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为探究Anaplasma spp. 在蜱虫中的传播及建立预警系统，韩国研究人员开展了对韩国地区蜱虫的研究。结果发现A. phagocytophilum存在经卵传播现象。该研究为防控蜱传疾病提供依据，值得科研读者一读。
在自然界中，蜱虫就像一个个隐藏在暗处的 “小恶魔”，给人类和动物的健康带来了不小的威胁。长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）原产于东亚国家，如今在澳大利亚、新西兰、美国等地也有它们的踪迹。在韩国，长角血蜱是最常见的蜱虫种类，紧随其后的是黄血蜱（Haemaphysalis flava）。这些蜱虫可不是 “吃素” 的，它们能携带和传播多种病原体，像嗜吞噬细胞无形体（Anaplasma phagocytophilum）、牛无形体（Anaplasma bovis） 、查菲埃立克体（Ehrlichia chaffeensis）等，给人和动物带来各种疾病。
其中，嗜吞噬细胞无形体是一种特别厉害的人畜共患病原体，它能感染哺乳动物宿主的粒细胞性白细胞，引发人类粒细胞无形体病。在韩国，15.6 - 18.8% 的户外狗都曾接触过这种病原体。感染后的狗狗会变得没精神、不爱吃东西，还可能出现跛行、咳嗽等症状。而且，蜱虫的幼虫阶段特别小，体长只有 0.58 - 0.62 毫米，宽 0.47 - 0.51 毫米 ，它们大量聚集在孵化地附近，人们很难发现它们，可就是这些小小的幼虫，却能让宿主暴露在多种蜱传病原体的威胁之下。
尽管蜱虫带来的危害不小，但关于无形体属（Anaplasma spp.）的经卵传播情况，人们了解得还十分有限。为了填补这一知识空白，也为了建立全国性的蜱虫发育阶段和蜱传人畜共患病原体季节性变化的预测和警报系统，韩国的研究人员开展了一项重要研究。他们的研究成果发表在《Parasites & Vectors》期刊上，论文题目是 “Prevalence of Anaplasma spp. in questing larvae of Haemaphysalis spp. ticks in South Korea”。这项研究最终发现，在野外条件下，嗜吞噬细胞无形体可以在血蜱属幼虫中经卵传播，这一发现意义重大，为后续防控蜱传疾病提供了关键依据。
研究人员在 2021 年 3 月到 10 月以及 2022 年 3 月到 10 月期间，从韩国 149 个地点收集了 36912 只未进食、正在寻觅宿主的血蜱属蜱虫。他们采用的是 “旗布法”，用一块 100×100 厘米的白色法兰绒布在草本植被上收集蜱虫。收集到蜱虫后，研究人员通过立体显微镜和分类学关键特征，依据形态学特点来鉴定蜱虫的发育阶段和种类。由于幼虫阶段的长角血蜱和黄血蜱在形态上难以区分，所以幼虫只能鉴定到属的级别。之后，研究人员把蜱虫按照种类、发育阶段、调查时期和采集地点进行分组，其中若虫每 1 - 10 只为一组，幼虫每 1 - 50 只为一组，成虫则单独进行检查。
在检测蜱虫是否携带无形体属 DNA 时，研究人员先用试剂盒提取蜱虫的基因组 DNA，然后通过巢式聚合酶链反应（Nested PCR）来扩增 16S rRNA 基因，以此检测是否存在无形体属。同时，他们设置了阳性对照和阴性对照，保证实验结果的准确性。最后，研究人员把 PCR 检测呈阳性的产物送去测序，再通过序列比对和系统发育分析，确定蜱虫携带的无形体种类，并分析它们之间的亲缘关系。
