经典补体途径和/或凝集素补体途径的激活在慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病（CIDPN）的发病机制中的作用

《Journal of Neuroimmunology》：The activation of classical and/or lectin complement pathway for the pathogenesis of chronic inflammatory demyelinating polyradiculoneuropathy

本研究通过免疫组化检测C4d、C3c和C5b-9在CIDP患者及对照组周围神经标本中的沉积，并测定血清补体因子水平，发现所有CIDP患者均存在C4d沉积，与Hughes功能评分正相关，但未检测到C5b-9沉积，提示经典或凝集素途径在CIDP病理机制中起主要作用。

　　

村上圭修|辻本宏|中山良明|武内宏樹|山本健二|片山圭一|稲田雄介|稲葉雄貴|神林雅敏|岡信敏|井上紀光|宮本勝敏

日本和歌山医科大学神经内科

摘要

背景

慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经根神经病（CIDP）是一种异质性的免疫介导的神经病变。补体系统的激活已被认为与CIDP有关，但尚不清楚哪种补体途径的激活对CIDP的发病机制至关重要。因此，我们分别检测了CIDP患者组织和血清中几种活化补体因子的沉积和生成情况。

方法

我们使用CIDP患者和对照组的腓肠神经标本，通过免疫组化方法对C4d、C3c和C5b-9进行了染色。评估了补体因子沉积的密度和荧光强度。同时测量了CIDP患者和对照组血清中的补体因子（因子H、Ba、sC5b-9、C3、C4和CH50）。我们还研究了与补体沉积和血清补体因子相关的临床数据。

结果

所有CIDP患者的髓鞘上都沉积了C4d，其密度和荧光强度均显著高于对照组。在9名CIDP患者中有3名检测到了C3c，而未检测到C5b-9。部分患者的血清sC5b-9水平高于正常范围，但CIDP患者与对照组之间的血清补体水平没有显著差异。C4d的密度和血清C3水平与Hughes功能分级评分呈正相关。

结论

所有CIDP患者都观察到了C4d的沉积。仅有少数患者表现出经典途径或凝集素途径的激活。经典途径和/或凝集素途径在CIDP的发病机制中起主要作用。腓肠神经的病理变化及血浆中的活化补体因子可能有助于选择包括C2抑制剂在内的治疗药物。

引言

慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病（CIDP）是最常见且异质性最强的免疫介导的多发性神经病变。其特征是运动神经和感觉神经的脱髓鞘（Lehmann等人，2019年）。最近提出的CIDP诊断指南侧重于临床和电生理学诊断（Van den Bergh等人，2021年）。这些指南提高了诊断的准确性（Allen，2024年），但CIDP的潜在发病机制仍不清楚。在之前的研究中，30%的CIDP患者的Ranvier结或髓鞘轴突的 paranodes 被血清免疫球蛋白G（IgG）染色（Devaux等人，2012年）。最近，以针对Ranvier结或paranodes的自身抗体为特征的疾病被重新分类为nodopathies，而非CIDP（Delmont等人，2017年；Querol等人，2013年；Devaux等人，2016年；Doppler等人，2016年；Querol等人，2014年）。然而，自身抗体对CIDP发病机制的贡献仍不确定，因为大多数患者的靶分子尚未被识别。静脉注射免疫球蛋白和类固醇等治疗方法的效果在不同类型的CIDP患者中存在差异（Kuwabara等人，2015年；Iijima等人，2005年），这突显了参与CIDP的免疫系统的异质性。目前，尚无可靠的标志物来评估免疫激活情况，这使得选择最佳治疗方案变得复杂。

