“小青龙汤”通过抑制M1型巨噬细胞的极化作用并调节TRPV1离子通道，从而缓解过敏性鼻炎的症状

《Phytomedicine》：Xiao-Qing-Long-Tang alleviates allergic rhinitis by inhibiting M1 macrophage polarization and modulating the TRPV1 channel

过敏性鼻炎XQLT治疗机制研究显示其通过抑制巨噬细胞炎症因子释放及TRPV1通道活性改善症状，转录组学揭示调控免疫应答与痛觉信号通路。

　　

周雷|黄乐媛|何冠峰|李海欣|刘满春|徐静文

广东药科大学药学院，广州，510006，中国

摘要

背景

过敏性鼻炎（AR）是一种常见的IgE介导的鼻黏膜炎症性疾病，涉及免疫-神经相互作用，如肥大细胞活化、细胞因子释放以及瞬时受体电位香草酸1（TRPV1）介导的神经元敏化。小青龙汤（XQLT）是一种用于治疗AR的经典中药。然而，其作用机制，尤其是在巨噬细胞调节和TRPV1活性方面的机制，尚未完全明了。

目的

本研究旨在评估XQLT在卵清蛋白（OVA）诱导的AR小鼠模型中的治疗效果，并探讨其分子机制，重点关注免疫调节、巨噬细胞介导的炎症和TRPV1通道活性。

方法

使用UPLC-Q Exactive Orbitrap-HRMS系统分析了XQLT的化学成分。在OVA诱导的AR小鼠模型中评估了XQLT的治疗效果。同时检测了临床症状、血清生物标志物（OVA-sIgE、白细胞介素-4（IL-4）和组胺）以及组织病理学变化。通过转录组分析探讨了鼻黏膜的分子通路。在LPS刺激的RAW264.7细胞和骨髓来源的巨噬细胞中，通过测量一氧化氮（NO）、细胞因子表达和NF-κB激活情况来评估XQLT的抗炎作用。在AR小鼠模型中通过免疫组化技术、过表达TRPV1的HEK293细胞中的钙成像以及分子对接实验研究了TRPV1的参与情况。

结果

XQLT治疗显著减少了AR小鼠的鼻擦揉和打喷嚏频率，降低了血清中的OVA-sIgE和IL-4水平，并改善了鼻部和肺部的组织病理学改变，且未观察到明显的毒性。转录组分析显示，XQLT调节了与免疫反应、炎症信号传导和疼痛感觉相关的基因表达变化。在巨噬细胞中，XQLT抑制了LPS诱导的一氧化氮产生，下调了IL-6、IL-1β、CCL2、iNOS和COX-2的表达，并抑制了NF-κB的核转位。重要的是，XQLT降低了AR鼻黏膜中的TRPV1表达，并抑制了HEK293过表达TRPV1细胞中的TRPV1介导的钙内流。分子对接分析证实姜根（Ganjiang）是XQLT中抑制TRPV1的关键成分。

结论

XQLT通过协调抑制巨噬细胞介导的炎症和TRPV1依赖的神经通路来缓解AR症状和组织重塑。这些发现为XQLT作为一种安全且有前景的多靶点治疗AR提供了新的机制见解。

引言

过敏性鼻炎（AR）是一种由免疫球蛋白E（IgE）对外源性过敏原的反应引起的炎症性疾病。作为一种常见的慢性疾病，它影响了全球大约10%到50%的人口（Hao等人，2025年）。AR患者常表现出鼻部瘙痒、阵发性反复打喷嚏、流鼻涕和鼻塞等症状（Bernstein等人，2024年）。AR可能引发的并发症包括哮喘、湿疹和慢性或复发性鼻窦炎。患者的生活质量受到严重影响，医疗成本也显著增加（Wise等人，2023年；Zhang等人，2021年）。该疾病在13-14岁的青少年中尤为普遍，对他们的学习能力有显著影响（Bousquet等人，2020年；Vieira等人，2022年）。

AR的发病机制涉及复杂的免疫学过程，包括IgE介导的肥大细胞活化、炎性细胞（如嗜酸性粒细胞）的募集以及促炎介质（如细胞因子、趋化因子和一氧化氮（NO）的释放（He等人，2025年；Zhang等人，2022年）。最近的研究表明，痛觉神经元和免疫细胞在AR中存在相互作用。鼻黏膜中的痛觉神经元主要来源于三叉神经的眼支和上颌支。多种痛觉刺激物，如机械损伤、化学刺激物、炎症介质和病原体，通过与鼻黏膜中的瞬时受体电位香草酸1（TRPV1）、瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）等受体的结合来激活这些神经元（Cong等人，2024年）。痛觉神经元分泌神经肽（如P物质和降钙素基因相关肽（CGRP），从而促进鼻腺分泌、血管扩张和免疫细胞活化。过敏原和神经肽都会诱导免疫细胞（如肥大细胞和嗜碱性粒细胞）释放炎症介质（如组胺和细胞因子）。这些介质反过来又增强了痛觉神经元的兴奋性，从而在免疫系统和神经系统之间建立了持续的正反馈循环（Voisin等人，2017年）。例如，一项早期临床研究表明，在AR患者中用高剂量辣椒素刺激鼻黏膜会导致鼻腺分泌增加和血浆渗漏（Sanico等人，1998年）。从另一个研究角度也证实了痛觉神经元在AR中的作用。研究发现，近年来极端温度的频繁出现与AR和过敏性哮喘的高发病率有关。这是因为极端温度不仅直接损害气道上皮屏障，引发炎症和过度反应，还影响体温调节系统，激活支气管肺迷走神经纤维，并增加TRPV1和TRPV4的表达。因此，针对TRPV1成为治疗AR的潜在策略。

