通过破坏自噬，RAGE和TLR4的共抑制使小鼠胰腺癌对不可逆电穿孔敏感

为解决胰腺癌不可逆电穿孔（IRE）治疗后因自噬激活导致的肿瘤复发问题，研究人员开展了一项关于HMGB1介导自噬在IRE后残存癌细胞中的作用及其干预策略的研究。结果表明，通过纳米药物抑制HMGB1-RAGE/TLR4轴可显著增强IRE疗效，延长动物生存期。该研究为胰腺癌局部治疗提供了新的思路，值得相关领域科研人员关注。

　　

摘要

不可逆电穿孔（IRE）是一种针对胰腺癌患者的局部消融治疗方式。在IRE过程中，高强度电脉冲被释放到肿瘤内部，以破坏细胞膜并诱导细胞死亡。由于肿瘤微环境可能会降低脉冲电场（PEF）的强度，一些癌细胞可能会受到亚致死性PEF的影响并存活下来，从而导致肿瘤复发。已知由抗癌疗法诱导的自噬激活会促进治疗耐受性。在本研究中，我们调查了IRE后残存癌细胞中是否激活了自噬，并评估了其在肿瘤复发过程中所起的作用。建立了KPC-A548或Panc02小鼠胰腺癌细胞系的皮下异种移植小鼠模型；当肿瘤在某一维度达到7毫米时，对荷瘤小鼠进行IRE治疗。对于体外亚致死性PEF处理，胰腺癌细胞悬浮液直接与电极接触，并在室温下进行脉冲处理。我们发现，存活的残存细胞中激活了自噬，表现为LC3和p62表达增加。通过使用羟氯喹啉（60?mg/kg，每日腹腔注射）抑制自噬，显著提高了IRE的疗效。我们证明，自噬激活可归因于高迁移率族蛋白1（HMGB1）表达增加；同时抑制HMGB1的两个受体——晚期糖基化终末产物受体（RAGE）和Toll样受体4（TLR4），通过上调PI3K/AKT/p70核糖体S6蛋白激酶（p70S6K）轴抑制自噬激活，并使胰腺癌细胞对PEF敏感。我们制备了一种聚合物胶束制剂（M-R/T），包裹了RAGE和TLR4的抑制剂。IRE与M-R/T（相当于RAGE抑制剂10.4?mg/kg和TLR4抑制剂5.7?mg/kg，每两天静脉或腹腔注射一次）的联合使用，在胰腺肿瘤模型中显著促进了肿瘤细胞凋亡，抑制了细胞周期进程，并延长了动物的生存时间。本研究表明，通过纳米药物破坏HMGB1介导的自噬是一种有望增强胰腺癌对IRE反应的策略。