结直肠癌肝转移中CD1a+未成熟与CD208+成熟树突状细胞的空间分布及预后意义：从癌旁黏膜到转移灶的免疫景观解析

《Cancer Immunology, Immunotherapy》：Spatial patterns and prognostic relevance of CD1a+ immature and CD208+ mature dendritic cells in colorectal cancer from non-tumor adjacent mucosa to liver metastases

语 本研究针对结直肠癌（CRC）肝转移（LM）中树突状细胞（DCs）亚群的空间分布与预后关联不明确的问题，通过免疫组化技术系统分析了CD1a+（未成熟）和CD208+（成熟）DCs在癌旁黏膜（NAM）、原发灶（pCRC）及配对肝转移灶（LM）中的梯度分布。结果显示，CD1a+细胞在肿瘤中心（TC）富集，CD208+细胞在瘤周区（PT）及淋巴聚集区（LA）优势分布；同步性LM中TC区高CD208+密度与生存改善相关（HR=0.47），而异时性LM中TC区高CD1a+密度预示更好预后（HR=0.44）。该研究首次揭示DCs空间分布与转移时序的交互作用，为CRC免疫治疗提供新靶点。

　　

论文解读

结直肠癌（Colorectal Cancer, CRC）是全球癌症相关死亡的主要原因之一，其中肝转移（Liver Metastases, LM）是影响患者预后的关键因素。尽管手术和化疗手段不断进步，约60%的CRC患者最终会发生远处转移，而肝脏因门静脉引流和免疫耐受微环境成为最常见的转移靶器官。近年来，肿瘤免疫微环境（Tumor Microenvironment, TME）的组成被证实与CRC的进展和治疗反应密切相关，尤其是树突状细胞（Dendritic Cells, DCs）作为连接先天与适应性免疫的核心桥梁，其功能状态与空间分布可能主导抗肿瘤免疫的成败。然而，当前关于DCs在CRC原发灶与转移灶中的动态变化、亚群特异性作用及临床意义仍存在大量争议：例如，CD1a⁺未成熟DCs在部分研究中显示为保护性因子，而在另一些研究中却与免疫抑制相关；类似地，CD208⁺成熟DCs的预后价值也未明确。更关键的是，既往研究多局限于原发肿瘤，缺乏对配对肝转移灶的系统比较，且未区分同步性（诊断时即存在）与异时性（原发灶切除后出现）转移的免疫特征差异。这些空白限制了基于DCs的精准免疫治疗策略的开发。

为此，研究团队在《Cancer Immunology, Immunotherapy》上发表了题为“Spatial patterns and prognostic relevance of CD1a⁺immature and CD208⁺mature dendritic cells in colorectal cancer from non-tumor adjacent mucosa to liver metastases”的论文，通过对99例CRC患者（55例同步性LM、44例异时性LM）的癌旁黏膜（NAM）、原发CRC（pCRC）及LM组织进行多区域免疫组化分析，结合全玻片数字化扫描与QuPath软件定量，首次绘制了CD1a⁺与CD208⁺DCs从正常黏膜到转移灶的详细空间图谱，并揭示了其分布规律与患者总体生存（Overall Survival, OS）的关联。

关键技术方法

研究纳入1999–2021年间接受根治性手术的CRC肝转移患者，排除既往肝切除、新辅助治疗或急诊手术病例。对每位患者的NAM、pCRC及LM样本进行FFPE（福尔林固定石蜡包埋）切片，采用自动化免疫组化染色检测CD1a（未成熟DCs标记）与CD208（成熟DCs标记）。通过Olympus VS200扫描仪获取全玻片图像，在QuPath中标注肿瘤中心（TC）、内缘（IM）、外缘（OM）、瘤周区（PT）及NAM区域，计算细胞密度（个/mm²）。生存分析采用Kaplan-Meier曲线与Cox回归模型，空间相关性通过Spearman检验与多元线性回归验证。

研究结果

1. DCs的形态与空间分布特征

在NAM中，CD1a⁺DCs几乎缺失，而CD208⁺DCs形成10–20个细胞的微簇聚集于黏膜相关淋巴滤泡（Lymphoid Follicles, LF）的套区与边缘带。

在pCRC中，CD1a⁺细胞稀疏分布于腺体间质，密度梯度为IM > TC > OM > PT；CD208⁺细胞则富集于瘤周淋巴聚集区（Lymphoid Aggregates, LA）。在LM中，CD1a⁺细胞极为稀少，而CD208⁺细胞在TC与IM区形成簇状聚集，且OM区LA数量显著多于pCRC。

2. NAM与pCRC的DCs密度比较

CD1a⁺密度在pCRC的TC区显著高于NAM（p<0.0001），而CD208⁺密度在两者间无差异，提示原发肿瘤可能通过趋化因子（如CCL2）招募单核细胞分化为未成熟DCs。

3. pCRC与LM的DCs梯度分布

CD1a⁺细胞在pCRC和LM中均呈现TC/IM > OM/PT的梯度，而CD208⁺细胞呈相反趋势（OM/PT > TC/IM），符合“缺氧核心抑制DCs成熟，外周LA促进成熟”的迁移-成熟轴理论。同步性LM各区域的CD1a⁺密度均低于对应pCRC区（p<0.05），支持原发肿瘤作为“单核细胞库”的功能。

4. 生存分析的核心发现

在同步性LM中，TC区高CD208⁺密度与OS改善显著相关（HR=0.47, p=0.033）；而在异时性LM中，TC区高CD1a⁺密度预示更好预后（HR=0.44, p=0.050）。多元回归模型进一步显示，同步性LM中IM区的CD208⁺密度可由TC区的CD1a⁺密度正向预测（R²=0.679），提示未成熟DCs向外周迁移并成熟为关键机制。

5. DCs与T细胞的协同作用

CD208⁺DCs在所有区域均与CD3⁺（总T细胞）、CD8⁺（细胞毒性T细胞）及CD45RO⁺（记忆T细胞）密度正相关，尤其在LM的TC与IM区，表明成熟DCs通过三级淋巴结构（Tertiary Lymphoid Structures, TLS）激活T细胞应答。异时性LM中CD1a⁺DCs与CD45RO⁺T细胞的相关性则提示未成熟DCs可能直接激活记忆T细胞。

结论与意义

本研究首次系统揭示了CD1a⁺与CD208⁺DCs在CRC原发灶与肝转移中的空间极化分布：未成熟DCs富集于肿瘤内部，成熟DCs聚集于瘤周淋巴结构。更重要的是，其预后价值高度依赖于转移时序——同步性LM依赖瘤内成熟DCs激活T细胞应答，而异时性LM中未成熟DCs与记忆T细胞的交互成为生存保护因素。这一发现突破了既往仅关注细胞数量的局限，强调空间分布与疾病演进时序的交互影响，为CRC免疫分型提供了新维度。未来，针对DCs迁移与成熟途径的干预（如DC疫苗或原位成熟诱导）可能改善肝转移患者的免疫治疗应答，尤其需根据转移模式制定个性化策略。