基于截短型前 F 蛋白 mRNA 疫苗：对抗呼吸道合胞病毒的新希望

呼吸道合胞病毒（RSV）严重威胁儿童和老年人健康，现有疫苗存在不足。研究人员开发基于修饰前 F 蛋白（LC2DM-LNP）的 mRNA 疫苗。结果显示，该疫苗免疫效果良好，能有效保护且无疫苗增强性呼吸道疾病风险，为高风险人群带来新希望。

　　呼吸道合胞病毒（RSV）是引发儿童急性下呼吸道感染的重要病原体，多数 2 岁以下儿童会感染，且因自然免疫力低易复发。在老年人中，尤其是免疫系统较弱者，RSV 感染影响类似甲型流感。尽管其危害大，但疫苗研发困难重重。上世纪 60 年代的 FI-RSV 疫苗不仅未起到保护作用，还导致了疫苗增强性呼吸道疾病（VERD） 。近期，GSK、Moderna 和 Pfizer 研发的 RSV 疫苗虽获批准，但仍存在问题，如 Moderna 的 mRNA 疫苗在儿童临床试验中出现严重 RSV 相关下呼吸道感染的不平衡，引发对 VERD 风险的担忧。在此背景下，厦门大学的研究人员开展了一项旨在开发更有效、更安全 RSV 疫苗的研究。
研究人员开发了一种基于修饰前 F 蛋白（LC2DM）的 mRNA 疫苗（LC2DM-LNP）。在研究过程中，运用了多种关键技术方法。通过构建多种动物模型，包括年轻和老年 BALB/c 小鼠、棉鼠等，评估疫苗免疫原性和保护效果；采用 ELISA、中和试验、ELISpot 试验、流式细胞术等技术，检测抗体水平、T 细胞反应和细胞因子表达；利用脂质纳米颗粒（LNP）技术制备疫苗，并对 mRNA 进行体外转录和纯化。
在设计和表征截短型前 F 免疫原方面，研究人员通过替换信号肽序列、优化截断和连接策略、引入突变等方法，构建了 LC2DM 免疫原，并将其 mRNA 包裹在 LNP 中制成疫苗。经检测，该疫苗的 mRNA 完整性好、加帽率高，LNP 包裹效率高、粒径均一。在细胞实验中，转染 LC2DM mRNA 的细胞与关键抗体结合能力强，且膜表达水平较高。
免疫原性研究发现，在年轻和老年 BALB/c 小鼠中，LC2DM-LNP 诱导的中和抗体滴度显著高于其他对照组。在老年小鼠中，该疫苗还能诱导更持久的体液免疫反应。在抗体质量评估实验中，敲除位点 II 的 LC2DM-IIKO-LNP 虽中和抗体滴度略低于 LC2DM-LNP，但仍高于其他疫苗，且 LC2DM-LNP 诱导的中和抗体与结合抗体比例最高，在避免潜在 VERD 效应方面可能具有优势。
在细胞免疫反应研究中，mRNA 疫苗能诱导 Th1 偏向的 T 细胞免疫反应，LC2DM-LNP 在诱导 CD4⁺和 CD8⁺ T 细胞产生 IFN-γ 方面表现最为突出。
在棉鼠模型实验中，LC2DM-LNP 疫苗能有效保护棉鼠免受 RSV 感染，且不会导致 VERD。即使在突破感染的情况下，LC2DM-LNP 免疫组的肺部炎症也明显减轻。对于先前暴露于 RSV 的棉鼠，单剂量 LC2DM-LNP 疫苗仍能增强免疫反应，有效控制二次感染。
在母源免疫研究中，LC2DM-LNP 疫苗免疫的母鼠所产幼崽在出生时具有较高的中和抗体滴度，且在 28 天内抗体滴度下降缓慢。幼崽经 RSV 攻击后，LC2DM-LNP 免疫组的肺部和鼻甲病毒载量显著低于其他组，病理变化也更轻微。
研究结论表明，LC2DM-LNP 疫苗在多种动物模型中均能诱导强大的免疫反应，有效保护机体免受 RSV 感染，且不会增加肺部炎症。这为 RSV 易感人群，如儿童、老年人和新生儿，提供了一种潜在的有效疫苗选择。不过，该研究也存在一些局限性，如母源免疫研究缺乏 FI-RSV 对照组，动物模型不能完全反映人类情况，抗原锚定形式增强免疫原性的分子机制有待进一步阐明等。但总体而言，这项研究为 RSV 疫苗的开发提供了重要的理论依据和实践基础，具有重要的科学意义和临床应用前景。