自噬与凋亡的同步：黑葡萄花青素在HepG2肝癌细胞中增强5-FU化疗效果的机制

《Medical Oncology》：Autophagy-Apoptosis synchronization: A mechanism of black grape anthocyanins mediated chemosensitization of 5-FU in HepG2 hepatocellular carcinoma cells

黑葡萄花青素协同低剂量5-氟尿嘧啶通过ROS介导钙信号调控增强肝癌细胞凋亡与自噬，同时保持对正常肝细胞低毒性。

摘要

肝细胞癌（HCC）在印度仍然是一种重要的癌症类型，年发病率约为1.6%。传统化疗方法的局限性，如全身毒性和药物耐药性，凸显了使用天然化学增敏剂来改善治疗效果的必要性。本研究评估了从Manjari Medika（MM）葡萄品种中提取的黑葡萄花青素（BGA）的化学增敏能力，以提升低剂量5-氟尿嘧啶（5-FU）在HepG2细胞中的疗效。通过液相色谱-质谱（LC-MS）分析发现，MM葡萄富含多酚，并含有12种不同的花青素衍生物。研究人员分别单独或联合使用不同浓度的5-FU和BGA处理HepG2细胞，并通过生化和成像技术检测了细胞的存活率、活性氧（ROS）生成情况、线粒体完整性、钙离子内流、细胞凋亡及自噬指标。结果显示，5-FU（50 μM）与BGA（80 μg/ml）联合使用时的细胞毒性显著高于单独使用任一药物的情况。这种组合导致细胞质内钙离子内流增加，同时细胞内和线粒体内的活性氧（ROS）水平升高，进而引发线粒体去极化和结构破坏。这些变化激活了细胞内在的凋亡信号通路，表现为Bax和Caspase-3的表达增加以及Bcl-2水平降低。自噬过程也相应增强，表现为LC3A/B和Beclin 1的过表达（分别增加了2.36倍和1.27倍）。使用NAC清除活性氧可以减轻这些不良影响，说明活性氧在此过程中起到了重要的中介作用。值得注意的是，BGA对原代肝细胞几乎无细胞毒性。总体而言，BGA是一种强效且具有选择性的化学增敏剂，它通过调节ROS介导的钙信号通路、细胞凋亡和自噬机制，从而提升了5-FU在HCC细胞中的疗效。