富亮氨酸α 2糖蛋白的变化可作为溃疡性结肠炎内镜和组织学活动变化的标志

　　

在炎症性肠病（IBD）的研究领域，溃疡性结肠炎（UC）的病情监测与治疗一直是医学研究的重点。日本冈山大学医学、齿学和药学研究生院胃肠病学和肝病学系的 Yuki Aoyama、Sakiko Hiraoka 等研究人员，在《Scientific Reports》期刊上发表了题为 “Changes of leucine-rich alpha 2 glycoprotein could be a marker of changes of endoscopic and histologic activity of ulcerative colitis” 的论文。该研究为溃疡性结肠炎病情评估提供了新的视角和潜在的生物标志物，对于优化 UC 的临床管理具有重要意义。

研究背景

溃疡性结肠炎（UC）是一种病因不明的慢性、难治性炎症性肠病。目前，UC 的诊断依赖于临床评估以及血液学、内镜、组织学或影像学检查的综合判断。临床缓解一直是治疗的主要目标，但近年来，内镜下缓解（即内镜检查显示无黏膜炎症）被认为是更合适的治疗终点。然而，内镜检查频繁进行会给患者带来较大的身体和经济负担，因此，血清和 / 或粪便标志物作为替代方法，被广泛研究用于推断疾病活动度 。

血清 C 反应蛋白（CRP）、粪便钙卫蛋白（Fcal）和粪便免疫化学试验（FIT）等已被研究作为炎症标志物。粪便检测虽有用，但部分患者依从性较差。血液检测相对简便，但血清 CRP 在 UC 患者中的信息性并不总是可靠，难以判断轻度活动期或黏膜愈合情况。因此，寻找新的可靠血清标志物来推断 UC 疾病活动度迫在眉睫。

血清富亮氨酸 α2 糖蛋白（LRG）是从类风湿关节炎（RA）患者中通过蛋白质组学筛选获得的物质。与 CRP 不同，LRG 不仅由 IL-6 诱导，还可由其他促炎细胞因子诱导，且在肝脏以及局部炎症部位，如中性粒细胞、巨噬细胞、肝细胞和肠上皮细胞中均有表达。已有研究表明，血清 LRG 与 RA 疾病活动度的相关性比血清 CRP 更强，在 IBD 中，活动期 UC 患者的血清 LRG 水平也较高，因此 LRG 有望成为评估 UC 疾病活动度的新型血清标志物 。然而，LRG 在 UC 慢性病程中评估疾病活动度的最佳使用方式尚未确定，且之前缺乏基于内镜或组织学检查的客观评估。

研究材料与方法

患者选择

自 2015 年 11 月起，冈山大学医院对计划进行结肠镜检查的 UC 患者，在检查同时收集粪便和血清样本，以分析生物标志物与内镜 / 组织学活动的相关性。本研究纳入了 2015 年 11 月至 2021 年 11 月期间接受两次或更多次结肠镜检查并提供样本的患者。排除标准包括粪便收集不足、未能充分观察病变以及患有可能影响 LRG 和 CRP 血清水平的其他疾病（如肠外并发症、传染病、胶原病、原发性胆汁性胆管炎、心力衰竭或恶性肿瘤）的患者 。

评估指标

• 内镜疾病活动度评估：通过结肠镜检查时获取的结肠黏膜活动和病理活动来评估。采用 Mayo 内镜亚评分（MES）和溃疡性结肠炎内镜严重程度指数（UCEIS）对疾病活动度进行评估。MES 采用 4 分制（0 - 3 分），MES 0 - 1 定义为内镜改善，MES 2 - 3 定义为内镜活动期疾病；UCEIS 基于出血、溃疡 / 糜烂和黏膜模式三个成分进行评分，总分为 0 - 8 分。由两名独立的内镜专家在不参考病历和粪便、血清标志物结果的情况下进行评估。

