建立并应用多重交叉位移扩增结合侧向流动生物传感器（MCDA-LFB）技术，用于快速可视化检测光滑念珠菌（Candida glabrata）

《European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases》：Establishment and application of multiple cross displacement amplification coupled with lateral flow biosensor (MCDA-LFB) for visual and rapid detection of Candida glabrata

白念珠菌（Candida glabrata）作为WHO高优先级病原体，传统培养诊断耗时长。本研究开发MCDA-LFB检测系统，通过10对ITS2基因引物设计及纳米颗粒 lateral flow biosensor 结合，优化后（63℃，40min）检测限达10fg/μL，成功识别240例临床标本中的57例阳性样本，全程仅需62分钟，兼具快速、灵敏、特异性高及操作简便特点，适用于资源有限地区。

　　

摘要

背景

（光滑念珠菌 Candida glabrata）被世界卫生组织（WHO）列为高优先级病原体。它会在免疫系统受损的人群中引发黏膜和深层感染，但目前其诊断仍依赖于耗时的培养过程。这凸显了开发快速、准确检测方法的迫切需求。

方法

设计了10个针对光滑念珠菌（C. glabrata）ITS2基因不同区域的引物，构建了一种多重交叉置换扩增（MCDA）检测方法，并将其与纳米粒子侧向流动生物传感器（LFB）结合使用。在优化了温度和时间参数后，该检测系统被用于临床样本中C. glabrata DNA的检测。

结果

在最佳条件下（63°C，40分钟），C. glabrata-MCDA-LFB检测方法的检测限（LoD）达到10 fg/μL。该检测方法成功识别了所有测试的C. glabrata菌株，并且未与非C. glabrata分离株发生交叉反应。结果显示，在通过传统培养方法鉴定的240份临床样本中，C. glabrata-MCDA-LFB检测方法迅速且准确地检测出了所有57份C. glabrata阳性样本。整个过程（包括样本处理20分钟、MCDA反应40分钟以及结果记录2分钟）在62分钟内完成。

结论

本研究开发的C. glabrata-MCDA-LFB检测方法是一种快速、简单、灵敏且特异的技术，易于操作。它可用于临床环境中C. glabrata感染的筛查和诊断，尤其是在资源有限的地区。