目前用于治疗AR的药物包括第二代抗组胺药（如西替利嗪和氯雷他定）、鼻用皮质类固醇（如氟替卡松和曲安奈德）以及鼻用抗组胺药（如阿扎司汀），还有这些药物的固定剂量组合（Klimek等人，2024年）。这些一线治疗方法主要通过抑制促炎细胞因子和组胺的释放来缓解症状，并通过调节白三烯的释放来改善鼻塞和黏液分泌。然而，这些治疗方法在疗效和不良反应方面存在临床差异，包括嗜睡、口干、疲劳和头晕（Bousquet等人，2020年）。因此，迫切需要寻找更多多样化、有效和安全的治疗手段。

小青龙汤（XQLT）是一种记载在《伤寒论》中的经典方剂，由麻黄（Ephedrae Herba）、桂枝（Cinnamomi Ramulus）、白芍（Paeoniae Radix alba）、姜根（Zingiberis Rhizoma）、细辛（Asari Radix et Rhizoma）、甘草（Glycyrrhizae Radix et Rhizoma）、半夏（Pinellia Rhizoma）和五味子（Schisandrae Chinensis Fructus）组成（Chen等人，2009年）。它在中国、日本（称为Sho-seiryu-to）和韩国（称为So-Cheong-Ryong-Tang）等地广泛用于治疗AR、哮喘、支气管炎和普通感冒（Kim等人，2019年；Yamada和Nagai，1998年）。它是少数经过安慰剂对照试验验证并在临床上用于治疗AR的方剂之一（Yafune和Cyong，2001年）。此外，一项随机对照试验的荟萃分析也证明了该方剂在缓解AR患者症状方面的安全性和有效性（Yan等人，2022年）。现有研究表明，XQLT对CD4+T细胞具有调节作用，从而抑制炎症因子的释放并表现出抗过敏特性。最近的研究还发现，在OVA诱导的AR小鼠模型中，XQLT通过IL-33/ST2和JAK/STAT通路抑制ILC2s（Luo等人，2019年；Zhang等人，2023a）。目前，关于XQLT机制的大多数研究主要集中在T细胞免疫反应上。然而，它对巨噬细胞或TRPV1受体的具体作用机制仍需进一步研究。

本研究分析了XQLT的化学成分，并评估了其在缓解OVA诱导的AR小鼠模型中的症状和组织病理学改变方面的疗效。随后进行了转录组分析，以探讨XQLT治疗AR的潜在机制。此外，还使用LPS刺激的巨噬细胞研究了XQLT的抗炎机制。另外，建立了过表达TRPV1的HEK293细胞，以确定XQLT对TRPV1表达和功能的影响。

章节片段

XQLT的制备

麻黄（Ephedrae Herba）从Ze Qun Zhong Yao（中国广东）获得；桂枝（Cinnamomi Ramulus）、白芍（Paeoniae Radix alba）、姜根（Zingiberis Rhizoma）、细辛（Asari Radix et Rhizoma）、甘草（Glycyrrhizae Radix et Rhizoma）、半夏（Pinellia Rhizoma）和五味子（Schisandrae Chinensis Fructus）从Kangmei（中国广东）获得。上述所有成分均由周雷博士鉴定，相关凭证样本已存放在广东药科大学药学院。

XQLT的化学成分分析

使用UPLC-Q Exactive Orbitrap-HRMS系统分析了XQLT的化学成分。通过将MS1和MS2数据与自建数据库进行比较，鉴定出XQLT中的52种化合物。这些成分是XQLT中八种草药的主要成分。正离子模式和负离子模式下的总离子色谱图（TIC）如图1所示。XQLT中鉴定出的成分信息见表2。其中，三种生物碱主要来自麻黄，五种酚类化合物...

讨论

AR是一种由IgE介导的慢性鼻黏膜疾病，主要症状包括流鼻涕、鼻塞、鼻痒和打喷嚏。虽然不会致命，但AR严重影响了患者的生活质量。XQLT是一种用于治疗AR的传统方剂，在亚洲国家有广泛的临床应用。它能有效缓解AR症状，但其具体作用机制尚不清楚。

在本研究中，我们首先对其化学成分进行了分析...

结论

总之，XQLT有效缓解了AR小鼠的症状，减少了OVA诱导的鼻黏膜损伤，并改善了肺组织重塑。XQLT通过抑制NF-κB的表达和核转位，降低了M1巨噬细胞释放的炎症因子。此外，XQLT还降低了AR小鼠鼻黏膜中的TRPV1表达，抑制了TRPV1通道的活性。上述结果证实XQLT是治疗AR的潜在候选药物...

数据可用性

数据可应要求提供。

作者贡献声明

周雷：撰写——原始稿件、软件使用、方法学设计、资金获取、概念构思。黄乐媛：数据可视化、实验设计。何冠峰：数据可视化、实验设计。李海欣：数据可视化、实验设计。刘满春：实验设计。徐静文：撰写——审稿与编辑、监督、软件使用、方法学设计、资金获取、概念构思。

利益冲突声明

作者声明没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文的研究工作。

致谢

本研究得到了国家自然科学基金（编号82204968）的资助。