工程动物表达微生物酶助力甲基汞生物修复:开启生态净化新征程

【字体: 时间:2025年02月13日 来源:Nature Communications

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  甲基汞(MeHg)在食物链中生物放大,危害人类和野生动物健康,现有修复技术难以应对。研究人员通过工程改造果蝇和斑马鱼,使其表达 MerA 和 MerB 酶。结果显示,工程动物汞积累减少且抗性增强。该研究为生物修复提供新方向。

  在大自然的生态舞台上,汞,这个看似低调却极具破坏力的 “隐藏杀手”,正悄然威胁着整个生物世界的健康与平衡。汞广泛存在于地壳中,由于地质活动以及人类的各类生产活动,如金矿开采等,大量汞被释放到环境里。在环境中,汞有着多种 “面貌”,像挥发性的元素汞(Hg0)、无机汞(Hg2+),还有毒性超强、生物可利用性高的甲基汞(MeHg)。其中,MeHg 堪称 “头号危险分子”,它能在食物链中疯狂 “攀爬”,不断富集和放大,尤其是在水生生态系统中,对生物的影响极为深远。一旦生物摄入 MeHg,它就像一个 “捣乱分子”,轻易穿过胃肠道被吸收,还能突破血脑屏障和胎盘,严重损害神经系统、心血管系统、生殖系统和免疫系统。许多地区,像巴布亚新几内亚的 Lake Murray、美国的佛罗里达大沼泽地,都深受汞污染之害,当地鱼类、野生动物以及依赖鱼类为食的人类,健康都受到了极大威胁。
面对汞污染这一严峻挑战,传统的生物修复技术,如微生物修复和植物修复,虽各有 “本领”,但都存在明显的短板。微生物难以接触到被困在其他生物体中的汞,植物则无法有效应对已经进入动物体内的汞,这使得汞污染的治理陷入了困境。

为了突破这一困境,来自澳大利亚麦考瑞大学(Macquarie University)等机构的研究人员勇敢地踏上了探索之旅。他们开展了一项极具创新性的研究,试图通过基因工程技术,赋予动物新的 “超能力”,使其能够高效地应对甲基汞的威胁。研究人员将目光聚焦在两种微生物酶 —— 有机汞裂解酶(MerB)和汞还原酶(MerA)上。他们设想,如果能让动物表达这两种酶,是否就能实现对甲基汞的有效转化和清除呢?带着这个疑问,研究人员进行了一系列实验。

研究人员运用了基因工程技术,将来自大肠杆菌的 MerA 和 MerB 基因,通过精心设计和操作,分别导入果蝇(Drosophila melanogaster)和斑马鱼(Danio rerio)体内。在果蝇实验中,研究人员对基因进行了密码子优化,使其更适合在果蝇中表达,并利用 PhiC31 介导的整合技术,将表达载体精准地整合到果蝇基因组的特定位置。对于斑马鱼,研究人员构建了双表达载体,借助 Tol2 转座酶介导的整合,让 MerA 和 MerB 基因成功在斑马鱼体内安家落户。为了检测这些工程动物对甲基汞的处理能力,研究人员开展了一系列严格的实验,包括生物富集实验、汞挥发实验和毒性实验等。

在昆虫汞生物修复实验中,研究人员发现,表达 MerA 和 MerB 的果蝇(Fly/EcMerA+B)在接触含有甲基汞的食物后,体内总汞含量比野生型果蝇(WT)减少了 83%,而且其体内 29% 的汞以 Hg2+的形式存在,而野生型果蝇中这一比例仅为 2%。通过测量 Hg0挥发量,研究人员进一步证实,Fly/EcMerA+B 能够将摄入的甲基汞转化为 Hg0并挥发出去,在 6 天的实验中,有 10% 的甲基汞被转化为 Hg0。此外,毒性实验表明,Fly/EcMerA+B 对甲基汞的毒性具有很强的抵抗力,即使在高浓度甲基汞环境下,其羽化率也不受明显影响,而对照组 Fly/Empty Vector 在高浓度甲基汞下羽化率大幅下降。

在鱼类汞生物修复实验中,研究人员同样取得了令人瞩目的成果。成年斑马鱼暴露在甲基汞环境中一段时间后,表达 MerA 和 MerB 的斑马鱼(Fish/EcMerA+B)体内总汞含量比对照组降低了 64%,且大部分汞以 Hg2+的形式存在。在对斑马鱼幼体的实验中,研究人员发现 Fish/EcMerA+B 幼体能够将 7% 的甲基汞转化为 Hg0挥发出去。同时,毒性实验显示,Fish/EcMerA+B 幼体对甲基汞的耐受性更强,在较高浓度甲基汞环境下,其存活率和游泳能力受影响程度明显小于野生型和对照组。

这项研究成果意义非凡。它首次证明了动物可以通过表达微生物酶来修复甲基汞污染,为生物修复领域开辟了全新的道路。通过工程改造动物,不仅能够减少污染场地的总汞含量,还能有效阻断甲基汞在食物链中的生物放大,保护高营养级生物免受汞毒性的危害。此外,动物体内产生的 Hg0,在不同的应用场景下都有妥善的处理方式,比如在封闭设施中可以通过通风系统捕获,在自然环境中则会被大气稀释,降低对生物的危害。而且,动物的转基因生物遏制技术已经相对成熟,这为该技术的实际应用提供了有力保障。

研究人员在这项研究中主要运用了基因工程技术,将外源基因导入动物体内;利用冷蒸汽原子荧光光谱结合金汞齐化汞预富集技术,精确测量汞的挥发量和含量;采用生物化学分析方法,对动物组织中的汞形态进行分析;还通过构建转基因动物模型,观察和评估工程动物对甲基汞的处理能力和抗性。

在研究结果部分,首先是昆虫汞生物修复。通过构建 Fly/EcMerA+B 果蝇模型,并进行生物富集、Hg0挥发和毒性实验,发现该果蝇模型能有效降低体内汞含量,将甲基汞转化为 Hg0挥发,且对甲基汞毒性具有抗性。其次是鱼类汞生物修复。构建 Fish/EcMerA+B 斑马鱼模型,经生物富集、Hg0挥发和毒性实验表明,该模型能减少体内汞积累,将甲基汞转化为 Hg0,并提高对甲基汞的耐受性。

在研究结论和讨论部分,研究人员成功证明了工程动物表达 MerA 和 MerB 酶能够有效转化甲基汞为挥发性 Hg0,显著降低动物组织中的汞含量,同时增强动物对汞毒性的抵抗力。这一成果为甲基汞污染的生物修复提供了新的策略和方向,有望应用于实际环境修复和有机废物处理。然而,未来还需要进一步研究更适合野外应用的物种,评估它们从各种污染食物源中提取甲基汞的能力,并进行全面的质量平衡核算。同时,对于转基因动物产生的 Hg0在不同环境中的归宿和影响,也需要深入探究,以确保该技术的安全性和有效性。总之,这项研究为解决甲基汞污染问题带来了新的希望和可能,为生态环境保护和人类健康保障做出了重要贡献。

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