及婴儿尿路感染中的诊断价值：快速筛查新策略

《Scientific Reports》：Diagnostic value of flow cytometric urine analysis in urinary tract infections of newborns and infants

本研究针对新生儿及婴儿尿路感染（UTI）快速诊断的临床需求，通过对比流式细胞术尿液分析（Sysmex UF-1000i）与传统尿培养的结果，确定了细菌计数83.4/μL为最佳截断值，其灵敏度达91.6%，阴性预测值（NPV）达98.5%。该技术可在1分钟内提供结果，有望作为无症状高危婴儿的有效筛查工具，避免治疗延迟及不必要的抗生素使用。

　　

尿路感染（UTI）是全球最常见的细菌感染之一，每年影响约1.5亿人。虽然在出生后头三天内罕见，但在新生儿和婴儿期却十分常见。足月新生儿的UTI患病率为0.1%至1%，而早产儿则高达4%至25%。尤其具有挑战性的是，新生儿UTI往往症状不典型，可能仅表现为喂养困难、体重增长不足、呕吐、易激惹、新生儿黄疸或单纯发热，这使得快速准确的诊断变得至关重要。延误诊断和治疗可能导致严重的并发症，如尿脓毒症和脑膜炎，后果不堪设想。

目前，尿培养是诊断UTI的“金标准”，但其主要缺点在于耗时过长，通常需要24至48小时才能获得结果。对于病情危重的新生儿，临床医生会根据既定方案启动经验性抗生素治疗。然而，对于那些一般情况良好、仅因 prolonged hyperbilirubinemia（ prolonged hyperbilirubinemia）或体重增长不足等原因接受检查的婴儿，如果有一种快速、可靠的筛查方法，就能帮助医生避免不必要的住院和抗生素使用，从而减少耐药菌产生和医疗成本。传统的尿液筛查方法，如试纸条尿分析、自动化尿分析或显微镜尿沉渣检查，其诊断价值，尤其是对新生儿而言，存在争议。例如，脓尿的定义在文献中不一，白细胞酯酶和亚硝酸盐的敏感性在新生儿中也不明确。

为了解决这一临床困境，土耳其马尔马拉大学的研究团队开展了一项横断面观察性研究，旨在评估流式细胞术尿液分析（Sysmex UF-1000i）在新生儿和婴儿UTI快速诊断中的价值。他们的研究成果发表在《Scientific Reports》上，为新生儿UTI的早期筛查提供了新的见解。

研究人员利用荧光流式细胞技术，探索能否通过快速测定尿液中的白细胞（WBC）和细菌（BACT）数量，来高效地筛查UTI。这种技术能在约1分钟内完成分析，每小时可检测多达100个样本，大大缩短了等待时间。本研究的核心是比较Sysmex UF-1000i的分析结果与标准尿培养结果，并确定能够实现最高灵敏度和阴性预测值（NPV）的白细胞和细菌截断值。

为开展此项研究，研究人员在2019年4月至2021年12月期间，从新生儿重症监护室（NICU）和新生儿门诊收集了尿液样本。纳入标准包括因体重增长不足、高胆红素血症或疑似败血症而需进行尿液检查的婴儿，且其家属签署了知情同意书。排除标准包括无法在规定时间内送达实验室或样本量不足无法进行流式细胞分析的样本。

尿液样本通过导管或尿袋收集。采集后，样本在一小时内送至微生物学实验室。首先进行常规培养（CC），将样本接种在5%绵羊血琼脂平板或麦康凯琼脂平板上，于37°C培养24至48小时。菌落计数超过10,000 CFU/mL（导管尿）或≥100,000 CFU/mL（尿袋尿）的单一致病菌生长定义为UTI。随后，使用Sysmex UF-1000i流式细胞分析仪对同一份尿液样本进行检测。该仪器通过荧光染料标记尿液中的核酸（DNA和RNA），当细胞逐个流过激光束时，检测其大小、颗粒度和核酸信息，从而定量报告尿液中的白细胞和细菌数量。

研究共分析了103名患者的138份尿液样本。这些婴儿中，43.7%为自然阴道分娩，63.1%为男性。平均胎龄为34.4±4.9周，平均出生体重为2526±1056克。采集尿液样本的中位日龄为14天（范围4-174天）。样本收集方式上，38.8%通过导管采集，5.8%存在留置导管。送检尿液的主要原因包括 prolonged hyperbilirubinemia（48.5%）、疑似败血症（42.8%）和体重增长不足（8.7%）。

微生物学培养结果

在138份样本中，57%（79份）培养无生长，34%（47份）报告为污染，仅有9%（12份）显示细菌生长。检出的细菌包括粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌复合体、白色念珠菌和鸟拉尔菌属。值得注意的是，所有尿培养阳性的患者均未发现白细胞增多、白细胞减少、血小板减少或C反应蛋白（CRP）升高。在16例因感染标志物阳性或疑似UTI而进行泌尿系统超声检查的婴儿中，仅2例发现2级肾积水。

流式细胞术与尿培养的相关性分析

研究人员采用贝叶斯Kendall's tau检验评估了流式细胞术检测的白细胞计数（WBC）和细菌计数（BACT）与尿培养结果之间的相关性。分析显示，白细胞计数与培养结果之间无显著关联（BF₁₀= 0.181，支持无关联假设）。相反，细菌计数与培养结果呈现出非常强的相关性（BF₁₀> 100）。

最佳截断值的确定

通过受试者工作特征（ROC）曲线分析，研究人员评估了不同细菌计数截断值下的诊断效能指标，包括灵敏度、特异性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）。分析发现，白细胞计数未能找到理想的诊断截断值。然而，细菌计数显示出优异的判别能力。当细菌截断值设定为83.4/μL时，诊断效能最佳：灵敏度为91.6%，特异性为88.6%，阳性预测值（PPV）为55%，阴性预测值（NPV）高达98.5%。Youden指数为0.8027，曲线下面积（AUC）为0.943。其他截断值如26.7/μL虽能达到100%的灵敏度，但特异性较低（60.76%）。

研究的优势与局限性

本研究的优势在于聚焦于新生儿和婴儿这一特殊群体，并明确了流式细胞术在该人群UTI筛查中的应用价值。然而，研究也存在一些局限性，包括单中心设计、样本量相对较小、缺乏健康婴儿对照组以及较高的尿液污染率（34%）。污染率较高可能与60%的样本通过尿袋收集以及家长操作过程中的无菌技术不当有关。

结论与展望

本研究结果表明，对于新生儿和婴儿，尤其是那些无症状但存在UTI风险（如 prolonged hyperbilirubinemia）的个体，Sysmex UF-1000i流式细胞尿液分析仪可作为一种有价值的快速筛查工具。确定的细菌计数截断值83.4/μL具有高灵敏度（91.6%）和高阴性预测值（NPV）（98.5%）。这意味着，对于检测结果低于此截断值的婴儿，临床医生可以更有信心地等待尿培养结果，从而避免不必要的抗生素治疗。而对于结果高于截断值的婴儿，则可以考虑提前48小时启动经验性抗生素治疗，从而潜在降低尿脓毒症的风险。研究人员建议，将来应在更大的新生儿队列中进一步验证这一截断值，以优化临床实践，实现新生儿尿路感染的早诊断、早治疗，最终改善患儿的预后。