尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）同时感染耐药铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和腐生菌（Saprolegnia parasitica）：对水质、表型特征及基因型谱的探究

《Veterinary Research Communications》：Synchronous natural infection of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) by drug-resistant Pseudomonas aeruginosa and Saprolegnia parasitica: insights into water quality, phenotypic traits, and genotypic profiles

尼罗罗非鱼在Manzala湖10-12月期间发生创伤弧菌与水霉病联合感染，病理特征包括败血症、鳃部腐烂及棉絮状皮损。水质检测显示盐度升高（>35‰）、氨氮（>0.1 mg/L）及亚硝酸盐（>0.02 mg/L）超标，水温（18-22℃）低于适宜阈值。分子鉴定证实分离菌株与创伤弧菌属（Pseudomonadaceae）和水霉科（Saprolegniaceae）祖株同源性高，其中创伤弧菌携带tox'A（93.9%）、exo'S（66.7%）等毒力基因，同时存在tet'A（100%）、blaTEM（93.9%）等多重耐药基因，12.1%菌株呈现广泛耐药（XDR）特性。扫描电镜显示溃疡皮肤表面存在水霉菌丝网络。

　　

摘要

本研究调查了2023年10月至12月期间，曼扎拉湖中尼罗河鲈鱼（Oreochromis niloticus）同时感染铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和寄生腐霉（Saprolegnia parasitica）的情况，通过对分离出的病原体进行表型和基因型分析。自然感染的鱼类表现出败血症症状、鳍部腐烂以及皮肤和鳍上出现棉絮状物质。水质分析显示盐度升高、游离氨和亚硝酸盐含量超标，同时水温也处于不适宜的状态。在临床受影响的鱼类中，30%的样本中分离出铜绿假单胞菌，在濒死鱼类中，这一比例升至31.8%。通过对铜绿假单胞菌的16S-rDNA和寄生腐霉的ITS-rDNA基因进行分子分析，发现它们分别与假单胞菌科（Pseudomonadaceae）和腐霉科（Saprolegniaceae）的祖先菌株具有遗传相似性。铜绿假单胞菌的致病性通过β-溶血作用和生物膜形成得到证实。对抗铜绿假单胞菌的抗菌药物敏感性测试显示，该菌对硫酸粘菌素（100%）和美罗培南（87.95%）高度敏感，但对四环素（100%）和氨苄西林（93.9%）表现出明显耐药性。毒力基因分析鉴定出多个关键基因，包括toxA（93.9%）、exoS（66.7%）、lasB（45.45%）、phzM（33.3%）、pslA（33.3%）和fliC（42.4%）。耐药性分析发现存在多种抗生素耐药基因，包括tetA（100%）、blaTEM（93.9%）、blaCTX?M?1（81.8%）、blaOXA?1（54.4%）、qnrA（30.3%）和blaNDM?1（12.1%）。在铜绿假单胞菌分离株中，分别有12.1%和27.3%表现出广泛耐药性（XDR）和多重耐药性（MDR）表型，且多重耐药性指数较高。扫描电子显微镜（SEM）观察皮肤病变发现，寄生腐霉的菌丝网络广泛存在于溃疡的皮肤表面。高毒力、多重耐药的铜绿假单胞菌和寄生腐霉的共存凸显了治疗的复杂性，并强调了在水产养殖系统中采取针对性干预策略以预防和控制疾病的必要性。