《World Journal of Pediatrics》：Expert consensus on the combined screening of genes and biomarkers for neonatal diseases
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本综述由多学科专家团队制定，系统阐述了新生儿疾病基因与生物标志物联合筛查的标准化框架。共识明确了疾病/基因选择原则（涵盖67种遗传代谢病相关的154个基因）、技术路径（干血斑生物标志物分析联合靶向捕获二代测序，覆盖深度>300×）及标准化操作流程，旨在通过整合现有新生儿筛查（NBS）体系，提升遗传代谢病（IMDs）的早期诊断准确性，实现快速有效干预，降低严重并发症发生风险。
引言
新生儿筛查（NBS）通过生物标志物检测实现了先天性疾病的早期诊断与治疗，显著改善了患儿预后。随着基因组学技术的发展，新生儿遗传筛查项目日益增多。本专家共识由多学科团队制定，旨在规范中国新生儿疾病基因与生物标志物联合筛查的应用，平衡伦理、技术与临床考量，为这一创新筛查模式的标准化实施提供行动指南。
疾病生物标志物新生儿筛查的优势与挑战
传统NBS依托酶联免疫吸附测定、时间分辨荧光分析及串联质谱（MS/MS）等技术，具有成本效益高、检测速度快、通量大的突出优势。然而，其准确性易受干血斑（DBS）样本质量（如血斑大小、污染、血细胞比容）、新生儿临床状况（早产、感染、营养支持等）、母体因素及检测方法局限性等多种因素干扰，导致假阳性/假阴性结果频发，且阳性病例的确诊过程漫长，可能延误最佳干预时机。
新生儿遗传筛查的优势与挑战
当前新生儿遗传筛查主要呈现三种模式：双层筛查（初筛阳性者进行遗传验证）、疾病特异性筛查（如听力障碍、脊髓性肌萎缩症）及基于下一代测序（NGS）的筛查（如全外显子组测序WES、全基因组测序WGS）。NGS技术对危重新生儿诊断率较高（30%–57%），但存在技术局限（如结构变异检测、假基因干扰）和变异解读挑战（如意义不明确变异VUS），且无法完全替代传统NBS，应作为补充手段。目前全球范围内尚未建立统一的遗传筛查标准体系。
联合筛查的协同价值
基因与生物标志物联合筛查可相互验证：生物标志物结果为遗传发现提供佐证，简化报告解读；遗传数据则有助于降低NBS假阳性/假阴性率，实现疾病快速分型。二者结合可加速精准诊断，尤其对新生儿期急性起病的遗传代谢病（IMDs），能实现靶向、快速干预，挽救生命并减少神经系统损伤等严重并发症。联合筛查必须依托现有成熟的NBS体系，方能实现大规模人群应用。
联合筛查的实施方法
疾病与基因选择原则
疾病入选需满足：存在可筛查生物标志物、基因-生物标志物-疾病关联明确、致病变异可被可靠检测、发病年龄<5岁、具备有效治疗手段、成本效益比优良。基因选择侧重：与常规NBS疾病相关（如G6PD、PAH）、在中国人群中有常见致病变异（如MMACHC、SLC25A13）、基因-疾病关系明确（依据ClinGen标准）、遗传模式清晰。经专家共识推荐，联合筛查目标疾病涵盖67种IMDs对应的154个基因，涉及有机酸代谢病、氨基酸代谢病、尿素循环障碍、脂肪酸β-氧化障碍等多个类别。
标准化操作流程
知情同意与样本采集
护理人员需向新生儿监护人全面告知筛查目标疾病、技术局限性、流程及风险，签署书面知情同意书。采血时间为生后2–7天，早产/低出生体重儿需在生后15天和30天复采。除常规筛查血斑外，需额外采集两个8毫米血斑用于联合检测。血斑自然晾干后密封冷藏（2–8°C），并于25°C以下环境及时送检。
检测与报告
检测实验室需配备MS/MS、NGS等先进平台。生物标志物与基因检测报告应在采样后15个工作日内同步出具，附结果解读与方法学局限性说明。对生物标志物显著异常且早期发病的IMDs，应立即启动治疗，待遗传结果回报后调整方案。
遗传检测技术方案
建议采用NGS靶向捕获技术（液相杂交或多重PCR富集），覆盖目标基因外显子/内含子区域及已知致病非编码变异。测序数据质量要求：目标区域平均覆盖深度>300×，>99.5%区域≥20×，>99%区域≥100×。二级分析推荐GATK工具，三级分析需依据ClinVar等数据库注释变异，并按ACMG/ClinGen指南进行致病性分类。对CYP21A2、SLC25A13等复杂变异基因，需结合长读长测序、MLPA或Sanger测序验证。
联合筛查结果的判定与处理
阳性结果判定
阳性指发现与临床表现及生物标志物高度匹配的致病/可能致病（P/LP）变异，且符合遗传模式：常染色体显性为杂合P/LP变异；隐性为双等位基因P/LP变异；X连锁遗传中，显性模式女性杂合或男性半合子受累，隐性模式女性纯合或男性半合子受累，不完全显性（如Fabry病、OTC缺乏症）则受X染色体失活（XCI）程度影响。
需进一步验证的情况
包括：生物标志物正常但遗传检测发现符合遗传模式的P/LP变异；生物标志物显著异常但未发现匹配变异；变异中含VUS。此类病例需进行家系验证及其他检测技术（如酶活性、尿液有机酸分析等），结合临床综合诊断。已出现症状者需住院治疗，无症状者门诊随访。
阴性结果处理
新生儿期无症状、生物标志物正常且未发现P/LP变异者无需随访。
常染色体隐性遗传代谢病杂合变异的特殊情形
部分ARIMDs中，单个位点致病变异可能通过显性负效应影响多聚体蛋白功能，导致生物标志物轻度异常（如ASS1基因p.R363W变异致瓜氨酸升高，MCCC1/MCCC2变异影响酶活性）。MATIA基因R264H突变呈显性遗传，可致高甲硫氨酸血症，但通常血甲硫氨酸水平轻度升高，需定期监测。杂合变异者一般无临床症状，是否需长期管理待进一步研究。
联合筛查体系的建立
省级/市级NBS中心应建设生物标志物与基因检测一体化平台，在生后48小时内完成知情同意、采样、送检、诊断、治疗及随访管理。团队需涵盖实验室、分子遗传学、生物信息学及临床医学等多背景人员，严格遵循质控流程。建立数据管理与信息共享系统，组建由检测人员、遗传咨询师及临床医师构成的联合筛查团队，制定诊疗方案。
结论
本共识为新生儿基因与生物标志物联合筛查提供了系统化实践框架，通过明确技术路径、标准化流程及特殊情形处理策略，推动筛查精准化与规范化。未来需优化成本效益、完善数据解读，建立国家标准化体系，最终降低可治遗传病负担，促进健康公平。