补体系统在先天免疫系统中起着关键作用，可保护身体免受外来病原体的侵害（Ricklin等人，2010年）。它通过经典途径、凝集素途径和替代途径被激活，生成C3转化酶复合物，将C3裂解为C3a和C3b。经典途径由IgM和IgG簇引发，激活C1复合物，导致C4裂解为C4a和C4b。凝集素途径由甘露糖结合凝集素、ficolins和collectins与细菌表面或改变的宿主细胞上的碳水化合物结合而启动，激活MBL相关丝氨酸蛋白酶，形成与经典途径相同的C3转化酶C4b2b。另一方面，在替代途径中，因子B与C3(H₂O)结合（该C3H₂O可由三种激活途径产生），然后被因子D裂解，生成C3转化酶C3(H₂O)Bb或C3bBb和Ba。三种途径导致的补体过度激活受到补体调节蛋白的调控，这些蛋白可加速C3和C5转化酶的降解，并通过丝氨酸蛋白酶因子I将C3b或C4b裂解为C3d或C4d。终端途径由补体成分C5被C5转化酶C4b2b3b和C3bBbC3b裂解为C5a（称为过敏毒素）和C5b引发，从而形成膜攻击复合物。部分C5–7复合物由C6和C7与C5b结合形成，不会被招募到细胞膜上，而是以可溶性C5b-9的形式存在于液体相中。

补体系统在CIDP中的作用尚不明确。在4名CIDP患者中的2名患者的髓鞘边缘检测到了C3d的沉积（Hays等人，1988年）。另有研究表明，9名CIDP患者中有6名的血清可诱导髓鞘上的补体C3d沉积（Vallat等人，2020年）。在另一项研究中，一些CIDP患者的血清C5a和sC5b-9水平高于疾病对照组（Quast等人，2016年）。这些先前的研究证明了部分CIDP患者的C3和终端途径被激活。然而，尚未对经典途径、凝集素途径或替代途径的激活情况进行研究。因此，在本研究中，我们重点关注免疫组学发现和血清补体标志物，以明确对CIDP发病机制至关重要的补体途径的激活情况。

研究设计与参与者

为了进行病理分析，我们招募了2010年1月1日至2024年12月31日期间在和歌山医科大学医院或国立京都南医院接受腓肠神经活检的16名参与者。其中包含9名CIDP患者、4名Charcot-Marie-Tooth病1A型（CMT1A）患者（作为非自身免疫性脱髓鞘性神经病的对照组），以及3名原发性系统性血管炎（PSV）患者（作为自身免疫性炎症性神经病的对照组）。

CIDP患者和病理分析对照组患者的临床数据

我们对9名CIDP患者、4名CMT1A患者（作为非自身免疫性脱髓鞘性神经病的对照组）以及3名PSV患者（作为自身免疫性炎症性神经病的对照组）进行了病理分析。临床数据总结见表1，每位患者的详细信息见表S1–2。在CIDP患者中，女性与男性的比例为5:4（55%），发病时的平均年龄分别为66岁和68岁。

讨论

本研究旨在阐明补体系统在CIDP发病机制中的作用，并发现了四个新的发现。首先，所有CIDP患者的髓鞘上都观察到了C4d的沉积，表明经典途径和/或凝集素途径被激活。然而，C5b-9的缺失表明终端途径未被激活。其次，少数患者的外周血中显示出补体激活的迹象。

作者贡献声明

村上圭修：撰写 – 原始草案、方法学、研究、概念化。辻本宏：方法学、研究、数据管理。中山良明：资源、方法学、研究。武内宏樹：资源、方法学、研究。山本健二：监督、方法学、概念化。片山圭一：方法学、研究。稲田雄介：资源、方法学、研究。稲葉雄貴：资源、方法学、研究。神林雅敏：

伦理声明

该研究获得了和歌山医科大学（批准编号：4348；批准日期：2025年1月28日）、国立和歌山医院（批准编号：06–9；批准日期：2025年3月21日）以及国立京都南医院（批准编号：2024–13；批准日期：2025年3月28日）的伦理委员会批准。所有参与者均签署了书面知情同意书。所有程序均按照1964年的指南进行。

关于写作过程中使用生成式AI和AI辅助技术的声明

在准备本作品时，作者使用了ChatGPT-4o来改进语言表达和可读性。使用该工具后，作者根据需要对内容进行了审核和编辑，并对出版物的内容负全责。

资金支持

本研究得到了JSPS KAKENHI（JP22K07498和JP25K1075）以及和歌山医科大学研究优先领域（K21TS03）的资助。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文所述工作的财务利益或个人关系。

致谢

我们感谢和歌山医科大学的生命科学领域认证编辑Benjamin Phillis对本文的校对和编辑工作。