CCR8调控CD8+组织驻留记忆T细胞在移植排斥中的作用机制与治疗潜力

《Scientific Reports》：Single-cell analysis indicating CCR8 modulates CD8+ tissue-resident memory T cells to attenuates rejection in transplantation

语 本研究针对器官移植后免疫排斥的临床难题，通过单细胞RNA测序等技术，首次揭示趋化因子受体CCR8通过调控CD8+组织驻留记忆T细胞（TRM）的迁移、聚集与功能活化，加剧移植排斥反应。阻断CCR8或其配体CCL1/CCL8可显著延长小鼠皮肤移植物存活，为靶向TRM细胞的移植免疫治疗提供新策略。

　　

器官移植是终末期器官衰竭患者的生命希望，然而免疫排斥仍是制约移植器官长期存活的主要障碍。在排斥反应中，T细胞扮演核心角色，尤其是近年来备受关注的“组织驻留记忆T细胞”（Tissue-resident memory T cells, TRM）。这类细胞长期驻扎在非淋巴组织中，如同一支常驻边防军，能快速响应局部抗原并释放效应分子，因此在移植排斥中具有重要作用。然而，TRM细胞如何在移植器官中聚集、活化，其背后的调控机制尚不明确，靶向TRM的免疫干预策略也亟待探索。

针对这一科学问题，青岛大学附属医院器官移植中心王雪腾、李新强、蔡海伦等人在《Scientific Reports》发表最新研究，首次通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）等技术揭示趋化因子受体CCR8是调控CD8⁺TRM细胞在移植排斥中的关键分子。研究发现，阻断或敲除CCR8能显著抑制CD8⁺TRM细胞在移植皮肤中的聚集与功能，延长移植物存活，为临床抗排斥治疗提供了新靶点。

研究团队整合了单细胞RNA测序、流式细胞术、免疫组化及免疫荧光等多技术手段，利用小鼠皮肤移植模型，系统分析了CCR8在TRM细胞动态变化中的作用。实验动物包括C57BL/6J、BALB/c及CCR8基因敲除（CCR8KO）小鼠，通过同系或同种异体皮肤移植，观察移植后免疫细胞浸润与排斥反应。

3.1 TRM细胞在排斥同种异体移植物及次级淋巴器官中富集

在同种异体皮肤移植模型中，移植后第7天，移植物中CD8⁺CD69⁺CD103^-TRM细胞比例显著升高，且表达免疫检查点分子PD-1、TIGIT和CTLA-4水平上升，提示其处于活化或耗竭状态。组织病理显示异体移植物中CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺T细胞浸润加剧，且TRM标志物CD69与CD103表达上调。

3.2 单细胞RNA测序揭示免疫细胞亚群与信号差异

scRNA-seq分析显示，同种异体移植物中CCR8在CD8⁺TRM细胞中高表达，且TRM细胞与巨噬细胞、NK细胞等互作增强。细胞通讯分析提示异体移植中CD40、PD-L1、NRG等信号通路信息流增强，可能与TRM介导的排斥相关。

3.3 受体来源的CD8⁺TRM细胞在移植物中聚集并表达CCR8

通过CD45.1/CD45.2嵌合模型追踪发现，移植后第7天，移植物中绝大多数CD8⁺TRM细胞来源于受体，且CCR8表达随时间推移逐渐上调，峰值出现在移植后第7天。

3.4 CCR8抑制延长移植物存活并减弱CD8⁺TRM活化

使用CCR8抑制剂R243处理后，移植物存活时间显著延长，CD8⁺TRM细胞数量及其产生的GZMB（颗粒酶B）、IFN-γ、IL-2等效应分子均下降，免疫检查点表达亦降低。

3.5 CCR8敲除损害TRM浸润并减轻炎症反应

CCR8KO小鼠接受异体皮肤移植后，移植物中炎症细胞浸润减少，组织损伤减轻，血清中TNF-α、IFN-γ等促炎因子水平下降，TRM细胞比例及相关免疫检查点表达均降低。

3.6 CCR8缺陷重塑皮肤免疫景观并降低CD8⁺TRM比例

scRNA-seq显示CCR8缺失导致皮肤中T细胞尤其是CD8⁺TRM细胞比例下降，伪时序轨迹分析提示CD8⁺效应T细胞（Teff）向TRM分化受阻。

3.7 CCR8缺陷改变移植微环境中免疫细胞互作与基因表达

CellChat分析发现CCR8敲除后巨噬细胞与CD8⁺TRM细胞间互作减弱，CD40、PD-L1、NRG等信号通路上调，提示免疫稳态失衡。

3.8 CCL8或CCL1阻断通过减少TRM浸润与活化延长移植物存活

中和CCL8或CCL1后，移植物存活延长，CD8⁺TRM细胞浸润减少，其效应功能与免疫检查点表达均受抑制，证实CCR8配体在TRM招募中的关键作用。

结论与讨论

本研究系统阐明CCR8通过调控受体来源CD8⁺TRM细胞的迁移、滞留与功能活化，驱动移植排斥反应。靶向CCR8或其配体可有效抑制TRM介导的局部免疫反应，延长移植物存活。这一发现不仅深化了对TRM细胞在移植免疫中作用机制的理解，也为开发新型抗排斥药物提供了理论依据。尽管CCR8靶向治疗在临床转化中仍需考虑其对组织免疫稳态的潜在影响，但其作为联合免疫抑制方案的补充策略，具有重要应用前景。未来研究可进一步探索CCR8在血管化实体器官移植中的作用，以及其与调节性T细胞（Treg）等免疫细胞的互作机制，为移植耐受诱导提供新思路。