• 病理评分：胃肠道病理学家使用 Geboes 评分对病理活动进行评分，Geboes 评分分为 0 - 5 级，组织学缓解定义为 Geboes 评分 < 2.1。活检标本取自内镜活动度最大的部位，缓解病例则分析直肠活检标本。若对每位患者进行多次活检，取最高评分用于分析。

• 血清和粪便样本检测：在结肠镜检查当天采集血液样本，检测血清 LRG 和 CRP 水平。血清 LRG 样本储存于 -80°C，使用 NANOPIA LRG 试剂盒检测；血清 CRP 在检查当天使用 NANOPIA CRP 试剂盒检测。患者需在结肠镜检查前 2 天内准备两份粪便样本，用于检测钙卫蛋白和 FIT。粪便钙卫蛋白（Fcal）在 BML 实验室使用荧光酶免疫分析法检测，FIT 在本机构使用 OC-Sensor DIANA 或 PLEDIA 系统检测。对于血红蛋白浓度 < 50 ng/mL 的粪便标本，本研究均按 50 ng/mL 处理 。

统计分析

使用 Spearman 秩相关检验确定血清 / 粪便标志物水平与 MES 或 Geboes 评分之间的相关性。采用 Fisher's z 变换分析相关系数的差异。通过受试者工作特征（ROC）分析评估血清 / 粪便标志物在内镜状态（MES 0 - 1 与 MES 2 - 3）和组织学状态（Geboes 评分 < 2.1 与 Geboes 评分≥2.1）之间的临界值，结果以曲线下面积（AUC）、敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）、阴性预测值（NPV）和准确性表示。双侧 p 值 < 0.05 被认为具有统计学意义。

研究结果

患者临床特征

研究期间共对 563 例 UC 患者进行了评估，其中 229 例患者注册，352 例进行了全结肠镜检查。79 例患者接受了多次结肠镜检查并提供了粪便 / 血清样本。这些患者中男性 40 例，女性 39 例，中位年龄 48.0 岁，中位发病年龄 36.4 岁，中位病程 9.8 年。疾病部位以广泛结肠炎为主（65.8%），其次为左侧结肠炎（27.8%）、直肠炎（5.1%）和右侧结肠炎（1.3%）。在分析内镜活动和生物标志物变化时，123 对结肠镜检查中，MES 0 有 51 例（41.4%），MES 1 有 35 例（28.5%），MES 2 有 28 例（22.8%），MES 3 有 9 例（7.3%）。两次结肠镜检查的间隔时间为 15.4 个月 。

MES 变化与生物标志物水平的相关性

在 123 次连续结肠镜检查间隔中，29 例 MES 值改善，63 例不变，31 例恶化。Spearman 秩相关分析显示，Fcal 与 MES 变化的相关系数 r = 0.50，p<0.0001；FIT 与 MES 变化的相关系数 r = 0.41，p<0.0001；LRG 与 MES 变化的相关系数 r = 0.42，p<0.0001；CRP 与 MES 变化的相关系数 r = 0.22，p = 0.013。LRG 与 CRP 相关系数的差异有统计学意义（p = 0.08），表明 LRG 与内镜活动变化的相关性明显强于 CRP。此外，基于首次结肠镜检查 MES 0 - 1 的 86 例患者，研究了各生物标志物内镜复发的临界值；但对于从 MES 2 - 3 改善到 MES 0 - 1 的情况，难以用生物标志物变化预测 。

Geboes 评分变化与生物标志物水平的相关性

由于 2 次结肠镜检查未获取活检标本，对 121 对病例进行病理分析。其中 45 对 Geboes 评分改善，36 对不变，40 对恶化。Spearman 秩相关分析显示，Fcal 与 Geboes 评分变化的相关系数 r = 0.39，p<0.0001；FIT 与 Geboes 评分变化的相关系数 r = 0.40，p = 0.028；LRG 与 Geboes 评分变化的相关系数 r = 0.40，p<0.0001；CRP 与 Geboes 评分变化的相关系数 r = 0.17，p = 0.06。LRG 与 CRP 相关系数的差异有统计学意义（p = 0.01），表明 LRG 与组织学活动变化的相关性明显强于 CRP 。

