《Phytomedicine》：Bruceantin inhibits the c-Myc/RL27A axis to suppress tumor progression in hepatocellular carcinoma
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针对肝细胞癌（HCC）治疗选择有限且预后差的临床困境，本研究聚焦天然化合物Bruceantin（BCT）的抗癌潜力。研究发现，BCT通过直接靶向c-Myc，抑制其转录活性，从而下调下游关键效应分子RPL27A的表达，最终诱导HCC细胞凋亡并抑制肿瘤生长。该研究不仅揭示了BCT在HCC中的新作用机制，也为开发靶向c-Myc/RPL27A轴的新型HCC治疗策略提供了实验依据。
肝细胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）是全球范围内最常见的原发性肝癌类型，其发病率和死亡率居高不下，严重威胁人类健康。尽管近年来靶向治疗和免疫治疗取得了一定进展，但晚期HCC患者的治疗选择仍然有限，且普遍面临耐药性和毒副作用的挑战。因此，寻找和开发新型、高效且安全的抗HCC药物，尤其是从天然产物中挖掘先导化合物，成为当前研究的热点。
在此背景下，研究人员将目光投向了Bruceantin（BCT），一种从埃塞俄比亚传统药用植物中提取的苦木素类化合物。BCT在白血病、乳腺癌和前列腺癌等多种肿瘤模型中已显示出显著的抗肿瘤活性，但其在HCC中的具体作用及分子机制尚不明确。为了填补这一空白，中南大学基础医学院的研究团队在《Phytomedicine》杂志上发表了一项研究，系统性地揭示了BCT通过靶向c-Myc/RPL27A轴抑制HCC进展的新机制。
关键技术方法
本研究综合运用了多种体外和体内实验技术。在体外，研究人员利用HepG2.2.15和Hep3B两种HCC细胞系，通过CCK-8、集落形成、划痕愈合和流式细胞术等实验评估了BCT对细胞增殖、迁移和凋亡的影响。在体内，通过构建HCC异种移植小鼠模型，验证了BCT的抑瘤活性和安全性。在机制探索层面，研究团队采用了转录组测序（RNA-seq）筛选差异表达基因，并通过生物信息学分析、分子对接、细胞热转移分析（CETSA）和双荧光素酶报告基因实验，揭示了BCT与c-Myc的直接相互作用及其对RPL27A转录的调控作用。此外，通过基因敲低和过表达等分子生物学手段，进一步验证了c-Myc/RPL27A轴在BCT抗HCC效应中的核心地位。
研究结果
BCT抑制HCC细胞的生长、增殖和迁移
研究人员首先通过体外实验证实，BCT能够以剂量依赖的方式显著抑制HepG2.2.15和Hep3B细胞的活力，并有效抑制其集落形成能力。划痕愈合实验表明，BCT处理显著降低了HCC细胞的迁移能力。流式细胞术和蛋白质印迹（Western Blot, WB）分析进一步揭示，BCT通过上调促凋亡蛋白Bax和c-Caspase-3的表达，同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，从而诱导HCC细胞发生线粒体途径的凋亡。
BCT在体内抑制HCC肿瘤生长
在HCC异种移植小鼠模型中，腹腔注射BCT（3 mg/kg，隔日一次）显著抑制了肿瘤的生长，且未引起小鼠体重下降或主要器官的病理学改变，表明BCT在体内具有良好的抗肿瘤活性和安全性。
BCT通过下调核糖体蛋白（RPs）发挥抗肿瘤作用
为了阐明BCT的作用机制，研究人员进行了转录组测序分析。结果显示，BCT处理显著下调了多个核糖体蛋白基因的表达，其中RPL27A的下调最为显著。随后的qPCR和WB实验在体外细胞和体内肿瘤组织中均验证了BCT对RPL27A表达的抑制作用。
RPL27A是HCC的促癌因子
临床数据分析显示，RPL27A在HCC组织中的表达显著高于癌旁正常组织，且其高表达与患者的不良预后密切相关。功能实验表明，敲低RPL27A能够抑制HCC细胞的增殖、集落形成，并诱导细胞凋亡；反之，过表达RPL27A则表现出促癌效应。更重要的是，过表达RPL27A能够逆转BCT诱导的细胞凋亡和生长抑制，证明RPL27A是BCT发挥抗HCC作用的关键下游效应分子。
BCT通过靶向c-Myc抑制RPL27A的转录
机制探索发现，BCT并不直接与RPL27A结合，而是通过调控其上游转录因子发挥作用。生物信息学分析、分子对接和CETSA实验证实，BCT能够直接与c-Myc蛋白结合。双荧光素酶报告基因实验表明，c-Myc能够直接结合RPL27A的启动子区域并激活其转录，而BCT处理则能抑制这一转录激活过程。功能实验进一步证实，敲低c-Myc能够下调RPL27A的表达，而过表达c-Myc则能上调RPL27A的表达，从而验证了c-Myc对RPL27A的转录调控作用。
研究结论与讨论
本研究系统性地揭示了天然化合物Bruceantin（BCT）在肝细胞癌（HCC）中的抗肿瘤作用及其分子机制。研究证实，BCT通过直接靶向并抑制c-Myc的转录活性，进而下调其下游靶基因RPL27A的表达，最终诱导HCC细胞凋亡并抑制肿瘤生长。该研究不仅首次阐明了BCT在HCC中的新作用机制，还确立了c-Myc/RPL27A轴在HCC发生发展中的关键作用。
该研究的发现具有重要的科学意义和潜在的临床转化价值。首先，BCT作为一种天然产物，在体内外实验中均表现出良好的抗肿瘤活性和安全性，为其作为HCC治疗候选药物提供了有力的实验依据。其次，c-Myc作为一个公认的“不可成药”靶点，一直是药物研发的难点。本研究揭示了BCT能够直接靶向c-Myc并抑制其功能，为开发靶向c-Myc的小分子抑制剂提供了新的思路和先导化合物。最后，RPL27A被证实是HCC中一个重要的促癌因子和预后标志物，这为HCC的分子分型和精准治疗提供了新的潜在靶点。
综上所述，本研究不仅为Bruceantin的抗HCC活性提供了坚实的科学证据，也揭示了c-Myc/RPL27A轴在HCC中的关键调控作用，为开发新型HCC治疗策略奠定了重要的理论基础。
