解锁水稻 “食味密码”:多组学解析 ECQ 调控网络与 GLB1 基因新功能

【字体: 时间:2025年02月21日 来源:Plant Communications 9.4

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  为解决水稻食用和烹饪品质(ECQ)遗传调控机制不明的问题,韩国公州国立大学等单位的研究人员开展相关研究。他们构建 ECQ 调控网络,明确 GLB1 基因功能。该研究为水稻精准育种提供依据,推荐阅读。

  

探寻水稻美味密码:转录组学与基因组学携手揭秘


水稻,作为全球数十亿人的主食,它的口感和烹饪特性可是备受关注。想象一下,一碗热气腾腾的米饭,口感软糯适中、香气扑鼻,那该多诱人。可不同品种的水稻,在吃和煮的品质上差异巨大。这背后的 “神秘力量” 究竟是什么呢?这就不得不提到影响水稻口感的关键因素 —— 淀粉。淀粉的理化性质,像直链淀粉含量、糊化温度等,对水稻的烹饪和食用品质起着决定性作用。比如,直链淀粉含量会影响淀粉的凝胶形成能力,进而改变米饭的质地;糊化温度则决定了煮米饭时需要的火候和时间。

过去,科学家们为了搞清楚水稻品质的遗传奥秘,做了不少努力。他们发现了一些和淀粉合成相关的基因,也找到了许多与水稻品质性状有关的数量性状位点(QTL) 。然而,这些研究就像拼图一样,虽然找到了不少碎片,但还没能拼成完整的图案。复杂性状中的连锁不平衡(LD)问题,就像一把锁,限制了科学家们全面解释潜在单核苷酸多态性(SNP)和相关基因对性状的影响。简单来说,LD 会让多个 SNP “捆绑” 在一起,使得在全基因组关联研究(GWAS)中,很难准确找到真正影响性状的基因,就像在一堆乱麻里找一根特定的线,困难重重。所以,建立起基因组变异、转录表达和表型差异之间的直接联系,成了揭开水稻品质遗传密码的关键,这也是科学家们开展这项研究的重要原因。

为了攻克这些难题,来自韩国公州国立大学等多个单位的研究人员,在《PLANT COMMUNICATIONS》期刊上发表了一篇名为 “Integrative transcriptogenomic analyses reveal a regulatory network of rice eating and cooking quality and unveil a role of alpha - globulin in modulating starch and sucrose metabolism” 的论文。研究人员通过整合多组学数据,构建调控网络,发现了 α - 球蛋白(GLB1)与淀粉和蔗糖代谢之间的联系,还通过基因编辑验证了 GLB1 对水稻食用和烹饪品质(ECQ)的重要作用。这一研究为精准育种提供了理论依据,就像为培育更优质的水稻品种点亮了一盏明灯,让人们离美味又营养的水稻更近了一步。

在这项研究中,研究人员运用了多种先进的技术方法。他们对 84 份粳稻品种进行了全基因组重测序,就像给每个水稻品种做了一次详细的 “基因体检”,获取了大量的基因信息。同时,进行转录组分析,在水稻灌浆的关键时期(15 天)采集样本,了解基因的表达情况,看看哪些基因在这个时候 “活跃” 起来。还利用转录组全基因关联研究(TWAS),将基因表达数据和表型数据相结合,寻找与水稻 ECQ 性状相关的转录本。另外,通过加权基因共表达网络分析(WGCNA),构建基因共表达网络,挖掘基因之间的潜在关系。最后,运用 CRISPR/Cas9 基因编辑技术,对感兴趣的基因进行 “修改”,验证其功能。

下面我们一起来看看研究人员通过这些技术都发现了什么吧。

1. 表型变异和相关性分析


研究人员对 84 份粳稻品种的 ECQ 性状进行了测定,发现这些性状存在很大差异。就像一场 “水稻品质大比拼”,不同品种的水稻在各项指标上各显神通。直链淀粉含量在 10.7% - 26.7% 之间波动,蛋白质含量也从 5.7% 到 14.1% 不等,粘度参数更是变化多样。而且,大多数性状都呈现正态分布,这表明多个基因参与了这些性状的调控,就像一场多基因的 “协同作战”。研究人员还发现,不同 ECQ 性状之间存在复杂的相关性。比如,直链淀粉含量与峰值粘度(PV)、热浆粘度(HPV)和破损粘度(BD)呈显著负相关,这意味着直链淀粉含量高的水稻,PV、HPV 和 BD 的值可能较低。而蛋白质含量与 PV 和 BD 呈显著负相关,与糊化温度(PTemp)和回生值(SB)呈显著正相关。这些相关性就像一张无形的网,将各个性状紧密联系在一起。

