《Cancer Cell International 》载阿霉素外泌体抑制癌相关成纤维细胞生长：开启乳腺癌治疗新希望

为解决乳腺癌化疗耐药问题，伊斯兰阿扎德大学的研究人员开展载阿霉素外泌体（Exo-Dox）治疗乳腺癌的研究，结果显示 Exo-Dox 能抑制癌细胞和癌相关成纤维细胞（CAFs）生长，为乳腺癌治疗提供新策略。

　　

在女性健康的战场上，乳腺癌堪称头号劲敌。它不仅发病率高，还因侵袭性强、易转移、易复发以及对化疗药物产生耐药性等问题，严重威胁着全球女性的生命健康。尽管医学在不断进步，但耐药问题始终是乳腺癌治疗路上的 “拦路虎”。癌相关成纤维细胞（CAFs）作为肿瘤微环境的重要成员，被发现是乳腺癌进展和耐药的 “帮凶”，它们能分泌各种因子，干扰化疗和靶向治疗的效果。同时，长链非编码 RNAs（lncRNAs）在肿瘤耐药过程中也扮演着关键角色，其中 H¹⁹和 UCA¹与乳腺癌耐药的关系备受关注。在此背景下，来自伊斯兰阿扎德大学等机构的研究人员展开了一项意义重大的研究，旨在探索新的治疗策略，为乳腺癌患者带来新的希望，该研究成果发表于《Cancer Cell International》。

为了深入探究，研究人员采用了多种关键技术方法。在样本获取上，收集了 10 位未经治疗的浸润性导管癌患者的新鲜乳腺癌组织、血清，以及 10 位健康女性的血清和 1 位 45 岁女性的脂肪组织。细胞相关实验技术包括细胞培养，对 MDA-MB-231、MCF-7 细胞系及原代细胞（CAFs、正常成纤维细胞 NFs、间充质干细胞 MSCs）进行培养；细胞鉴定，通过免疫细胞化学（ICC）、流式细胞术等对细胞表型特征进行鉴定；外泌体相关技术，从 ADMSCs 和 CAFs 等中分离外泌体，并利用多种方法对其进行鉴定和表征；此外，还有 Dox 加载、细胞毒性、细胞摄取、实时定量 PCR（q-RT PCR）、体内分布和抗肿瘤等一系列实验技术。

研究结果如下：

1. 细胞和外泌体的特征：经鉴定，分离的 MSCs 呈纺锤形，具有多向分化潜能，且 CD45、CD34 阴性，CD90、CD73 阳性；CAFs 也呈纺锤形，VIMENTIN 表达阳性，CD31、CD45 阴性，CD90 阳性。MSCs 和 CAFs 来源的外泌体呈圆盘状，平均大小在 40 - 200nm，成功鉴定出其关键标记物，且确定了蛋白质含量1。

2. Dox 加载和 Exo-Dox 特性：约 59% 的 Dox 成功加载到外泌体中，透射电镜（TEM）显示 Exo-Dox 膜完整性良好，且能被 MCF-7 细胞有效摄取2。

3. 细胞毒性和抗肿瘤作用：MTT 实验表明，游离 Dox 可降低多种细胞活力，游离 MSC-Exos 对细胞活力无明显影响，而 Exo-Dox 对乳腺癌细胞具有显著细胞毒性，且呈浓度依赖性，其 IC₅₀值在多数细胞组低于游离 Dox。凋亡实验显示，Exo-Dox 处理组细胞凋亡率显著高于游离 Dox 组。划痕实验表明 Exo-Dox 能抑制 MDA-MB-231 与 CAFs 共培养细胞的迁移能力345。

4. lncRNA 表达：实时 PCR 结果显示，患者血清外泌体中 H¹⁹和 UCA¹表达水平显著高于正常血清外泌体，多种乳腺癌相关细胞中这两种 lncRNAs 表达也较高。经 Exo-Dox 处理后，相关细胞中 H¹⁹和 UCA¹表达下调，TP53 基因表达上调。ROC 曲线表明 H¹⁹和 UCA¹具有很强的乳腺癌识别能力67。

5. 体内实验：在小鼠模型中，Exo-Dox 能在肿瘤部位聚集。与 PBS、游离 Dox 等组相比，Exo-Dox 显著抑制肿瘤生长，减少肿瘤体积和重量，降低肿瘤增殖和炎症指标898。

研究结论和讨论部分指出，Exo-Dox 通过超声处理制备，包封效率达 59%，在侵袭性 MDA-MB-231 细胞及与 CAFs 共培养细胞中，其 IC₅₀值低于游离 Dox。Exo-Dox 处理可显著降低 H¹⁹和 UCA¹表达，增加 TP53 表达，在荷瘤小鼠中展现出卓越的抗肿瘤功效。这表明外泌体可作为载体将 Dox 递送至癌细胞，尤其是对治疗耐药的肿瘤，Exo-Dox 有望成为调节乳腺癌细胞 lncRNA 表达和靶向 CAFs 的有效策略。然而，目前对 Exo-Dox 影响 CAFs 和乳腺癌细胞的具体机制还需进一步深入研究。总体而言，这项研究为乳腺癌治疗开辟了新方向，为未来开发更有效的治疗方案提供了重要理论依据和实践基础。