基因缺失型天花疫苗株天坛株(TTVAC7/TTVC5)对猴痘病毒的多重保护效应研究

为解决传统天花疫苗株天坛株(VTT)的安全性问题并提升对猴痘病毒(MPXV)的交叉保护效果，研究人员通过基因编辑技术构建了TC7L-TK2L等多基因缺失的重组疫苗株TTVAC7和TTVC5。动物实验表明，两种疫苗可诱导高水平中和抗体(1:140-1:181)和Th1/Tc1细胞免疫，显著减轻小鼠肺组织病理损伤(评分降低p<0.01)和家兔睾丸坏死，为猴痘防控提供了更安全的候选疫苗。

　　

猴痘病毒(MPXV)引发的疫情已被列为国际关注的公共卫生紧急事件，其临床症状与天花相似但缺乏特异性疫苗。虽然传统天花疫苗株天坛株(VTT)能提供85%的交叉保护，但存在引发肺炎、脑炎等严重不良反应的风险。2017年中国无锡就曾发生VTT接种后感染案例，凸显疫苗安全性改进的紧迫性。

中国农业科学院长春兽医研究所的研究团队通过同源重组和Cre/LoxP系统，构建了两种多重基因缺失的VTT衍生株——TTVAC7(缺失TC7L-TK2L等7个基因)和TTVC5(缺失5个关键基因)。这些缺失片段涉及病毒毒力(如TA35R)、宿主范围(如TE)和免疫调节(如TB13R)等功能，前期研究已证实其安全性显著提升。

研究采用双模型验证策略：通过BALB/C小鼠评估VTT攻毒保护效果，新西兰兔模型测试MPXV交叉保护。关键技术包括：1) 流式细胞术检测CD3⁺CD4⁺/CD8⁺ T细胞亚群；2) 病毒空斑试验测定中和抗体效价；3) 组织病理评分系统量化肺损伤；4) 双抗体夹心ELISA检测细胞因子。

免疫原性分析

疫苗免疫28天后，TTVAC7/TTVC5组小鼠血清IgG滴度较对照组提升显著(p<0.01)，中和抗体达1:140-1:181。流式显示CD11c⁺树突状细胞成熟标志物(CD80/CD86/MHC II)表达量增加2-3倍，Th1型细胞因子IFN-γ分泌量显著高于对照组(p<0.01)。

小鼠攻毒保护

VTT鼻腔攻击后，模型组小鼠体重下降达32%，而疫苗组仅11-14%。肺组织病理显示，模型组出现广泛肺泡出血和中性粒细胞浸润，疫苗组病理评分降低60%(p<0.01)。病毒载量检测显示，疫苗组鼻、气管、肺组织中病毒滴度较模型组降低2-3个数量级。

家兔交叉保护

MPXV静脉攻击后，模型组家兔体温高达40.3℃，皮肤痘疹数量是疫苗组的5倍(p<0.05)。睾丸组织出现大面积坏死灶，而疫苗组仅见局部炎症。肺组织病毒载量检测显示，疫苗组比模型组低10² PFU/g(p<0.01)。

该研究首次证实，通过精准删除TC7L-TK2L等毒力基因簇，可在保留VTT免疫原性的同时显著提升安全性。特别值得注意的是，单剂免疫即可诱导持久的体液和细胞免疫应答，这对突发疫情应急接种具有重要意义。论文中建立的"小鼠-家兔"双模型体系，为后续疫苗评价提供了标准化方案。鉴于当前猴痘病毒在非洲的暴发态势(2024年疑似病例超1.7万例)，这种基因缺失疫苗策略为应对人畜共患病提供了新思路。