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在卵巢癌治疗中，PARP 抑制剂（PARPi）虽重要，但耐药及对无同源重组缺陷（HRD）患者疗效不佳问题突出。研究人员针对此开展研究，发现甲基 stat 可靶向组蛋白去甲基化酶 JMJD1B/C，使卵巢癌细胞对 PARPi 敏感，为卵巢癌治疗提供新方向。
卵巢癌，作为妇科恶性肿瘤中的 “头号杀手”，悄无声息地威胁着众多女性的生命健康。由于早期症状隐匿，约 75% 的患者确诊时已处于晚期。目前，标准治疗方案包括手术、化疗以及针对特定患者的 PARP 抑制剂（PARPi）维持治疗。PARPi 在卵巢癌治疗中占据重要地位，尤其是对于同源重组（HR）缺陷（HRD）的患者，它能显著延长患者生存期。然而，PARPi 耐药问题却成为了治疗路上的 “拦路虎”，大多数复发患者会逐渐对 PARPi 产生耐药性，导致预后不佳。此外，对于没有 HRD 的患者，PARPi 的治疗效果也不尽人意 。因此，寻找能克服 PARPi 耐药、提高其疗效的方法迫在眉睫。
在这样的背景下，德国德累斯顿工业大学附属医院等机构的研究人员勇挑重担，开展了一项极具意义的研究。他们旨在通过探索遗传因素对 PARPi 反应的影响，找到能使卵巢癌细胞对 PARPi 重新敏感的方法。最终，他们发现了一种名为甲基 stat 的小分子抑制剂，它能够靶向组蛋白去甲基化酶 JMJD1B/C，有效增强卵巢癌细胞对 PARPi 的敏感性，为卵巢癌的治疗带来了新的曙光。该研究成果发表在《Cancer Gene Therapy》杂志上，为全球卵巢癌患者带来了新的希望。
研究人员在本次研究中使用了多种关键技术方法。首先是 CRISPR-Cas9 技术，利用定制的 sgRNA 文库对 PARPi 耐药的卵巢癌细胞进行基因编辑，筛选出与 PARPi 耐药相关的基因。接着，通过生成 PARPi 耐药细胞系，模拟临床中患者对 PARPi 产生耐药的过程。同时，运用药物相互作用分析，采用组合指数（CI）法等评估甲基 stat 与 PARPi 联合使用时的效果。另外，借助蛋白质印迹法（Western Blot）检测相关蛋白表达，如以磷酸化组蛋白 H2AX（γH2AX）作为 DNA 双链断裂（DSB）的标记 ，探究甲基 stat 对 DNA 损伤修复的影响。
下面来看具体的研究结果：
- CRISPR-Cas9 功能缺失筛选确定 PARPi 反应的遗传决定因素：研究人员利用 CRISPR-Cas9 技术，在 PARPi 耐药的 Olres-UWB1.289 细胞中进行功能缺失筛选。通过构建靶向 1572 个人类候选基因的 sgRNA 文库，经多步筛选，最终确定了 34 个促进 Olres-UWB1.289 细胞 PARPi 耐药的候选基因12。
- 将 CRISPR-Cas9 筛选结果转化为 PARPi 增敏的药理学策略：针对筛选出的候选基因，研究人员测试了相关抑制剂与奥拉帕利（olaparib）联合使用的效果。发现甲基 stat 与奥拉帕利在多个浓度下均呈现协同作用，且在多种卵巢癌和乳腺癌细胞系模型中，无论细胞的 BRCA1 突变状态和 PARPi 耐药状态如何，甲基 stat 都能有效增强奥拉帕利的敏感性34。
- JMJD1B/C 基因缺失对 PARPi 敏感性的影响：通过 CRISPR-Cas9 技术分别敲除 JMJD1B 和 JMJD1C 基因，发现单独敲除 JMJD1B 或 JMJD1C 基因对奥拉帕利敏感性影响较小，但双敲除则显著增加了细胞对奥拉帕利的敏感性，表明 JMJD1B 和 JMJD1C 基因在促进 PARPi 耐药中起重要作用56。
- 甲基 stat 在 PARPi 增敏能力上优于常见去甲基化酶抑制剂：与其他常见的 DNA 组蛋白去甲基化酶抑制剂相比，如 GSK-J1、PFI - 90 和 GSK-LSD1 等，甲基 stat 在与奥拉帕利联合使用时，能在更多浓度水平上产生协同作用，表现出最强的 PARPi 增敏效果78。
- 甲基 stat 调节 PARPi 耐药或 BRCA1 proficient 卵巢癌细胞在奥拉帕利选择压力下的克隆动态：利用双荧光克隆竞争试验，研究发现甲基 stat 能够减轻 PARPi 耐药细胞或 BRCA1 proficient 细胞在奥拉帕利治疗下的正向选择，稳定耐药细胞和敏感细胞的比例910。
- 甲基 stat 增加对奥拉帕利诱导的 DNA 双链断裂形成的敏感性：以 Olres-KB1P-G3 + BRCA1 细胞为模型，研究表明甲基 stat 单独作用时对 γ-H2AX 无影响，但与奥拉帕利 / 甲基甲烷磺酸酯（MMS）联合使用时，能剂量依赖性地增强 γ-H2AX 的诱导。同时，JMJD1B/JMJD1C 双敲除细胞对奥拉帕利 / MMS 治疗的 γ-H2AX 反应更高，说明甲基 stat 对 DNA 损伤反应的影响可能由 JMJD1B/JMJD1C 去甲基化酶介导1112。
在研究结论和讨论部分，研究人员指出，他们识别并验证了组蛋白去甲基化酶 JMJD1B/C 是 PARPi 反应的负向遗传调节因子。甲基 stat 通过靶向 JMJD1B/C，能有效使卵巢癌细胞对 PARPi 敏感，且这种敏感性增强与细胞的固有 PARPi 耐药状态或 BRCA1 突变背景无关。这一发现具有重要的临床转化意义，一方面为提高 PARPi 在卵巢癌治疗中的疗效提供了新策略，有望突破 HRD 限制；另一方面为克服 PARPi 耐药的患者提供了替代治疗方案。不过，研究也存在一定局限性，如 CRISPR-Cas9 筛选可能存在遗漏，甲基 stat 并非完全特异性针对 JMJD1B/C，其作用机制可能涉及更多未探索的途径。但总体而言，该研究为卵巢癌治疗开辟了新方向，为后续研究和临床应用奠定了坚实基础，值得进一步深入探索。
