《Journal of Molecular Medicine》：TIM3-mediated differentiation of IL-10-producing CD25+?B cells by expanded regulatory T cells
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本刊推荐：为阐明Tregs（调节性T细胞）调控B细胞的分子机制，研究团队通过体外共培养系统发现，扩增型Tregs（Exp-Tregs）通过TIM3依赖的细胞接触方式，诱导记忆性B细胞分化为IL-10+CD25+调节性B细胞（Bregs），该过程可抑制促炎因子（IFN-γ/TNF-α/IL-17）并促进免疫耐受，为Treg疗法在移植排斥和自身免疫病中的应用提供新靶点。
在免疫系统的精密调控网络中，调节性T细胞（Tregs）一直被视为维持自身耐受和防止过度免疫反应的“刹车器”。近年来，基于Tregs的细胞疗法已进入临床试验阶段，在器官移植排斥和自身免疫性疾病治疗中展现出潜力。然而，当科学家们尝试将实验室成果转化为临床实践时，一个关键问题浮出水面：Tregs如何精确调控其他免疫细胞，特别是B细胞的功能？尽管临床观察发现接受Treg输注的肾移植患者体内具有调节表型的B细胞会增加，但这一现象背后的分子机制却始终笼罩在迷雾中。
这项发表于《Journal of Molecular Medicine》的研究由Rowa Y. Alhabbab团队完成，他们建立了一套精巧的体外共培养系统，揭示了Tregs与B细胞对话的关键分子密码。研究人员发现，与传统认知不同，扩增后的Tregs（Exp-Tregs）展现出了比新鲜分离Tregs（F-Tregs）更强大的免疫调节能力，而这种能力的核心在于一个名为TIM3的免疫检查点分子。
为解开这一谜题，研究团队运用了多项关键技术：从健康捐赠者外周血分离免疫细胞；通过磁珠分选和流式细胞术（FACS）获得高纯度Tregs和B细胞；建立体外共培养系统模拟细胞间相互作用；利用Trans-well实验区分细胞接触与因子介导的效应；采用抗体阻断技术验证特定分子功能；通过多色流式细胞术进行细胞表型分析和细胞内因子检测；运用t-SNE算法进行高维数据可视化分析。
Exp-Tregs诱导IL-10表达B细胞
研究人员首先对比了Exp-Tregs与F-Tregs的功能差异。经过体外扩增的Exp-Tregs不仅纯度更高，还表现出更强的抑制常规T细胞增殖的能力。当将这些Tregs与经照射的常规CD4+T细胞（iTcells）激活的B细胞共培养时，发现Exp-Tregs能更有效地诱导B细胞产生抗炎因子IL-10，同时显著降低促炎因子IFN-γ、TNF-α和IL-17的表达。这一现象提示Exp-Tregs具备独特的能力来重塑B细胞的免疫功能。
Exp-Tregs诱导记忆B细胞亚群获得调节表型
通过精细的B细胞亚群分析，研究团队发现Exp-Tregs主要影响CD24+CD38-记忆B细胞。t-SNE分析显示，IL-10+B细胞集中分布於记忆B细胞区域，且这群细胞同时高表达CD25——一个与调节性B细胞（Bregs）表型密切相关的分子。这表明Exp-Tregs特异性地引导记忆B细胞向具有免疫抑制功能的调节性B细胞方向分化。
TIM3在Exp-Tregs上的表达介导耐受性B细胞的诱导
机制探索阶段，Trans-well实验证实Exp-Tregs对B细胞的调节作用严格依赖於细胞间直接接触。通过系统筛查Tregs表面多种免疫调节分子，研究人员发现TIM3在Exp-Tregs上的表达尤为突出，特别是在与B细胞共培养后，TIM3表达进一步上调。当使用特异性抗体阻断TIM3后，Exp-Tregs诱导IL-10+B细胞的能力显著受损，但对促炎细胞因子的抑制影响较小。有趣的是，TIM3阻断反而增加了Exp-Tregs自身产生IFN-γ、TNF-α和IL-17的能力，提示TIM3在维持Tregs稳定性中也发挥重要作用。
研究结论强调，TIM3+Exp-Tregs通过细胞接触依赖的方式，特异性地诱导记忆B细胞分化为IL-10+CD25+调节性B细胞，这一过程不依赖於IL-10。TIM3作为这一对话过程的核心分子，不仅调节B细胞功能，也维持着Tregs自身的稳定性。该发现为理解Tregs在移植耐受和自身免疫疾病中的治疗机制提供了新视角，提示TIM3表达水平可能成为评估Treg疗法效果的重要生物标志物，也为开发针对B细胞相关免疫疾病的创新疗法提供了潜在靶点。
在免疫治疗飞速发展的今天，这项研究犹如一把钥匙，打开了理解Tregs与B细胞相互作用机制的新大门。它不仅解释了临床观察到的现象，更指引着未来细胞治疗产品的优化方向——通过增强Tregs的TIM3表达，或许能够提升其治疗效能，特别是在那些B细胞扮演关键致病角色的疾病中，为无数等待更有效治疗方法的患者带来新的希望。
