液相色谱-紫外检测法在评估大麻浓缩物中28种大麻素（含CBD、Δ9-THC、Δ8-THC）测定中的深度研究

《CHROMATOGRAPHIA》：An In-Depth Study Evaluating the Determination of CBD, Δ9-THC, Δ8-THC, and 25 Additional Cannabinoids in Cannabis Concentrates by Liquid Chromatography with Absorbance Detection

本研究针对Δ8-THC等合成大麻素在浓缩物中引发的色谱干扰问题，系统评估了LC-PDA方法对28种大麻素的检测能力。研究发现Δ8-THC基样品中存在多种异构体共洗脱现象，导致Δ9-THC定量结果偏高，并联合第三方实验室分析了2.3万份浓缩物数据，揭示了合成副产物的普遍存在。该研究为规范大麻检测方法提供了关键依据，凸显了LC-MS技术在复杂基质中的必要性。

　　

随着2018年美国《农业改进法案》将工业大麻合法化，大麻产业收入从2018年的165亿美元激增至2025年的454亿美元。法案将大麻定义为干重中Δ⁹-四氢大麻酚（Δ⁹-THC）质量分数≤0.3%的 Cannabis sativa 植物。然而，高THC含量成品的大麻产品合法化范围持续扩大，截至2025年4月，美国41个州批准了医疗大麻，24个州（及哥伦比亚特区）批准了娱乐大麻。工业大麻种植量激增导致供需失衡，促使科学家开发出从富含大麻二酚（CBD）的工业大麻提取物中合成Δ⁸-THC、Δ¹⁰-THC等大麻素的工艺。这些合成过程常产生异构体混合物，而大麻浓缩物（如油剂、电子烟液、蜡状物等）成为主要成品形式。

美国国家标准与技术研究院（NIST）化学科学分部（CSD）此前建立了液相色谱-光电二极管阵列检测器（LC-PDA）方法，用于测定大麻油中的CBD、Δ⁹-THC等大麻素。然而，Δ⁸-THC基浓缩物中合成副产物的涌现对Δ⁹-THC的准确定量构成挑战。本研究旨在扩展该LC-PDA方法至Δ⁸-THC基和CBD基浓缩物，评估其在实际样品中的适用性，并与Kaycha实验室合作分析2.3万份浓缩物数据，揭示当前市场中大麻素的分布特征。

关键技术方法

研究采用LC-PDA分析33种商业大麻浓缩物（19种油剂、14种电子烟液），基于Shimadzu Cannabis Analyzer系统和C18色谱柱，以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱。样本经甲醇提取、涡旋振荡、离心过滤后稀释检测。通过保留时间和紫外光谱比对28种大麻素标准品（包括Δ⁸-THC、Δ¹⁰-THC立体异构体、exo-THC等），定性识别未知峰；定量分析CBD、Δ⁹-THC和Δ⁸-THC时采用外标法和220 nm检测波长。Kaycha实验室提供的2024年2.3万份浓缩物数据用于统计大麻素检出频率与质量分数分布。

研究结果

LC-PDA对28种大麻素的分离能力

原方法针对8种中性大麻素的分离在8分钟内完成，但扩展至28种大麻素后出现多组共洗脱现象：

• •
  CBDV/CBGV、CBD/Δ⁹-THCV、Δ⁹-THCP/Δ⁸-THCP三对化合物完全共洗脱；
• •
  exo-THC、Δ⁹-THC、Δ⁸-THC和(9R)-Δ⁷-THC在6.50–7.00分钟形成簇状共洗脱峰；
• •
  Δ¹⁰-THC立体异构体与CBC等化合物在7.15–7.70分钟重叠。
  紫外光谱分析显示多数共洗脱组分谱图高度相似，无法通过波长选择实现区分，仅(9S)-Δ^6a,10a-THC在264 nm处可规避CBL干扰。

CBD基与Δ⁸-THC基浓缩物中的大麻素鉴定

CBD基油剂（如Oil 1、5、10）主要检出CBD、CBDV、CBN等，未知峰较少；而Δ⁸-THC基油剂（如Oil 9、16、19）中Δ⁸-THC峰显著高于Δ⁹-THC，且存在exo-THC、(6aR,9S)-Δ¹⁰-THC等合成副产物，导致Δ⁹-THC定量值因共洗脱而偏高。电子烟液样品（如Vape 1、11、12）色谱图更复杂，出现CBE、Δ⁹-THCB等未知峰，凸显基质差异性对检测的干扰。

商业样品中CBD、Δ⁹-THC和Δ⁸-THC的定量比较

NIST测定值与制造商报告值在64%的油剂中CBD结果一致，但Δ⁸-THC仅33%一致。Δ⁹-THC在Δ⁸-THC基样品中因共洗脱未获准确定量。部分电子烟液（Vape 13–14）的NIST值显著低于标签值，反映厂商检测可能存在校准或前处理误差。

大麻浓缩物中大麻素的普遍性与质量分数

Kaycha实验室2024年数据显示，Δ⁹-THC在95%以上浓缩物中检出，质量分数多＞1%；Δ⁸-THC检出率介于2.8%（科罗拉多州）至63.8%（佛罗里达州），平均质量分数最高达24.4%。次要大麻素如CBG、CBN检出频率超60%，Δ¹⁰-THC和exo-THC在科罗拉多州和纽约州实验室均有检出，其存在加剧了Δ⁹-THC定量的复杂性。

结论与意义

本研究证实LC-PDA方法适用于CBD基浓缩物分析，但Δ⁸-THC基样品中合成副产物（如exo-THC、Δ¹⁰-THC异构体）的共洗脱严重干扰Δ⁹-THC准确定量。尽管紫外光谱辅助鉴定部分未知峰，多数共洗脱问题仍需通过LC-MS/MS等更高选择性技术解决。联合Kaycha实验室的大规模数据进一步揭示合成大麻素在浓缩物中的普遍性，呼吁检测方法需持续更新以应对新兴异构体挑战。该研究为法规制定、实验室质量控制及标准方法优化提供了关键科学依据，发表于《Chromatographia》凸显其分析方法学领域的价值。