超声辅助酶法提取甘蔗皮多糖的工艺优化及其抗氧化活性研究

【字体: 时间:2025年02月12日 来源:Scientific Reports 3.8

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  本研究针对甘蔗皮资源浪费问题,通过超声辅助酶法(UAEE)优化甘蔗皮多糖(SPP)提取工艺,采用响应面法确定最佳条件为液料比40 mL/g、超声温度50°C、超声时间40 min、纤维素酶用量5%,提取率达5.38%,总糖含量75.52%。结构表征(FT-IR/NMR)证实其为吡喃型多糖,体外抗氧化实验显示4 mg/mL浓度下对DPPH和·OH自由基清除率分别达54.63%和33.91%,为甘蔗皮高值化利用提供理论依据。

  

甘蔗皮:从农业废弃物到功能性多糖的绿色转化

甘蔗作为全球重要的经济作物,其加工过程中产生的甘蔗皮约占甘蔗重量的20%,长期以来被视为废弃物。这些富含纤维素、蛋白质和生物活性物质的副产物,若未经合理利用,不仅造成资源浪费,还可能引发环境问题。近年来,植物多糖因其广泛的生物活性(如抗氧化、抗病毒等)成为研究热点,而甘蔗皮多糖(SPP)的潜在价值却鲜有报道。传统多糖提取方法如热水浸提效率低下,酸碱提取易破坏结构,如何高效环保地开发甘蔗皮资源成为亟待解决的问题。

针对这一挑战,重庆师范大学碳水化合物科学与工程重点实验室的研究团队在《Scientific Reports》发表了一项创新研究。他们采用超声辅助酶法(UAEE)结合响应面优化技术,成功从甘蔗皮中提取出高纯度多糖,并系统评价了其结构和抗氧化活性。这项研究为农业废弃物的高值化利用提供了新思路。

关键技术方法

研究以广西产黑甘蔗皮为原料,经脱脂预处理后,通过单因素实验和Box-Behnken响应面设计优化UAEE工艺参数。采用酚硫酸法测定总糖含量,傅里叶变换红外光谱(FT-IR)和核磁共振(13C NMR)解析多糖结构,并通过DPPH和·OH自由基清除实验评估抗氧化活性。

工艺优化与结构解析

单因素实验揭示关键参数影响

液料比在20-40 mL/g范围内,SPP得率随溶剂增加而上升,超过40 mL/g时因酶反应效率下降导致得率降低。超声温度50°C时得率最高(5.25%),温度过高或过低均会影响酶活性。超声时间40分钟达到平衡点,延长会导致多糖结构破坏。纤维素酶用量5%时效果最佳,过量酶会因聚集作用降低提取效率。

响应面法精准优化工艺

通过三因素三水平响应面实验建立数学模型,确定最优条件为液料比40.59 mL/g、超声温度50.58°C、纤维素酶用量4.95%,预测得率5.46%。实际验证调整为40 mL/g、50°C、5%酶用量时,得率5.38%与预测值高度吻合。方差分析显示模型R2=0.9981,各因素影响排序为:液料比>酶用量>超声温度。

结构特征解析

FT-IR图谱显示3285 cm-1处强吸收峰(O-H伸缩振动),2941 cm-1弱峰(C-H伸缩振动),1635 cm-1吸收峰(C=O不对称伸缩振动),1196-1085 cm-1连续峰提示吡喃环结构,846 cm-1弱峰暗示可能存在微量呋喃糖。13C NMR谱中δ103.69和92.17 ppm处的异头碳信号,以及69.23-76.44 ppm的C2-C5峰进一步证实SPP主要为β-吡喃型多糖,含少量阿拉伯糖。

抗氧化活性评价

在0.25-4 mg/mL浓度范围内,SPP对DPPH自由基的清除率呈浓度依赖性增长,4 mg/mL时达54.63%(阳性对照Vc为95.30%)。对羟基自由基(·OH)的清除率同样随浓度增加而升高,最高为33.91%,虽低于Vc但展现显著活性。这种抗氧化能力可能与其分子中的羟基和糖苷键结构有关。

研究启示与展望

该研究首次系统建立了超声辅助酶法提取甘蔗皮多糖的优化工艺,相比传统方法具有提取时间短(40分钟)、温度低(50°C)、得率高(5.38%)等优势。结构表征证实所得SPP为具有生物活性的吡喃型多糖,其适中的自由基清除能力为开发天然抗氧化剂提供了新选择。特别值得注意的是,研究中采用的UAEE技术实现了纤维素酶与超声波的协同效应——超声波空化作用破坏细胞结构,而酶解特异性降解细胞壁,这种"物理-生物"联合策略为植物活性成分提取提供了普适性方法学参考。

从资源循环角度,该研究将甘蔗皮这一农业废弃物转化为高附加值功能性原料,每吨甘蔗皮理论上可提取约53.8 kg多糖,按当前天然多糖市场价格估算,可创造显著经济效益。未来研究可进一步探索SPP的构效关系,通过分子修饰提高活性,并评估其在食品保鲜、保健品开发等领域的应用潜力。这项成果不仅为甘蔗加工产业链的绿色发展提供了技术支撑,也为其他农作物副产物的综合利用树立了典范。

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