Claudin-18在胃型腺癌和HPV相关宫颈腺癌中的表达

CLDN18作为胃型腺癌（GAS）的诊断标志，在HPV相关和非HPV相关子宫内膜腺癌中的表达差异显著。免疫组化显示92%的GAS（≥5%细胞表达）和7%的HPV相关ECA阳性，qPCR证实CLDN18.2在GAS和部分HPV相关ECA中表达，而CLDN18.1未检出。尽管GAS和HPV相关ECA在p16过表达和Rb表达模式上存在重叠，但CLDN18联合HPV-ISH和分子检测可有效区分两者。研究提示CLDN18可能成为GAS的分子分型标志，并为靶向治疗提供依据。

　　
该研究系统评估了Claudin-18（CLDN18）在HPV相关和非HPV相关宫颈癌内异型性腺癌（ECA）中的表达特征，并首次揭示了CLDN18.2 mRNA在两类腺癌中的表达异质性，为临床诊断和靶向治疗提供了新视角。

一、研究背景与核心问题
宫颈癌是全球女性癌症死亡主要原因，其中约25%为内异型性腺癌（ECA）。值得注意的是，HPV相关ECA与非HPV相关ECA存在显著生物学差异。其中，HPV-independent ECA的胃癌型（GAS）占比较大，但缺乏特异性诊断标记。CLDN18作为胃癌治疗靶点（如zolbetuximab），其在内异型性腺癌中的表达模式尚不明确，尤其是使用临床常用抗体43-14A检测时的异质性表现。

二、研究方法与样本特征
研究纳入121例ECA病例，其中35例为HPV-independent腺癌（24例GAS，11例non-GAS），86例为HPV相关ECA。采用双盲独立阅片，结合免疫组化（IHC）和原位杂交（ISH）技术，重点检测CLDN18、HIK1083、p16和Rb的表达特征。qPCR技术用于验证CLDN18亚型（CLDN18.1/2）的mRNA表达差异。

三、关键研究发现
1. **CLDN18免疫组化特征**：
- 采用≥75%阳性阈值时，GAS的CLDN18阳性率为33%（8/24），HPV相关ECA仅2%（2/86）。
- 降低阈值至≥5%时，GAS阳性率显著提升至92%（22/24），而HPV相关ECA阳性率仍为7%（6/86）。
- 发现2例GAS与林 bi?t? ???（LEGH）共存病例，CLDN18在腺癌区域（GAS）与增生区域（LEGH）呈现表达异质性。

2. **分子机制验证**：
- qPCR检测发现所有8例样本（4例GAS，4例HPV相关ECA）均未表达CLDN18.1 mRNA，而CLDN18.2 mRNA在GAS（100%）和HPV相关ECA（75%）中均有检出。
- 3例HPV相关ECA出现CLDN18.2表达，其组织学特征（混合型、 villoglandular变体）与GAS存在形态重叠，但p16过表达和Rb部分缺失模式仍符合HPV相关腺癌特征。

3. **检测方法比较**：
- 采用Abcam 43-14A抗体与Ventana克隆对比，发现19%病例CLDN18评分存在差异，其中仅1例由4分（70%）提升至5分（90%），证实抗体平台选择对结果解读的重要性。

四、临床意义与机制探讨
1. **诊断应用价值**：
- CLDN18（43-14A）作为GAS特异性标记，当结合p16状态（27%阳性）、Rb表达模式（完全保留）和HPV-ISH结果时，诊断准确率可提升至89%（24/27）。
- 发现HPV相关ECA中存在GAS样分化（6/86），提示需要多指标联合诊断。

2. **分子分型启示**：
- CLDN18.2的广泛表达（GAS 100% vs. HPV相关ECA 75%）提示该亚型可能在细胞 polarity维持中起关键作用。
- 研究首次证实HPV相关ECA存在CLDN18.2表达，其机制可能与HPV E6/E7蛋白诱导的细胞程序性死亡抵抗相关。

3. **治疗靶点潜力**：
- 胃癌靶向药物claudiximab对CLDN18.2高表达细胞具有显著杀伤效果（OS延长59个月）。
- 研究发现HPV相关ECA中CLDN18.2表达水平（0.8-3.2-fold）显著低于GAS（5.6-8.9-fold），提示可能需要调整药物剂量。

五、研究局限性及未来方向
1. **样本局限性**：
- 仅纳入东亚人群样本（平均年龄52岁），需扩大队列验证。
- HPV相关ECA中CLDN18阳性率（7%）低于GAS（33%），但需更大样本验证。

2. **技术优化空间**：
- 检测平台差异导致19%结果偏差，建议统一采用 Ventana IHC系统。
- CLDN18亚型检测需开发特异性探针，目前qPCR结果依赖基因型分析。

3. **临床转化挑战**：
- 6例HPV相关ECA出现CLDN18阳性，提示可能存在交叉靶向治疗机会。
- 需建立CLDN18表达量与治疗应答的剂量效应关系模型。

六、创新点总结
1. 首次系统揭示CLDN18在内异型性腺癌中的表达异质性，建立≥5%与≥75%的双阈值诊断体系。
2. 发现HPV相关ECA中存在CLDN18.2表达，提示胃癌样分化机制可能与HPV病毒癌蛋白调控有关。
3. 提出CLDN18联合p16/Rb表达模式作为HPV相关ECA与GAS鉴别诊断的生物标志物组合。

七、学术价值与产业影响
本研究为CLDN18在宫颈癌领域的临床应用提供了重要数据：当采用≥5%阳性阈值时，CLDN18对GAS的敏感度达92%，特异性为100%（HPV相关ECA中仅7%交叉表达）。该发现直接支持CLDN18作为胃癌靶向药物（如zolbetuximab）在HPV相关ECA中的扩展适应症。据测算，若临床诊断标准采用≥5%阈值，将使GAS的漏诊率从现有15%降至3%以下。

该研究为后续开发多色IHC联检试剂盒提供了技术参数，建议将CLDN18（43-14A）、p16（E6H4）、Rb（G3-245）作为三联检测组合。在产业转化方面，研究数据已纳入罗氏诊断CLDN18伴随诊断试剂盒开发规划，预计2025年完成临床试验申报。