基于绿色色谱技术同步检测降糖药及三聚氰胺杂质的方法开发与评价

编辑推荐：本研究针对降糖药复方制剂中二甲双胍(MET)与其药典杂质三聚氰胺(MEL)的同步检测难题，开发了高效薄层色谱(HPTLC)和超高效液相色谱(UPLC)两种绿色分析方法。通过优化甲醇-乙酸盐等环保溶剂体系，实现Saxagliptin(SAX)、MET与MEL的高效分离，经ICH验证显示回收率>99%，并运用NEMI/GAPI/AGREE等工具证实其环境友好性，为药品质量控制提供新方案。

　　

在糖尿病治疗领域，二甲双胍(MET)与沙格列汀(SAX)的复方制剂已成为临床常用方案。然而，MET在生产过程中可能产生药典规定的有毒杂质三聚氰胺(MEL)，这种物质不仅会引发肾损伤，更因其与蛋白质结合的特性可能造成长期健康风险。现有分析方法多聚焦于SAX与MET的二元检测，对MEL杂质的同步分析存在明显空白，且传统色谱方法常使用氯仿等有毒溶剂，不符合绿色化学趋势。

针对这一技术瓶颈，来自埃及Beni-Suef大学与Nahda大学的研究团队在《BMC Chemistry》发表创新成果，开发了两种环境友好的色谱分析方法。研究通过系统优化溶剂体系，首次实现SAX、MET与MEL的三组分同步检测：HPTLC方法采用硅胶60 F₂₅₄铝板，以乙酸乙酯:甲醇:氨水:冰醋酸(6:4:1:0.3)为展开剂；UPLC方法则使用C₁₈柱，以甲醇-0.01M十二烷基硫酸钠(pH3.3)为流动相。两种方法均在215 nm波长下完成检测，5分钟内实现基线分离。

关键技术路线包含：1）通过溶剂筛选建立绿色色谱体系；2）采用ICH Q2(R1)指南进行方法学验证；3）运用NEMI、Analytical Eco-Scale、GAPI和AGREE四种工具评估环境友好性；4）通过pkCSM软件预测MEL的毒代动力学特征。研究团队从当地市场获取Kombiglyze^? XR片剂作为实际样本，验证方法适用性。

研究结果显示：HPTLC法对SAX/MET/MEL的线性范围分别为0.2-10/0.2-10/0.02-1 μg/band，UPLC法则达0.5-100/0.5-70/0.2-10 μg/mL。系统适用性测试中，分离度(R_s)均>1.5，理论塔板数(N)最高达25,550。特别值得注意的是，绿色评估显示HPTLC与UPLC的AGREE得分分别为0.77和0.86，远优于使用氯仿的文献方法。毒理预测揭示MEL虽无肝毒性，但具有显著的肾小管毒性（最大耐受剂量仅0.754 log mg/kg/day）。

在方法学创新方面，研究解决了三个关键问题：1）通过氨水-冰醋酸体系克服MET与MEL的共洗脱难题；2）采用十二烷基硫酸钠改善峰形拖尾；3）首次实现复方制剂中0.005 μg/mL级MEL的检测（LOD）。与已报道HPLC方法相比，新方法的分析时间缩短60%，有机溶剂用量减少45%。

讨论部分着重强调：1）这是首个同步检测SAX-MET-MEL的绿色分析方法；2）建立的毒代动力学模型为制定MEL限量标准提供依据；3）开发的方法符合欧盟药典对MET杂质检测的要求。研究人员特别指出，该方法在发展中国家药品质量控制中具有特殊价值，其低成本特性（HPTLC成本<$5/样）适合资源有限地区推广。

这项研究为抗糖尿病药物的质量控制树立了新标杆，其创新性体现在：将绿色化学理念贯穿方法开发全过程，通过多维度环境评估工具量化环保性能，同时兼顾分析灵敏度与操作经济性。未来研究可进一步拓展至其他DPP-4抑制剂与MET的复方制剂分析，为全球糖尿病用药安全提供更全面的技术保障。