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为解决 HD 术前诊断中直肠活检和 AchE 染色最佳时机不明确的问题，日本三重大学研究人员开展相关研究，发现出生 3 周后活检诊断准确率更高。该研究为临床诊断提供重要参考，推荐科研读者一读。
在医学的广阔领域中，有一种疾病一直牵动着医生和家长们的心，那就是先天性巨结肠（Hirschsprung disease，HD）。这可不是一种普通的疾病，它就像一个隐藏在宝宝身体里的 “小恶魔”，如果不能及时发现并治疗，会引发一系列严重的问题。比如严重的小肠结肠炎、中毒性巨结肠，甚至肠道穿孔，这些并发症对于脆弱的小生命来说，每一个都可能是致命的打击。
而且，一旦在术前就出现了肠炎，这还会成为术后先天性巨结肠相关性小肠结肠炎（Hirschsprung disease - associated enterocolitis，HAEC）发生的危险因素。不仅如此，HAEC 还会影响宝宝术后的肠道功能，让他们未来的生活质量大打折扣。所以，对于先天性巨结肠，早诊断、早治疗是关键中的关键。
目前，先天性巨结肠的术前诊断主要依靠直肠黏膜活检和乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase，AchE）染色，这几乎已经成为了诊断的 “金标准”。但是，这里面却存在一个让人头疼的问题 —— 什么时候进行这些检查才最合适呢？要知道，对于早产儿、新生儿，还有那些全结肠无神经节细胞症的患儿来说，AchE 染色常常会给出错误的阴性结果。这是因为宝宝们刚出生时，体内的 AchE 染色还不够充分，就好像小树还没长大，枝叶不够繁茂，没办法准确判断它的品种一样。而且，即使第一次染色结果是阴性，但如果从临床症状来看，高度怀疑是先天性巨结肠，那就得再做多次直肠活检和 AchE 染色。可这又带来了新的风险，直肠活检可能会导致直肠穿孔、出血，特别是对于新生儿和小婴儿，他们的身体那么娇嫩，这些风险就更高了。
为了解决这个困扰医学界的难题，日本三重大学（Mie University）的研究人员展开了深入的探索。他们的研究成果发表在了《BMC Pediatrics》期刊上，论文题目是《Optimal timing of rectal mucosal biopsy and acetylcholinesterase staining for the diagnosis of Hirschsprung disease》 。经过一番努力，他们得出了一个重要的结论：宝宝出生 3 周后进行直肠黏膜活检，对先天性巨结肠的诊断准确率会更高。这个结论就像是黑暗中的一盏明灯，为医生们的诊断工作指明了方向。
那么，研究人员是怎么得出这个结论的呢？他们用到了几个关键的技术方法。首先，通过回顾性收集数据，他们把 2008 年 1 月到 2024 年 4 月在三重大学医院接受先天性巨结肠根治手术的患者资料都找了出来。然后，对这些患者的直肠活检情况进行详细审查，包括多次活检的样本都不放过。最后，利用专业的统计软件 JMP Pro 16 对数据进行分析，通过建立受试者工作特征（ROC）曲线等方法，来确定 AchE 染色呈阳性的最佳时间。
接下来，咱们看看具体的研究结果。
1. 患者招募和直肠活检情况总结
一开始有 57 个确诊先天性巨结肠的孩子，但研究人员经过筛选，排除了那些年龄大于 1 岁，还有第一次手术就做了结肠造口术的孩子，最后 36 个孩子被纳入了研究。在这 36 个孩子中，有 15 个需要进行多次直肠活检。研究总共进行了 52 次直肠活检，第一次活检的诊断率是 58.3%，第二次活检的诊断率就提高到了 93.3%。这些孩子中，大部分是男孩，有 31 个，女孩有 5 个。他们接受根治手术时的年龄、胎龄、出生体重等也都有详细的记录。
2. AchE 结果与直肠活检时年龄的关系
研究人员发现，根据 AchE 染色结果，能诊断出先天性巨结肠（阳性）的活检时的年龄，要比不能诊断出（阴性）的孩子大，而且差异还很明显。这就好像在说，随着宝宝年龄的增长，用这种方法诊断先天性巨结肠就更靠谱了。
3. AchE 阳性时年龄的 ROC 曲线分析
通过绘制 ROC 曲线进行分析，研究人员得到了一些关键的数据。诊断先天性巨结肠的最佳时间，也就是截断值是 21 天。而且，在这个时间点进行诊断，敏感性是 77.8%，特异性是 75%，曲线下面积是 71.9%。这些数据虽然有点专业，但简单来说就是，21 天这个时间点对于诊断先天性巨结肠很重要。
4. 直肠活检年龄≤3 周和＞3 周时阳性和假阴性诊断率的比较
研究人员根据 ROC 分析的结果，把孩子分成了两组，一组是活检时年龄≤3 周的，另一组是＞3 周的。结果发现，≤3 周的孩子假阴性率高达 69.2%，诊断准确率只有 30.8%；而＞3 周的孩子假阴性率就低多了，只有 12.5%，诊断准确率能达到 87.5%。这就像在告诉大家，3 周这个时间点就是个 “分水岭”，3 周之后进行活检，诊断的准确性大大提高。
从研究结论和讨论部分来看，这次研究意义非凡。这是首次专门分析直肠黏膜活检和 AchE 染色诊断先天性巨结肠最佳时间的研究。之前也有一些相关研究，但都没有像这次一样用统计方法来准确计算最佳时间。这次研究通过严谨的统计分析，明确了出生 3 周后进行直肠黏膜活检和 AchE 染色，能提高诊断的准确性，减少不必要的活检次数。这对于临床医生来说，是非常实用的信息。在日常诊断工作中，医生们不用再纠结什么时候给宝宝做活检最合适，按照这个研究结果来操作，能更准确地判断宝宝是否患有先天性巨结肠，从而及时进行治疗。
不过，这个研究也有一些小遗憾。比如没有和新的染色方法，像用钙视网膜蛋白（calretinin）进行免疫染色的方法作比较，不同染色方法的最佳活检时间可能不一样。而且，研究没有纳入那些活检后 AchE 一直呈阴性的患者，所以 3 周后活检阴性能不能排除先天性巨结肠还不清楚。另外，由于研究的患者数量比较少，还是回顾性研究，证据等级不是特别高。但这并不影响这次研究的价值，它就像一颗 “种子”，为后续的研究指明了方向。研究人员也建议，未来可以开展前瞻性、多中心的研究，招募更多的患者，这样就能得到更有说服力的数据。
总之，这项研究为先天性巨结肠的诊断带来了新的思路和依据，虽然还有一些需要完善的地方，但它就像一盏照亮前路的灯，让我们在攻克先天性巨结肠诊断难题的道路上又前进了一大步。相信在未来，随着研究的不断深入，先天性巨结肠的诊断和治疗会越来越精准，更多的宝宝能远离这个疾病的困扰，健康快乐地成长。
