利用Bursaphelenchus mucronatus验证Beauveria bassiana对松材线虫的潜在杀线虫活性及其在活体条件下的应用价值

本研究针对松材线虫病（PWD）这一全球性森林威胁，创新性地采用非检疫性近缘种Bursaphelenchus mucronatus作为替代模型，验证了昆虫病原真菌Beauveria bassiana（B. bassiana）及其代谢产物beauvericin（BEA）对松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）的杀灭效果。通过构建"树-昆虫-线虫"病理系统模拟自然条件，证实B. bassiana不仅能抑制线虫繁殖，还能显著降低虫媒Monochamus galloprovincialis携带的线虫数量，为松材线虫病的综合治理提供了新型生物防治策略。

　　

松树林正面临着一场无声的入侵——松材线虫病（Pine Wilt Disease, PWD）。这种由松材线虫（Bursaphelenchus xylophilus）引发的毁灭性疾病，通过天牛属昆虫（Monochamus spp.）传播，已导致全球针叶林大面积死亡。在欧洲，自20世纪90年代葡萄牙首次发现疫情后，该病害已扩散至西班牙多个地区，被欧盟列为A2类检疫性有害生物。传统防治手段主要依赖砍伐病树和防控媒介昆虫，但针对线虫本身的生物控制策略仍存在空白。

西班牙巴利亚多利德大学可持续森林管理研究所（iuFOR）的研究团队另辟蹊径，选择松材线虫的近缘种Bursaphelenchus mucronatus（B. mucronatus）作为安全替代模型。这种非检疫性线虫与松材线虫形态和生物学特性高度相似，但致病性显著降低。研究人员通过体外和活体实验，系统评估了昆虫病原真菌Beauveria bassiana（B. bassiana）EABps 11/01-Mg菌株的杀线虫潜力，相关成果发表在《Annals of Forest Science》上。

研究采用三项关键技术：体外培养实验比较两种线虫对B. bassiana及其毒素beauvericin（BEA）的敏感性；商业BEA处理验证特异性杀线机制；创新性构建人工蛹室系统模拟"松树-天牛-线虫"自然病理环境。实验样本包括从西班牙莱昂地区采集的Monochamus galloprovincialis幼虫和实验室培养的线虫种群。

体外实验揭示高度一致性

通过比较B. xylophilus和B. mucronatus在含B. bassiana培养基中的生长状况，发现两者均出现近乎100%的死亡率（89.0% vs 98.5%）和繁殖完全抑制。商业BEA处理也显示相似趋势，两种线虫校正死亡率分别达44.1%和36.4%，并观察到特征性的褐色"包裹"现象，证实B. mucronatus可作为松材线虫研究的可靠替代模型。

活体系统验证防治潜力

研究人员设计的人工蛹室实验首次将B. bassiana引入"树-虫-线虫"系统。结果显示，经真菌处理的昆虫体内活线虫数量（267条/个体）较对照组（691条/个体）减少61.4%，证实B. bassiana不仅能杀灭游离线虫，还能显著降低媒介昆虫的线虫携带量。

这项研究具有双重突破意义：在方法学层面，建立了基于B. mucronatus的安全实验体系，规避了检疫性病原的操作风险；在应用层面，证实B. bassiana EABps 11/01-Mg菌株可作为"一箭双雕"的生物防治剂——既能控制媒介天牛（此前野外试验已证实其使后代减少53%），又能抑制线虫种群。该发现为构建包含信息素诱捕、自动感染装置和真菌制剂的PWD综合管理系统提供了关键科学依据，尤其适用于疫情已定殖地区的长期防控。未来研究可进一步优化真菌施用方式，评估不同森林生态系统中的实际防治效果。