2. 转录组分析与 ECQ 性状关联


为了找出与 ECQ 性状相关的转录本,研究人员进行了转录组全基因关联研究。这就像是在基因的 “大仓库” 里仔细筛选,最终找到了 285 个与 ECQ 性状显著相关的转录本。其中,有些转录本只与一个性状相关,而有些则与多个性状 “挂钩”,比如 Os06t0687100 - 01 和 Os04t0560700 - 01 这两个转录本,就与直链淀粉含量、糊化温度、峰值粘度和蛋白质含量都有关系。在这些转录本中,很多都已经知道了功能,像淀粉生物合成途径基因 GBSS1,它与直链淀粉含量和一致性粘度(CS)密切相关;还有一些基因,如参与氨基酸生物合成的基因,也与蛋白质含量有关。另外,研究人员还发现了一些转录因子,它们就像基因表达的 “指挥官”,可以调节淀粉合成相关基因的表达。

3. 全基因组 eQTL 定位


研究人员利用 GWAS 技术,以 285 个与 ECQ 性状相关的转录本为 “线索”,寻找影响它们表达的遗传变异,也就是 eQTL(表达数量性状位点)。结果发现了 66,905 个 eQTL,其中 21,747 个是本地 eQTL,45,158 个是远端 eQTL。染色体 4、6 和 7 上的 eQTL 数量较多,形成了 “热点区域”,这些区域可能藏着调控水稻品质的关键基因。研究人员还发现,本地 eQTL 对基因表达的调控作用更强,就像本地的 “小领导”,对自己 “管辖” 的基因表达有着更直接的影响。同时,他们也找到了一些之前报道过的影响 ECQ 性状相关转录本表达的位点,进一步验证了研究的可靠性。

4. ECQ 相关转录本的共表达分析


为了深入了解基因之间的相互作用,研究人员构建了 ECQ 相关转录本的共表达网络。他们发现了 2,202 个与 ECQ 相关转录本共表达的基因,其中一些基因被认为是潜在的 “主控基因”,就像乐队的指挥,对整个网络的运作起着关键作用。而且,很多共表达网络与多个 ECQ 性状相关,比如 Network_81 和 Network_82,它们与 8 个 ECQ 性状都有联系。研究人员还特别关注了 GBSS1 基因,发现它与 15 个基因相互连接,其中 7 个受 eQTL 调控,这进一步说明了基因之间相互作用的复杂性。

5. GLB1 基因的遗传多样性分析


研究人员对 GLB1 基因进行了深入研究,发现它在不同生态型的水稻中存在丰富的遗传多样性。野生型水稻的核苷酸多样性最高,籼稻群体的多样性比粳稻群体更大。通过分析,还发现了 26 种不同的单倍型,其中一些单倍型是籼稻特有的,一些是野生稻特有的,还有一些在栽培稻和野生稻中都存在。单倍型 - 表型关联分析表明,不同的 GLB1 单倍型对 ECQ 性状有显著影响。比如,Hap_2 单倍型的直链淀粉含量、蛋白质含量、一致性粘度和回生值都显著较高。这就像是不同版本的 GLB1 基因,各自 “掌控” 着不同的水稻品质特征。

6. GLB1 基因的功能验证


研究人员通过 CRISPR/Cas9 技术对 GLB1 基因进行编辑,获得了两个突变体 glb1 - 1 和 glb1 - 2。观察发现,突变体种子的外观发生了变化,很多呈现出不透明或半透明的表型,就像给种子换了一件 “外衣”。在微观层面,淀粉颗粒的形态和排列也与野生型有很大差异,突变体的淀粉颗粒变得不规则、松散。而且,种子贮藏蛋白的组成也改变了,球蛋白含量降低,谷蛋白和 13kDa 醇溶蛋白含量升高。同时,突变体的直链淀粉含量显著降低,粘度参数也发生了变化,这表明 GLB1 基因对水稻的 ECQ 性状有着重要的调控作用。

综合研究结果和讨论部分,这项研究意义非凡。研究人员通过整合多组学数据,构建了水稻 ECQ 性状的调控网络,揭示了 GLB1 基因在调节淀粉和蔗糖代谢中的重要作用。这不仅让我们对水稻品质的遗传调控有了更深入的理解,也为精准育种提供了有力的支持。在未来,育种家们可以根据这些研究成果,精准地选择和改良水稻品种,培育出更符合消费者口味的优质水稻。比如,针对韩国消费者喜欢的软糯口感、低直链淀粉含量的水稻品种,育种家们可以利用这些遗传信息,更快地培育出理想的品种。而且,研究中发现的 GLB1 基因的不同单倍型和功能变化,还为培育具有特殊营养品质的水稻提供了可能,像为肾脏病患者或需要低易消化蛋白饮食的人群,开发合适的水稻品种。这项研究为提高水稻品质、满足人们对优质水稻的需求开辟了新的道路,就像为水稻育种领域打开了一扇充满希望的大门。

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