基于荧光胺衍生化的绿色光谱法快速检测纳他霉素及其在眼药水和人工房水中的应用研究

编辑推荐：为解决传统纳他霉素(Natamycin)检测方法耗时耗材、污染环境等问题，研究人员开发了一种基于荧光胺(Fluorescamine)衍生化的绿色光谱检测技术。该研究在pH 7.6硼酸缓冲液中实现6分钟内完成反应，线性范围0.25-4.0μg/mL，检测限(LOD)低至0.082μg/mL，成功应用于眼药水(Hosaptam?)和人工房水分析。该方法操作简便、环境友好，为抗真菌药物质量控制提供了新方案。

　　在真菌性眼病治疗领域，纳他霉素作为目前唯一上市的外用抗真菌眼药，其质量控制至关重要。然而传统HPLC方法存在有机溶剂消耗大、前处理复杂等问题，已有荧光检测法又面临反应时间长（需加热35分钟）、灵敏度有限等挑战。针对这些技术瓶颈，研究人员开发了一种创新的荧光胺衍生化光谱检测体系。

研究团队采用荧光胺作为荧光探针，利用纳他霉素分子中的伯胺基团，在pH 7.6硼酸缓冲液中室温下6分钟即可形成强荧光产物。通过系统优化反应条件（pH 7.6缓冲液0.5mL，荧光胺1.6mL），建立的方法较已有技术显著提升了检测效率。关键实验技术包括：荧光光谱分析（Perkin Elmer LS 45）、Job's法测定化学计量比、人工房水模拟体系验证，以及通过生态评分和AGREE软件（0.67分）评估方法绿色度。

研究结果显示：该方法在0.25-4.0μg/mL范围内线性良好（R2=0.9995），检测限达0.082μg/mL，较碳点荧光法灵敏度提高5倍。在眼药水分析中回收率102.24%（RSD=1.79%），与HPLC法无统计学差异（t=2.301<2.306）。人工房水加标实验显示99.14-104.63%的回收率，证实方法抗干扰能力强。反应化学计量学证实为1:1摩尔比，符合纳他霉素单氨基结构特征。

该研究的创新性体现在三方面：首次将荧光胺衍生化应用于纳他霉素检测；建立目前最快速的检测方案（6分钟vs传统30分钟）；通过绿色化学评估证实其环境友好性（生态评分90分）。这项工作为抗真菌药物的质量控制提供了新范式，特别适合资源有限的基层实验室。未来可进一步拓展至其他含氨基药物的检测，推动绿色分析化学在制药领域的应用。论文发表于《BMC Chemistry》，为药物分析方法创新提供了重要参考。