利用辣木(Moringa)合成的绿色银纳米颗粒:在预防SARS-CoV-2污染水源方面具有潜在应用价值
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时间:2025年12月23日
来源:PLOS One 2.6
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生物合成银纳米颗粒(AgNPmo)通过 aqueous Moringa oleifera 叶提取物与硝酸银反应制备,并证实其具有显著的抗菌(抑制 Pseudomonas aeruginosa 和 Staphylococcus aureus)和抗 SARS-CoV-2 病毒活性。抗病毒实验显示 AgNPmo 剂量和时间依赖性增加病毒检测的 Ct 值,48 小时达到最佳抑制效果。毒性测试表明其 IC50 为 38 μg/mL,低浓度下对 Vero 细胞毒性可忽略。纳米颗粒的稳定性(UV-Vis、XRD 分析)和生物相容性(FTIR、SEM 表征)得到验证,证实其环保合成(成本约 £8/g)和应用于水处理的潜力。研究局限包括未测试实际环境效果及分子机制。
该研究以天然植物材料为原料,探索了合成银纳米颗粒(AgNPs)的抗菌和抗病毒潜力。研究选取非洲民间常用药材“莫洛哥种子树”(学名:*Moringa oleifera*)的叶片为原料,通过水相合成法成功制备了AgNPs,并系统评估了其理化性质、抗菌活性及对新冠病毒(SARS-CoV-2)的抑制效果。以下为关键内容解读:
### 一、研究背景与意义
新冠疫情全球大流行后,病毒通过污水系统传播的风险受到广泛关注。研究表明,SARS-CoV-2病毒可在水体中存活长达一周,且通过医疗废水、船舶和航空废水等途径进入环境,存在潜在传播风险。传统消毒方法存在成本高、化学残留等问题,而生物合成银纳米颗粒(AgNPs)因其安全性和环境友好性成为研究热点。
### 二、AgNPmo的合成与表征
1. **合成方法**:
使用微波辅助加热技术,将莫洛哥种子树叶提取物与硝酸银溶液按9:1比例混合,经30秒微波辐照后静置5分钟,溶液由黄色变为棕红色,表明AgNPs成功合成。该方法的优势在于快速(1分钟完成合成)、成本低(原料易获取),且无需高温高压设备。
2. **理化性质验证**:
- **紫外-可见光谱(UV-Vis)**:合成后立即检测显示特征吸收峰(420 nm),12个月后重复实验峰位稳定(410 nm),表明颗粒长期稳定性和良好的分散性。
- **红外光谱(FTIR)**:检测到植物叶提取物中的酚类和黄酮类化合物特征吸收峰(如1600 cm?1、3000-3300 cm?1),证实这些天然成分作为还原剂和稳定剂参与AgNPs的成核与包覆过程。
- **X射线衍射(XRD)**:衍射图谱显示典型的Ag晶面(如111、200晶面),证实颗粒为单质银结构,且结晶度高,增强其生物活性。
- **扫描电镜(SEM)**:观察到颗粒呈不规则多面体,部分聚集现象与绿色合成中常见的表面吸附杂质有关,但高分辨率图像显示粒径集中在200-500 nm范围内。
### 三、抗菌活性评估
1. **实验对象**:
选取临床分离的两种常见致病菌——铜绿假单胞菌(*Pseudomonas aeruginosa*)和金黄色葡萄球菌(*Staphylococcus aureus*)。
2. **抑制效果**:
- **剂量依赖性**:AgNPmo对铜绿假单胞菌的抑菌圈随浓度增加显著扩大(12.5%-100%浓度下抑菌圈分别为6.5-15.5 mm),但对金黄色葡萄球菌的抑制效果较弱(0-7 mm)。
- **作用机制**:纳米颗粒通过破坏细菌细胞膜完整性(如改变细胞壁通透性)及干扰细胞代谢(如产生活性氧自由基)实现杀菌,与文献报道的AgNPs作用机制一致。
### 四、抗病毒活性及安全性分析
1. **抗病毒实验设计**:
采用定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测病毒基因(ORF1ab和N基因)的Ct值变化。实验模拟病毒在水环境中的存活状态,使用病毒运输介质(VTM)保存的COVID-19阳性样本进行测试。
2. **关键发现**:
- **时间依赖性**:48小时后,病毒基因Ct值显著升高(表明病毒复制被抑制),且抑制效果随作用时间延长而增强。
- **浓度效应**:在低毒剂量(38 μg/mL IC50)下即表现出显著抗病毒活性,而高浓度(>312.5 μg/mL)虽能快速灭活病毒,但对宿主细胞(Vero细胞)产生毒性。
- **作用机制推测**:AgNPs可能通过以下途径抑制病毒:
- 破坏病毒包膜脂质双层结构;
- 干扰病毒与宿主细胞受体的结合;
- 抑制病毒RNA聚合酶活性或遗传物质复制。
### 五、创新性与应用潜力
1. **绿色合成优势**:
利用植物天然成分(酚类、黄酮类)作为还原剂和包覆剂,避免了化学合成中硝酸银过量残留的问题。实验显示,合成过程仅需1分钟微波处理,成本低廉(约8英镑/克,低于市售AgNPs的18-28英镑/克)。
2. **环境应用前景**:
研究表明,AgNPmo在低浓度下即可有效灭活病毒,且对哺乳动物细胞毒性较低(IC50达38 μg/mL),适合用于点对点饮用水处理系统。此外,其长期稳定性(12个月)和生物相容性(通过细胞毒性测试)为规模化应用提供了基础。
### 六、研究局限性
1. **体外实验限制**:
所有毒性测试和病毒灭活实验均在人工培养基(如细胞培养基、VTM)中进行,未验证实际水体环境中的效果。需进一步开展环境模拟实验(如pH波动、有机物共存条件)。
2. **机制研究不足**:
现有数据无法明确AgNPmo与病毒结合的具体靶点,尤其是对病毒复制关键酶(如RNA聚合酶)的影响机制需通过分子生物学手段深入探究。
3. **广谱性待验证**:
实验仅针对SARS-CoV-2的原始毒株,未测试奥密克戎等变异株,且未评估对其他 enveloped病毒(如流感病毒、HIV)的活性。
### 七、结论与建议
该研究首次系统验证了莫洛哥种子树叶提取物合成的AgNPs在抗病毒领域的潜力。其低毒性、高稳定性及低成本特性使其成为水处理领域的优选材料。建议后续研究方向包括:
- 开发多阶段灭活工艺,提升复杂水体中的病毒清除效率;
- 探索纳米颗粒与植物活性成分的协同作用机制;
- 进行实地环境(如河流、湖泊)的毒理学评估,确保生态安全性。
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