评估 CareStart?疟疾 HRP2/pLDH (Pf/PAN) 联合快速诊断测试在疟疾共流行地区诊断恶性疟原虫感染的性能及与寄生虫密度的关联

为解决资源匮乏地区疟疾可靠诊断难题，研究人员开展 “评估 CareStart?疟疾 HRP2/pLDH (Pf/PAN) 联合快速诊断测试诊断恶性疟原虫感染性能及与寄生虫密度关联” 的研究。结果显示该测试诊断恶性疟可靠，Pf/Pan 阳性表明寄生虫密度更高，对临床诊疗意义重大。

　　疟疾，这个古老而又顽固的疾病，一直以来都是全球公共卫生领域的重大挑战。尽管全球各方都在积极努力，可自 2015 年起，疟疾的发病率和死亡率却没有明显下降，2020 年发病率还上升了 3% ，之后三年也一直维持在较高水平。在疟疾流行的偏远农村地区，资源极度匮乏，这使得疟疾的可靠诊断变得异常艰难。传统的血液涂片显微镜检查虽然是现场标准诊断方法，但在这些地区很难实施和维持高质量检测。因为它对检验人员的专业技能要求极高，需要经过大量培训和认证，而且还依赖良好的工作环境，包括清洁的载玻片、合适的染色剂和功能正常的显微镜等，同时还需要技术监督、质量保证和定期培训。

在这样的背景下，免疫层析疟疾快速诊断测试（RDT）成为了极具吸引力的替代方法。其中，HRP₂/pLDH (Pf/PAN) 联合快速诊断测试（Pf/Pan RDT）能够检测恶性疟原虫特异性的富含组氨酸蛋白 2（HRP₂）和泛疟原虫乳酸脱氢酶（pLDH）抗原，可用于区分恶性疟和非恶性疟。然而，它也存在一些问题，比如无法直接量化寄生虫血症，而且不同研究对其检测结果与寄生虫密度的关系也存在争议。

为了深入探究这些问题，牛津大学临床研究单位印度尼西亚分校（Oxford University Clinical Research Unit Indonesia）、印度尼西亚大学医学院（Faculty of Medicine Universitas Indonesia）等机构的研究人员开展了一项研究。该研究成果发表在《Malaria Journal》上。

研究人员采用了以下主要技术方法：一是样本队列，研究样本来自印度尼西亚东松巴地区参与 PRIMA 临床试验（Trial Registration Number:NCT03916003）及其子研究 ACROSS 的患者；二是显微镜检查，以其作为参考方法，对采集的厚、薄血涂片进行染色和镜检；三是使用 CareStart?疟疾 HRP₂/pLDH (Pf/PAN) 联合快速诊断测试（CareStart Pf/Pan RDT）进行即时检测；四是数据分析，通过多种指标评估 RDT 的诊断性能，并利用逻辑回归模型分析其与寄生虫密度的关系。

下面来看研究结果：

1. 招募和基线特征：共有 327 人接受筛查，8 人被排除，2 人未进行 RDT 检测，最终 317 人纳入 RDT 诊断评估。参与者中男女数量相等，多数年龄在 10 - 26 岁之间，52% 的参与者在入组时出现发热症状。
2. 显微镜检查结果：158 人疟疾检测呈阳性，其中恶性疟原虫感染占 94.3% ，包括两例混合感染。几何平均寄生虫血症为 7575 个 /μL，中位数为 11000 个 /μL，儿童感染比例和寄生虫血症水平均高于成人。
3. Pf/Pan 快速诊断测试性能：HRP₂条带诊断恶性疟原虫感染的敏感性为 97.3%，特异性为 97.6%；pLDH 条带敏感性为 87.3%，特异性为 100%。显微镜检查与 HRP₂条带结果在检测恶性疟病例上无显著差异，但显微镜检查能检测出更多阳性疟疾病例。
4. 恶性疟指示性 RDT 结果与寄生虫密度的关联：Pf/Pan 阳性参与者的寄生虫密度高于 Pf 阳性参与者。寄生虫密度每增加 10 倍，RDT 检测为 Pf/Pan 阳性的几率是 Pf 阳性的 12.1 倍。

研究结论和讨论部分表明，CareStart? Pf/Pan RDT 是诊断恶性疟的可靠工具，Pf/Pan 阳性结果表明寄生虫密度更高，预示着患者可能存在高寄生虫血症，临床结局较差。因此，对于 RDT 诊断为 Pf/Pan 阳性的病例，应优先进行显微镜检查，以确认寄生虫密度和疟原虫种类。此外，研究还发现存在恶性疟原虫显微镜检查阳性但 RDT 检测不呈 Pf 阳性的情况，可能原因包括试剂盒故障、人为误差或 HRP₂基因缺失等。

这项研究对于疟疾的临床诊断和治疗具有重要意义。它为资源匮乏地区的疟疾诊断提供了更可靠的依据，有助于临床医生及时准确地判断患者病情，采取更有效的治疗措施，从而降低疟疾的发病率和死亡率，对全球疟疾防控工作起到了积极的推动作用。