牛疱疹病毒1型（BoAHV1）B细胞表位鉴定及应用研究

本研究针对牛疱疹病毒1型（BoAHV1）B细胞表位鉴定及应用展开，通过噬菌体展示肽库筛选，发现10个新型B细胞表位，其中PV116可诱导抗体生成并用于Western blot分析，为诊断工具开发提供重要依据

　　牛疱疹病毒1型（BoAHV1）是一种对全球养牛业造成巨大经济损失的病原体，其感染可引发包括牛呼吸道疾病综合征（BRDC）在内的多种疾病。目前，关于BoAHV1病毒蛋白中的B细胞表位研究仍不完善，这限制了对病毒致病机制的理解以及诊断工具和疫苗的开发。为了填补这一空白，河北大学生命科学学院的研究人员开展了一项研究，旨在通过噬菌体展示肽库技术鉴定BoAHV1的B细胞表位，并探索其在诊断工具开发中的应用潜力。该研究结果发表在《BMC Microbiology》上，为BoAHV1的防控提供了新的思路和方法。

牛疱疹病毒1型（BoAHV1）属于疱疹病毒科α亚科的Varicellovirus属，是一种感染所有牛种并能在任何年龄引发疾病的包膜DNA病毒。该病毒在全球范围内流行，给养牛业带来了沉重的经济负担，例如在美国每年造成的损失估计达30亿美元。BoAHV1感染可导致多种疾病，其中最严重的是牛呼吸道疾病综合征（BRDC），此外还包括结膜炎、阴道炎、脑膜脑炎和流产等。尽管已有研究鉴定出BoAHV1的部分B细胞表位，但研究人员认为病毒中可能还存在更多未被发现的B细胞表位。

为了鉴定BoAHV1的B细胞表位，研究人员利用商业化的BoAHV1抗体对12-肽噬菌体展示肽库进行筛选。通过三轮生物淘选，研究人员从噬菌体展示肽库中筛选出16个与BoAHV1抗体反应的噬菌体克隆，并通过序列比对，鉴定出10个潜在的BoAHV1 B细胞表位，分别命名为PV109、PV108、PV116、PV59、PV50、PV130、PV113、PV49、PV62和PV133，这些表位分别位于病毒蛋白gB、gC、gG、gM、UL36、UL37和UL49中。进一步的实验表明，通过免疫小鼠合成肽PV116能够诱导产生适用于Western blot分析的抗体。此外，研究人员还利用鉴定出的表位PV49、PV108、PV109和PV116作为包被抗原，开发了一种用于检测血清中BoAHV1 IgG抗体的ELISA试剂盒。

在研究中，研究人员采用了噬菌体展示肽库技术、Western blot分析、ELISA试剂盒开发等关键技术方法。样本队列来源于河北动物疾病防控中心提供的临床牛血清样本。

在实验过程中，研究人员首先通过噬菌体展示肽库筛选出与BoAHV1抗体反应的噬菌体克隆，并鉴定出潜在的B细胞表位。随后，通过点杂交实验验证了这些表位能够被商业化的BoAHV1抗体和BoAHV1 IgG阳性牛血清识别。进一步的免疫小鼠实验表明，PV116能够诱导产生特异性抗体，并在Western blot分析中成功识别病毒蛋白。此外，研究人员利用鉴定出的表位开发的ELISA试剂盒在检测BoAHV1 IgG抗体方面表现出良好的性能，与商业化试剂盒的检测结果具有高度一致性。

该研究的结论指出，通过噬菌体展示肽库技术成功鉴定了10个新型BoAHV1 B细胞表位，其中PV116具有诱导抗体生成的能力，并可用于Western blot分析。此外，基于鉴定出的表位开发的ELISA试剂盒为BoAHV1抗体的检测提供了一种新的工具。这些发现不仅扩展了对BoAHV1病毒表位的认识，还为开发基于表位的诊断工具和疫苗提供了重要的理论依据。研究结果强调了B细胞表位鉴定在理解病毒致病机制和开发防控手段中的重要作用，为未来BoAHV1的研究和防控提供了新的方向。