《MEDIATORS OF INFLAMMATION》：Single-Cell Transcriptomic Analysis Reveals an Inflammatory Antigen-Presenting Macrophages Subtype Drive Vitiligo Pathogenesis Through STAT1-Mediated Dual Mechanisms
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本研究通过单细胞转录组分析发现白癜风皮肤中富集一种炎症性抗原呈递巨噬细胞亚型（Mac-InflamAP），该亚型通过STAT1介导的双重机制驱动疾病进程：一方面通过TNF信号直接抑制黑素细胞（MELs），另一方面通过增强抗原呈递（MHC-I/II）激活T细胞。体内外实验证实STAT1抑制剂氟达拉滨可抑制巨噬细胞M1极化及炎症表型，为白癜风治疗提供新靶点。
单细胞转录组分析揭示白癜风皮肤细胞景观改变
通过分析健康对照和白癜风患者皮肤单细胞RNA测序数据，研究获得48,506个高质量细胞转录组。UMAP降维分析显示9种主要细胞类型：黑素细胞、角质形成细胞、CD8+T细胞、巨噬细胞/树突状细胞、CD4+T细胞、朗格汉斯细胞、成纤维细胞、内皮细胞和平滑肌细胞。白癜风皮肤显示黑素细胞显著缺失，巨噬细胞和T细胞亚群明显富集，表明炎症微环境形成。
巨噬细胞异质性分析揭示白癜风特异性炎症亚群
对巨噬细胞群体进行亚群分析，鉴定出5个转录 distinct的巨噬细胞亚群：免疫调节巨噬细胞、核糖体富集巨噬细胞、组织重塑巨噬细胞、氧化磷酸化激活巨噬细胞和炎症性抗原呈递巨噬细胞。其中Mac-InflamAP亚群在白癜风皮损中特异性富集，呈现典型的M1极化特征，表达高水平炎症因子和抗原呈递相关基因。
伪时间轨迹分析显示Mac-InflamAP为终末分化状态
细胞分化潜能分析表明Mac-InflamAP具有最低的分化潜能评分。轨迹推断显示该亚群位于分化路径的末端，提示其可能由其他巨噬细胞亚群在炎症刺激下分化而来。沿轨迹动态表达的基因主要富集在抗原处理呈递、吞噬作用、肿瘤坏死因子产生等通路，凸显其炎症和免疫激活特性。
细胞间通讯分析揭示Mac-InflamAP介导的病理信号网络
白癜风皮肤中细胞间相互作用数量和强度显著增加。Mac-InflamAP作为信号枢纽，通过MHC-I/II途径增强与CD4+/CD8+T细胞的通讯，同时通过TNF信号通路直接作用于黑素细胞。这种双向相互作用构成促进黑素细胞破坏和T细胞激活的正反馈循环。
hdWGCNA识别巨噬细胞关键调控模块和治疗靶点
高维加权基因共表达网络分析构建15个共表达模块，其中Mac-M3模块在白癜风巨噬细胞中特异性上调。蛋白互作网络识别STAT1、VAMP5、LAP3和TYMP为核心枢纽基因，这些基因在Mac-InflamAP中高表达，且与模块成员性和差异表达显著相关。
STAT1抑制在体内改善白癜风病理进程
在单苯醚诱导的白癜风小鼠模型中，STAT1抑制剂氟达拉滨治疗显著减轻皮肤脱色程度。组织学分析显示治疗组表皮厚度恢复正常，免疫细胞浸润减少。免疫组化证实氟达拉滨降低CD4+/CD8+T细胞和F4/80+巨噬细胞浸润，抑制M1标志物CD86表达。Western blot显示氟达拉滨抑制STAT1磷酸化，调节凋亡相关蛋白表达。
STAT1抑制在体外降低巨噬细胞抗原呈递和炎症表型
LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞中，氟达拉滨处理显著抑制STAT1磷酸化。流式细胞术显示CD86+细胞比例降低，ELISA和qRT-PCR证实TNF-α、IL-6、IL-1β等炎症因子表达下降。抗原呈递相关基因表达受抑制，表明STAT1在调控巨噬细胞炎症活性和抗原呈递功能中的核心作用。
讨论与结论
本研究首次系统表征白癜风中巨噬细胞的异质性，发现Mac-InflamAP亚群通过STAT1介导的双重机制参与发病：直接细胞毒作用和间接免疫激活。STAT1作为关键调控因子，其抑制剂氟达拉滨在临床前研究中显示治疗潜力，为开发靶向巨噬细胞的治疗策略提供理论依据。
