解锁田野独行菜驯化密码:QTL 定位助力新油 crop 崛起

【字体: 时间:2025年02月25日 来源:BMC Plant Biology 4.3

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  为解决田野独行菜(Lepidium campestre)驯化难题,研究人员开展其驯化相关性状 QTL 定位研究。他们构建图谱、识别 QTL,明确性状关联。该成果为加速其驯化和改良提供关键依据,强烈推荐科研读者阅读。

  
在农业的大舞台上,随着气候不断变化,传统的少数栽培植物及其野生亲戚所蕴含的遗传多样性,渐渐有些 “力不从心” 了。它们没办法很好地应对气候变化带来的挑战,想要继续提高农作物产量、拓展新的种植区域,或是满足人们对作物新品质的需求,变得越来越困难。于是,科学家们把目光投向了那些具有优良性状的新植物物种,期望通过驯化它们,为农业发展注入新的活力。

田野独行菜(Lepidium campestre)就是这样一位备受瞩目的 “潜力选手”。它属于十字花科,有着诸多令人心动的优点:超强的耐寒能力,即便在寒冷的冬天也能茁壮成长;较高的种子产量,能为人们带来可观的收获;可以自花授粉,这在繁殖上可太方便啦;还有一个小小的基因组,研究起来也相对容易。不仅如此,它还能作为覆盖作物(catch crop,一种在主作物生长间隙种植,用于减少土壤侵蚀、防止养分流失等的作物),守护土壤健康,减少水土流失和养分淋失,同时提高其他作物的产量。它的种子能产出用于工业的油,植株还能当作饲料里的蛋白质来源,简直浑身是宝!而且,田野独行菜与模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)关系亲近,两者的染色体存在保守的共线性,这就为研究提供了不少便利。

不过,驯化一种新作物可不是一件轻松的事儿。它需要耗费大量的时间、人力和金钱,因为要改善的 “驯化综合征” 相关性状(包括作物活力、生产力等多种特征)实在太多啦。所以,找到高效又经济的育种技术,来加速像田野独行菜这样新作物的驯化进程,就成了科学家们的当务之急。

此前,虽然已经有一些关于田野独行菜的研究,比如发现了一些调控驯化相关性状的基因多态性,也开发出了不定芽再生、转化以及基因编辑等技术,但对于控制其驯化目标性状的数量性状基因座(QTL,Quantitative Trait Locus,指控制数量性状的基因在基因组中的位置)和遗传标记,人们了解得还非常有限。而 QTL 定位对于剖析复杂性状的遗传基础至关重要,找到与目标性状相关的 QTL,就像找到了开启作物改良大门的钥匙,能为新育种技术提供精准的目标,还能帮助开发标记辅助选择(MAS,Marker-Assisted Selection,利用与目标性状紧密连锁的遗传标记,辅助选择具有目标性状的个体)技术,从而加速育种进程。可由于缺乏相关知识,MAS 技术在田野独行菜的研究中一直无法施展拳脚。此外,确定与驯化相关性状相关的单核苷酸多态性(SNP,Single Nucleotide Polymorphism,指在基因组上单个核苷酸的变异)标记,对于推动田野独行菜的基因组研究、加快驯化进程也极为关键。

为了解决这些问题,研究人员在《BMC Plant Biology》期刊上发表了题为 “Identification of quantitative trait loci for domestication-related traits in field cress (Lepidium campestre) using bi-parental mapping populations” 的论文。他们通过研究,成功构建了遗传连锁图谱,找到了与田野独行菜关键驯化性状相关的 QTL,这为加速田野独行菜的驯化和改良奠定了坚实的基础,就像为未来的农业发展点亮了一盏明灯。

在这项研究中,研究人员主要运用了以下几种关键技术方法:

  • 构建 F?代作图群体:精心培育了三个 F?代作图群体(MP1、MP2 和 MP3),这些群体的亲本各具特点,比如 MP1 的亲本中,LP - 92 - 1具有高种子休眠和抗荚裂的特性,而Trell - 1则表现为低种子休眠和高荚裂敏感性 。通过这些具有性状差异的亲本杂交,为后续研究性状遗传规律提供了丰富的材料。
  • 基因分型与测序:运用靶向基因分型测序(GBS,Genotyping - by - Sequencing)方法中的 SeqSNP 技术,对 9378 个 SNP 进行基因分型。这一技术就像是给基因做 “身份鉴定”,能精准识别不同个体的基因差异。研究人员利用 Illumina NextSeq 500 平台进行测序,获得了大量的数据,为后续分析提供了有力支持。
  • QTL 定位分析:使用 R/qtl 等软件,采用非参数区间作图和多 QTL 区间作图等方法进行 QTL 定位。这些方法能帮助研究人员在复杂的基因组中,精准定位与目标性状相关的 QTL,就像在茫茫大海中找到隐藏的宝藏。

下面我们来详细看看这项研究都有哪些重要的发现。

1. 作图群体的表型变异


研究人员对三个 F?代作图群体的多个性状进行了相关性分析。结果发现,植株高度(PH)和单株种子产量(SYPP)之间存在着很强的正相关关系,就好像两个配合默契的伙伴,一个长高,另一个产量也跟着增加。荚裂(PSH2)与 PH、SYPP 之间呈现出中等至弱的正相关,而在 MP3 群体中,荚密度(PD)和其他测量性状之间则有着中等至强的负相关,仿佛它们之间有着某种 “矛盾”。此外,在不同群体中,花序长度(IL)与其他性状也存在着不同程度的相关性。这些相关性的发现,让我们对这些性状之间的联系有了更深入的了解,就像是发现了它们之间隐藏的 “沟通密码”。