研究人员一共收集了 36912 只蜱虫，发现幼虫的数量最多，占比达到 54.1%，但因为前面提到的原因，幼虫无法准确鉴定到种。若虫和成虫中，长角血蜱有 13082 只（占 35.4%），黄血蜱有 3850 只（占 10.4%），长角血蜱明显占优势。从季节分布来看，长角血蜱的若虫和成虫主要出现在 4 月到 7 月，若虫在 5 月达到高峰，成虫在 7 月达到高峰；黄血蜱的若虫和成虫则在 3 月到 6 月出现，3 月是高峰期。整体上，3 月到 7 月若虫数量居多，7 月到 10 月则是幼虫数量占优，成虫数量相对较少，7 月采集到的成虫数量最多。
在检测无形体属感染情况时，研究人员选取了约三分之一（13118 只）的蜱虫进行 PCR 分析，这些蜱虫被分成 939 组。结果发现，有 24 组（2.6%）检测出无形体属阳性。其中，幼虫阶段阳性组数最多，有 16 组（1.7%） ，若虫有 7 组（0.7%），成虫仅有 1 组（0.1%）。阳性样本主要集中在忠南和忠北省，分别有 9 组，全南和全北省相对较少。而且，无形体属阳性组的出现时间和蜱虫各发育阶段的出现时间相吻合，9 月阳性组出现的峰值和幼虫活动的高峰期一致。
经过系统发育分析，24 个无形体属阳性组中，有 21 组含有嗜吞噬细胞无形体特异性基因，2 组是牛无形体，还有 1 组是未确定种的无形体（Anaplasma sp.）。这 21 组嗜吞噬细胞无形体的序列紧密聚集在一起，和之前从韩国水鹿身上分离出的序列很相似，但和之前报道的其他参考菌株（如 Webster、HGE2、HZ 和 Dog2）距离较远。进一步分析发现，从幼虫中分离出的 16 组嗜吞噬细胞无形体序列相似度非常高。
研究结果显示，韩国西南部地区的长角血蜱和黄血蜱的季节性分布，和之前在韩国其他地区以及美国的研究结果一致。这说明这些地区蜱虫的生活周期遵循相似的季节性规律，韩国的自然环境为这两种蜱虫提供了适宜的生存条件。
研究还发现，血蜱属幼虫携带的无形体病原体数量，比若虫和成虫都要多。虽然成虫的最低感染率（MIR）数值上比幼虫高，但考虑到幼虫数量庞大以及嗜吞噬细胞无形体存在经卵传播的情况，幼虫在韩国嗜吞噬细胞无形体的传播中，扮演着非常重要的角色。
若虫的最低感染率比幼虫低，这可能和很多因素有关。比如，不同发育阶段的蜱虫宿主偏好不同，宿主的感染状态也会影响蜱虫的感染率。另外，本次研究中成虫样本量较少，这或许可以解释为什么在之前的研究中能在成年长角血蜱中检测到嗜吞噬细胞无形体，而本次研究却没有发现。
研究人员从血蜱属蜱虫中分离出的 21 个嗜吞噬细胞无形体特异性序列虽然聚集在一起，但和之前从人或狗身上分离出的参考菌株有一定差异。由于这些序列是从草本植被上的蜱虫中分离得到的，所以推测这些嗜吞噬细胞无形体可能主要来源于野生动物。
在韩国，7 月到 10 月能检测到携带无形体的幼虫，9 月是高峰期。这就意味着在这段时间，韩国民众感染无形体的风险增加。而且，这种季节性风险和韩国的恙虫病（由恙虫幼虫传播）很相似，所以在秋季进行户外活动时，需要同时防范无形体病和恙虫病。
本次研究有力地证明了嗜吞噬细胞无形体可以从雌性血蜱属蜱虫经卵传播给幼虫，因为收集的幼虫都是从植被上获取的，并未寄生在宿主动物身上。同时，研究还发现了牛无形体，这也凸显了经卵传播在蜱传疾病中的重要性，无论是对兽医领域还是医学领域都有重要意义。
之前的研究表明，韩国户外狗中嗜吞噬细胞无形体的血清阳性率较高，但幼虫蜱虫在其中的传播作用还不明确。不过，考虑到幼虫蜱虫体型小、分布广泛，这或许可以解释为什么狗狗的感染率会这么高。
总的来说，这项研究为我们深入了解韩国血蜱属蜱虫中无形体属的流行情况和传播动态提供了宝贵信息。研究发现的经卵传播现象，在蜱传病原体的流行病学中意义重大。它提醒我们，必须采取积极措施来降低蜱传疾病的风险。比如，我们要提高人们对蜱传疾病的认识，尤其是幼虫蜱虫带来的风险；针对毛发较长的动物，要加强预防措施，因为幼虫蜱虫很难被发现。另外，建立全国性的预测和警报系统也非常必要，通过监测蜱虫发育阶段和蜱传人畜共患病原体的季节性变化，我们就能及时采取防控措施，保护人类和动物的健康，让大家远离蜱传疾病的威胁。
