腹泻性贝毒纳米金标记探针酶联免疫检测技术

　　

摘要： 腹泻性贝毒(DSTs)是由海洋中有毒藻产生的一类脂溶性毒素,其主要组分为大田软海绵酸(OA)、鳍藻毒素-1(DTX-1)和鳍藻毒素-2(DTX-2),可通过食物链在贝类体内累积,人类食用有毒贝类会对健康产生不良影响,开展腹泻性贝毒检测可有效保障我国食品安全。本研究依据直接竞争酶联免疫技术(ELISA)原理,参考种子生长法,利用纳米金颗粒(AuNPs)制备纳米金棒,并与大田软海绵酸抗体-辣根过氧化物酶(OA-HRP)偶联合成纳米探针,建立纳米金棒标记-OA-HRP直接ELISA检测技术。该项技术具有明显检测优势,检出限为2.32 ng·mL^-1,定量限为2.97 ng·mL^-1,样本加标回收率为85.2%～117.8%,批内、批间变异系数均低于20%;该技术对大田软海绵酸(OA)、鳍藻毒素-1(DTX-1)和鳍藻毒素-2(DTX-2)显示出良好的特异性,与其他6种脂溶性毒素——原多甲藻酸(AZA-1、AZA-2、AZA-3)、扇贝毒素-2(PTX-2)、虾夷扇贝毒素(YTX)和类虾夷扇贝毒素(hYTX)无交叉反应,且与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)的测定结果具有较好的相关性。本研究建立的纳米金棒标记-OA-HRP直接ELISA技术明显提高了DSTs的检测灵敏度,可用于海产品DSTs的快速定量检测分析,具有重要的应用前景。