编辑推荐：
为探究乳腺癌（BC）相关分子指标，研究人员检测 MIR22HG 等 lncRNAs 表达，发现其可作潜在诊疗靶点。
在女性健康的 “战场” 上，乳腺癌（Breast Cancer，BC）可谓是头号 “劲敌”。它不仅是女性群体中最为常见的恶性肿瘤，更是全球范围内女性癌症相关死亡的第二大诱因，仅次于肺癌。在美国，每年约有 26.8 万人被诊断出患有乳腺癌，4.176 万人因此病离世。目前，虽然 mastectomy（乳房切除术）、hormone therapy（激素疗法）、手术联合辅助放疗、化疗、免疫疗法等治疗手段能帮助患者延长生命，但 TNM 分期法虽有助于对 BC 患者进行分类，却无法预测患者的预后情况。因此，探寻能够评估 BC 患者生存几率的分子指标迫在眉睫。尽管在过去 20 年里，BC 的早期诊断和治疗取得了显著进展，但它作为一种复杂的多态性癌症，仍然是一个重大的公共卫生难题。
随着生命科学研究的不断深入，科学家们发现，人类基因组中至少 75% 能有效转录成 RNAs，然而其中仅有 2% 会翻译为蛋白质。非编码 RNAs（Non-coding RNAs，ncRNAs）作为基因组中的 “神秘力量”，根据长度可分为长度小于 200 个核苷酸的 lncRNA 和大于 200 个核苷酸的类型。虽然短链 ncRNAs，尤其是 miRNAs 已被广泛研究，但其 “伙伴” lncRNAs 的功能意义却仍未被充分挖掘。而且，lncRNAs 在转录、转录后和表观遗传水平影响基因表达，在人类众多生物学活动中扮演着重要角色，其基因调控异常可能与包括癌症在内的多种发育和病理事件相关。
在此背景下，来自德黑兰医科大学（Tehran University of Medical Sciences，TUMS）的研究人员开展了一项重要研究，相关成果发表在《Advances in Cancer Biology - Metastasis》上。该研究聚焦于 MIR22HG、lncTAM34a 和 TP53TG1 这三种长链非编码 RNA（lncRNAs），旨在探究它们在 BC 发生发展中的作用，期望能为 BC 的诊疗开辟新方向。
研究人员运用了多种关键技术方法来开展此项研究。首先是样本采集技术，从 2018 年 2 月 1 日至 2020 年 11 月 30 日，他们收集了 150 名转诊至 TUMS 癌症研究所的女性患者的配对正常相邻组织（Matched Normal Adjacent Tissues，NATs）和 BC 组织，这些患者均为经乳腺 MRI 和病理检查确诊的浸润性导管癌患者，且术前未接受化疗或放疗。其次，采用了细胞培养技术，利用 MCF - 10A 正常乳腺上皮细胞系以及 MDA - MB - 453、MDA - MB - 468、MDA - MB - 231 和 MCF - 7 等人类乳腺癌细胞系进行实验，在特定培养基中培养细胞。此外，运用了定量逆转录聚合酶链反应（Reverse transcription and quantitative polymerase chain reaction，RT - qPCR）技术，检测相关 lncRNAs 的表达水平；通过小干扰 RNA（Small interfering RNA，siRNA）介导的敲低实验，探究这些 lncRNAs 对细胞功能的影响；还进行了细胞增殖、集落形成、侵袭和迁移实验以及细胞凋亡分析、蛋白质免疫印迹（Western blot analysis）等实验，全面评估细胞的生物学行为变化。
研究结果
- MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 在乳腺癌细胞系中的表达：研究人员在四种乳腺癌细胞系和一种乳腺上皮细胞系中评估了 MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 的表达。结果显示，MIR22HG 在 MDA - MB - 231 和 MCF - 7 细胞系中过表达，LNCTAM34A 和 TP53TG1 在 MDA - MB - 453 和 MCF - 7 细胞系中相较于乳腺上皮细胞系 MCF10A 上调，但在其他研究的 BC 细胞系中未显著过表达。同时，临床数据表明，这三种 lncRNAs 的表达状态与患者的临床病理特征显著相关，如在晚期 TNM 分期和分级组中，它们的表达较低；MIR22HG 和 TP53TG1 的过表达与患者诊断时年龄较大有关；肿瘤小于 5cm 的患者 MIR22HG 表达较高，而淋巴结转移（Lymph node metastasis，LNM）状态与这些 lncRNAs 的表达水平无显著关联。
- 敲低 MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 表达抑制女性乳腺癌细胞增殖：研究发现 MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 在乳腺正常上皮细胞系和四种乳腺癌细胞系中均有表达。通过转染针对这些 lncRNAs 的特异性靶向 siRNAs，qRT - PCR 检测证实敲低效果显著。功能实验表明，抑制 MIR22HG 基因后，MCF - 7 和 MDA - MB - 231 乳腺癌细胞在 96 - 120h 的增殖率显著提高；用 LNCTAM34A - siRNA 和 TP53TG1 - siRNA 处理的 MCF - 7 和 MDA - MB - 453 癌细胞，其增殖能力也明显增强。集落形成实验也显示，敲低这些 lncRNAs 的表达可显著促进细胞增殖，提示它们可能具有抑制 BC 细胞增殖的作用。
- 沉默 MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 促进女性乳腺癌细胞迁移和侵袭：利用 Transwell 和 Matrigel 实验分析敲低相关 lncRNAs 的 MDA - MB - 453、MDA - MB - 231 和 MCF - 7 细胞的侵袭和迁移能力。结果发现，转染靶向 MIR22HG 和 LNCTAM34A 的 siRNAs 后，细胞的侵袭、迁移能力显著增强，表明降低这些 lncRNAs 的表达可促进 BC 细胞的增殖。
- MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 敲低减少细胞凋亡：研究人员在转染 72h 后检测了转染靶向沉默 siRNAs 的 MCF - 7、MDA - MB - 453 和 MDA - MB - 231 细胞系，评估这些 lncRNAs 在 BC 细胞凋亡中的作用。结果显示，过表达 MIR22HG 时，细胞凋亡增多；而在 MIR22HG - siRNA、LNCTAM34A - siRNA 和 TP53TG1 - siRNA 处理组中，细胞凋亡减少。蛋白质免疫印迹结果也进一步支持了这一发现。
研究结论与讨论
综合上述研究结果，MIR22HG、LNCTAM34A 和 TP53TG1 在乳腺癌中发挥着肿瘤抑制作用。它们的下调与肿瘤进展相关，通过促进细胞增殖、侵袭和迁移，同时抑制细胞凋亡来推动肿瘤发展。这一发现意义重大，意味着这些 lncRNAs 有望成为乳腺癌潜在的生物标志物和治疗靶点。不过，目前对于这些 lncRNAs 影响乳腺癌进展的分子机制还不完全清楚，后续还需要进一步深入研究。例如，MIR22HG 作为竞争性内源性 RNA（ceRNA）参与癌症进展机制的具体细节；LNCTAM34A 如何通过影响 P53/miR34a/LNCTAM34A 通路发挥肿瘤抑制作用；TP53TG1 在乳腺癌中确切的作用机制等，都有待科学家们进一步探索。 总之，该研究为乳腺癌的诊疗研究提供了新的思路和方向，让人们在攻克乳腺癌这一难题的道路上又迈出了坚实的一步。
