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为探究膳食纤维及添加生物炭(Biochar)和过磷酸钙(SSP)对黑水虻幼虫(BSFL)肠道和粪便微生物群的影响,研究人员用不同底物饲养 BSFL。结果显示,不同底物影响幼虫生长、矿物含量和微生物群。该研究揭示了 BSFL 与微生物群的互作机制,为昆虫养殖提供参考。
在当今资源循环利用备受关注的时代,农业领域对于如何高效利用废弃物、建立可持续的营养循环,成为了科研人员重点攻克的难题。污水污泥富含磷(P)、钙(Ca)等矿物质,本可作为宝贵的肥料来源,然而其中的重金属和病原体却限制了其在农业中的直接应用。与此同时,黑水虻幼虫(Black Soldier Fly Larvae,BSFL)因其能将多种底物转化为富含蛋白质、脂质和矿物质的生物质,在废弃物处理和饲料生产方面展现出巨大潜力,逐渐进入人们的视野。但目前对于不同底物,尤其是添加源自污水污泥的矿物后,对 BSFL 肠道和粪便微生物群的影响,仍知之甚少。
为了深入探究这一问题,德国农业动物生物学研究所(Research Institute for Farm Animal Biology,FBN)的 Henry Reyer、Manfred Mielenz 等研究人员开展了相关研究。他们的研究成果发表在《Animal Microbiome》杂志上,为揭示 BSFL 与微生物群在底物转化过程中的相互作用机制,提供了关键线索,对优化昆虫养殖和饲料生产意义非凡。
在这项研究中,研究人员运用了多种关键技术方法。首先,他们精心准备了不同的饲养底物,包括鸡饲料(Chicken Feed Diet,CD)、高纤维盖恩斯维尔蝇饲料(Fly Diet,FD),以及在 FD 基础上分别添加生物炭(FD + BCH)和过磷酸钙(FD + SSP)的饲料。这些饲料中的生物炭由污水污泥在 500 - 700°C 无氧条件下碳化制成,过磷酸钙则通过污水污泥焚烧后的灰分经酸处理得到。接着,研究人员选取来自德国 Hermetia Baruth GmbH 公司的 BSF 种群进行饲养实验,每个处理设置多个重复。待幼虫发育至预蛹期(约 18 - 20 天),采集幼虫、粪便及底物样本。然后,研究人员对样本进行处理,提取 DNA。利用 16S rRNA 基因扩增子测序技术,分析微生物群落组成;通过定量 PCR 技术,测定细菌、古菌和真菌的数量;运用多种生物信息学分析方法,评估微生物多样性、差异丰度等。
研究结果如下:
- 幼虫生长与矿物含量:饲养在 CD 底物上的 BSFL 体重和干物质含量显著高于 FD 基底物组。不同底物饲养的幼虫矿物含量差异明显,FD + SSP 组幼虫体内 Ca、P、Na 和 K 浓度最高,FD + BCH 组铁含量数值最高,而 FD 基底物组幼虫的锌浓度低于 CD 组。
- 微生物多样性分析:通过 α 多样性分析发现,CD 组幼虫粪便和肠道样本中的微生物 α 多样性指数,普遍低于 FD 基底物组,仅幼虫肠道中的逆辛普森指数除外。β 多样性分析显示,不同底物来源的样本以及样本的不同来源(幼虫肠道、粪便和底物)之间,微生物群落存在显著差异。
- 微生物组成分析:细菌在幼虫粪便和肠道样本的微生物群落中占主导地位。CD 组粪便中的细菌丰度显著高于 FD 基底物组,而幼虫肠道中各组细菌丰度相似。古菌在样本中含量极少,生物炭的添加使 FD + BCH 组幼虫肠道中古菌丰度增加。真菌在粪便和幼虫样本中的总量相当,FD + SSP 组粪便中的真菌丰度较高。
- 微生物群落差异分析:在家族水平上,CD 组粪便和幼虫肠道的微生物群落复杂性较低,主要由摩根氏菌科(Morganellaceae)和乳杆菌目(Lactobacillales)的家族主导。而 FD 基底物组的微生物组成分布在多个家族。在属水平上,对 FD、FD + BCH 和 FD + SSP 组的比较分析发现,不同组间微生物属的丰度存在差异。例如,FD + BCH 组幼虫肠道中大肠杆菌 - 志贺氏菌(Escherichia - Shigella)、摩根氏菌(Morganella)等属的丰度较低;FD + SSP 组中,假单胞菌(Pseudomonas)、食酸菌属(Ochrobactrum)等与磷溶解相关的微生物属丰度增加。
研究结论和讨论部分指出,本研究充分表明 BSFL 对不同饲养底物具有强大的适应性。CD 底物虽能促进幼虫生长,但会降低微生物多样性;高纤维的 FD 饮食则能充分发挥整体生物的底物转化潜力,实现可持续生产。添加生物炭有助于优化底物微生物生长环境,为幼虫提供钙源,但不能作为额外的磷源。过磷酸钙的添加促进了具有磷溶解特性的假单胞菌和真菌的生长,可能提高底物中磷的生物利用度。然而,使用污水污泥衍生产品饲养 BSFL 时,重金属积累的风险不容忽视,其对微生物群落的影响还需进一步研究。
综上所述,该研究揭示了 BSFL 及其微生物群在底物生物转化过程中的特定机制,为利用污水污泥衍生产品进行昆虫养殖提供了理论依据。未来,可通过针对性的微生物接种实验,进一步探究微生物对底物营养的适应机制,以及幼虫对微生物群落的主动影响,从而推动昆虫养殖产业的可持续发展。