2. SeqSNP 基因分型和数据筛选


在基因分型过程中,研究人员发现最初设定的 10,000 个目标 SNP 里,有 9378 个通过了质量标准,其中 5349 个在三个作图群体中表现出多态性。不过,在不同群体中,经过各种筛选标准后,真正用于分析的多态性标记数量有所不同。比如,MP1、MP2 和 MP3 群体中最终用于分析的多态性标记分别为 1907、6471 和 5784 个。在数据筛选过程中,研究人员还去除了那些存在较多缺失数据的个体和标记,就像在整理花园时,去除了那些枯萎、不健康的花草,让数据更加 “健康”、可靠。

3. F?代基因型及其亲本后代的聚类模式


通过主坐标分析(PCoA,Principal Coordinate Analysis),研究人员发现每个群体中亲本的自交后代都紧紧地聚集在一起,这表明亲本之间存在着较大的遗传距离,就像是来自不同的 “家族分支”。而 F?代个体在 PCoA 图上的分布,揭示了它们在群体内和群体间的遗传分离情况。MP2 和 MP3 群体中个体的遗传变异水平相当,但 MP1 群体的遗传变异似乎相对较窄,这就好像 MP1 群体的 “遗传多样性花园” 里,花草的种类没有那么丰富。这些结果让我们对群体的遗传结构有了更清晰的认识,就像绘制了一幅详细的遗传地图。

4. 遗传连锁图谱的构建


经过一系列严格的筛选,研究人员成功为每个作图群体构建了包含 8 个连锁群(LGs)的遗传连锁图谱,这些连锁群与田野独行菜的 8 条单倍体染色体相对应。MP1、MP2 和 MP3 群体的连锁群总长度分别为 607.3cM、893.2cM 和 732.7cM。不同连锁群的长度和标记数量各不相同,比如最大的 LG4 平均长度为 140cM,最小的 LG5 平均长度只有 56cM 。这些遗传连锁图谱就像是基因的 “导航图”,为后续研究基因与性状的关系提供了重要的框架。

5. QTL 的检测与鉴定


研究人员运用非参数区间作图和多 QTL 区间作图两种方法,对多个性状进行了 QTL 定位分析。结果共检测到 16 个与测量性状相关的 QTL,它们分布在 8 个连锁群上。其中,与荚裂(PSH2)相关的 QTL 最多,有 9 个。比如,在 MP3 群体的 LG5 连锁群上,发现了一个解释 17.9% 表型变异的 QTL(qm3 - psh2 - 5.1),它的置信区间较短,只有 9.7cM 。此外,还检测到了与植株高度(PH)、单株种子产量(SYPP)、荚密度(PD)、花序长度(IL)和种子休眠(SD)等性状相关的 QTL。这些 QTL 的发现,就像是找到了控制这些性状的 “开关”,为作物改良提供了关键的靶点。

6. SNP 变异对目标性状的影响


研究人员进一步研究了 QTL 侧翼 SNP 位点的变异对目标性状的影响。结果发现,在大多数情况下,纯合基因型个体的表型值要么最高,要么最低,而杂合基因型个体的表型值则处于中间水平,这符合加性遗传效应的概念。比如,对于荚裂(PSH2)性状,在不同群体中,某些侧翼标记为特定基因型的个体表现出更高的抗荚裂性;对于植株高度(PH)性状,在 MP2 群体中,侧翼标记为特定基因型(GG 和 TT)的个体更高。这些发现为育种工作提供了重要的参考,就像给育种家们提供了一份选择优良品种的 “指南”。

7. 荚裂主要 QTL 区域的潜在候选基因


研究人员发现了一个位于 LG5 连锁群上的主要荚裂 QTL(q3 - psh2 - 5.1 和 qm3 - psh2 - 5.1),它对应的拟南芥同源区域包含 770 个候选基因。这些基因涉及生长发育、植物对生物和非生物胁迫的响应等多个过程。其中,一些与纤维素、果胶和木质素生物合成相关的基因,可能在荚裂过程中发挥重要作用;还有一些编码参与花药和角果开裂、防止水分流失等过程的蛋白质的基因,也备受关注。这些候选基因的发现,为深入了解荚裂的遗传机制提供了线索,就像打开了一扇通往基因奥秘的大门。

综合这项研究的结论和讨论部分,我们可以看到,它为田野独行菜的驯化研究带来了重大突破。研究人员通过构建遗传连锁图谱和鉴定 QTL,明确了植株高度、花序长度等性状与种子产量和荚裂之间的紧密联系,这为选择优良的田野独行菜基因型提供了重要依据。而且,研究中确定的 QTL、候选基因以及 SNP 的作用,为加速田野独行菜的驯化进程提供了宝贵的基因组资源。这些发现就像一把把钥匙,能够帮助育种家们运用标记辅助选择、基因编辑等新技术,更精准地改良田野独行菜的性状,让它更快地适应农业生产的需求。

不过,目前的研究也存在一些局限性。比如,在构建遗传图谱时,MP3 群体中染色体 3(LG3)没有构建出连锁群,染色体 6(LG6)出现了分裂,这说明在某些染色体上,遗传标记的定位还存在困难。此外,还需要构建更高分辨率的遗传图谱,进行基因组组装和注释,并且在多种田间条件下对作图群体进行表型分析,以研究 QTL 与环境的相互作用,进一步确认性状的遗传性。未来,研究人员还可以将研究范围扩展到田野独行菜对生物和非生物胁迫的响应、油产量和质量等方面,为持续改良驯化的田野独行菜、提高其在不同农业环境中的适应性和商业潜力奠定更坚实的基础。相信在科学家们的不断努力下,田野独行菜这个 “潜力新星” 在未来的农业舞台上一定会绽放出更加耀眼的光芒,为人类的粮食安全和农业可持续发展贡献重要力量。

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