202 个时间点 MES 与粪便 / 血清标志物水平的相关性

在 123 对病例的 202 个时间点分析中，152 例（75.2%）结肠镜检查显示无或轻度内镜活动（MES 0 或 1）。Spearman 秩相关分析显示，Fcal 与 MES 的相关系数 r = 0.53，p<0.0001；FIT 与 MES 的相关系数 r = 0.62，p<0.0001；LRG 与 MES 的相关系数 r = 0.32，p<0.0001；CRP 与 MES 的相关系数 r = 0.25，p<0.001。ROC 分析显示，粪便标志物与内镜活动的相关性更强，诊断率更高，尤其是在判断内镜改善方面。LRG 判断内镜改善（MES 0 - 1）的临界值为 14.8 μg/mL 。

202 个时间点 Geboes 评分与粪便 / 血清标志物水平的相关性

Spearman 秩相关分析显示，Fcal 与 Geboes 评分的相关系数 r = 0.40，p<0.0001；FIT 与 Geboes 评分的相关系数 r = 0.27，p<0.0001；LRG 与 Geboes 评分的相关系数 r = 0.34，p<0.0001；CRP 与 Geboes 评分的相关系数 r = 0.18，p = 0.0094。表明 LRG 与组织学活动的相关性比 CRP 更强，LRG 判断组织学缓解（Geboes 评分 < 2.1）的临界值为 12.6 μg/mL 。

研究结论与讨论

本研究表明，在目前可用的血清生物标志物监测 UC 疾病活动度不够有效的情况下，两次连续结肠镜检查之间血清 LRG 的变化与内镜和组织学活动的变化显著相关。LRG 在与内镜和组织学活动变化的相关性方面与粪便标志物相似，但与 CRP 相比，LRG 与内镜活动变化的相关性更强，与组织学活动变化的相关性也显著更强，证实了 LRG 是一种非常有用的血清标志物。

与以往研究相比，本研究具有独特优势。其一，多数患者处于缓解期或轻度疾病状态，在门诊环境下验证了 LRG 在实际临床实践中的有效性；其二，对包括 FIT 在内的多种生物标志物与内镜和组织学结果进行了比较，而 FIT 在以往研究中未被充分关注。这些结果对于指导 UC 的临床实践具有重要意义 。

基于研究结果，研究人员提出了不同疾病活动度下生物标志物的使用建议。在诱导期高活动度（MES2 - 3）患者中，CRP 与 MES 的相关性比粪便标志物更强，但 LRG 在 CRP 可能为阴性而内镜仍有活动的情况下可能有用；在低疾病活动度（MES 1）患者中，血清 CRP 往往阴性，而 Fcal、FIT 和血清 LRG 检测可能有用，尤其是当粪便标志物因多种因素出现假阳性时，联合使用血清 LRG 变化和粪便标志物更有价值；在判断内镜缓解（MES 0）和评估 MES 0 的维持时，粪便标志物可能比血清 LRG 更有用，但当粪便标志物升高时，检测血清 LRG 变化有助于评估疾病活动度变化 。

然而，本研究也存在一定局限性。这是一项单中心研究，需要多中心研究进一步证实；患者选择存在偏倚，纳入的多为能多次进行全结肠镜检查、提供粪便样本且疾病活动度适合进行肠道准备的患者，炎症程度相对较低（MES 0 - 1）；结肠镜检查和生物标志物检查的间隔不固定；对粪便血红蛋白浓度 < 50 ng/mL 的标本处理方式可能影响数据准确性。

尽管存在局限性，该研究首次在真实临床实践中对比了血清 LRG、CRP 与粪便 Fcal、FIT 水平变化和内镜、组织学评分变化，为 UC 病情评估提供了新的思路和方法。血清 LRG 检测操作简便，仅需简单采血，有望在 UC 慢性病程管理中发挥重要作用，未来期待更多研究进一步验证其临床价值。