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为解决超分辨率显微镜难以确定生物分子直接相互作用的问题,研究人员开展 FRETsael 技术相关研究。结果显示该技术定位精度达 20 - 30nm,能研究多种生物分子相互作用。推荐阅读,一起探索生物分子研究新突破。
摘要
超分辨率光学显微镜技术有助于观察纳米级的生物分子,这些生物分子比光的衍射极限小 1 - 2 个数量级。利用超分辨率显微镜技术,能够观察到两个距离相近的生物分子发出的荧光,但不一定能确定它们之间存在直接相互作用。通过荧光共振能量转移敏化受体发射定位技术(FRETsael),我们可以从双色荧光寿命成像数据中,以纳米级精度定位发生荧光共振能量转移(FRET)的生物分子相互作用。我们首先通过模拟实验对 FRETsael 的概念进行了验证,在对 FRET 对的真阳性检测中,恢复的定位精度可达 20 - 30 纳米。对模拟结果的进一步分析揭示了真阳性率达到最高时的条件。随后,我们展示了 FRETsael 在肌动蛋白 - 纽蛋白、内质网 - 核糖体相互作用的模拟样本,以及肌动蛋白 - 肌球蛋白双色共聚焦成像实验样本中的应用能力。总体而言,FRETsael 方法为从激光扫描共聚焦双色荧光寿命成像中,以更高的空间分辨率研究生物分子相互作用开辟了道路。