口服 Neu REFIX β1,3-1,6葡聚糖对杜氏肌营养不良症治疗潜力的研究

为解决杜氏肌营养不良症（DMD）治疗难题，研究人员探究 Neu REFIX 的作用，发现其可促肌肉再生，有治疗潜力。

　　在肌肉的世界里，有一种罕见的 “恶魔”—— 杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD），它是一种由基因缺陷引发的遗传性疾病。正常情况下，肌纤维细胞膜有肌营养不良蛋白（Dystrophin）保驾护航，维持着结构的刚性和完整性。但在 DMD 患者体内，编码 Dystrophin 的基因出了问题，导致它缺失。这就好比城墙没了关键的砖块，肌纤维细胞膜变得脆弱不堪，极易受伤。受伤后的肌肉会引发炎症、氧化应激，进而走向坏死。即便卫星干细胞试图再生修复肌肉，可免疫细胞的入侵和炎症的干扰，使得肌肉无法正常成熟，最终被纤维脂肪组织替代，患者逐渐失去行走能力，还可能因心脏和呼吸衰竭，在 20 - 30 岁就过早离世。

目前，针对 DMD 的治疗手段十分有限。基因疗法还在临床试验阶段，已获批的外显子跳跃疗法也没能达到令人满意的临床效果，主要是因为炎症、纤维化问题没得到充分解决，肌肉再生和成熟也不足。而传统的皮质类固醇虽能控制炎症，却有不少副作用，难以长期给患者使用。在这样的困境下，寻找一种安全有效的治疗方法迫在眉睫。

来自印度、日本等多地的研究人员联合开展了一项研究，他们将目光聚焦在一种由 N - 163 菌株产生的 β - 1,3 - 1,6 葡聚糖（Neu REFIX）上。此前研究已发现它具有抗炎、抗纤维化和免疫调节作用，此次研究旨在进一步探究它对 DMD 小鼠肌肉再生和分化的影响。该研究成果发表在《Scientific Reports》上。

研究人员开展此项研究时，用到了几个主要关键的技术方法。首先是动物实验分组，选取 45 只小鼠，随机分为正常组、mdx 对照组和 mdx 喂食 Neu REFIX 组。其次，运用 ELISA 技术检测胰岛素样生长因子 - 1（IGF - 1）、Dystrophin 在膈肌和血浆中的表达水平；采用 SimpleStep ELISA? 试剂盒及特定的 ELISA 方法分别对膈肌和血浆中的 Dystrophin 进行定量分析。最后，通过免疫组化和免疫荧光染色，结合 H - score 算法及 SketchAndCalc?软件评估 CD44 和肌球蛋白重链 3（MYH3）的表达情况。

研究结果如下：

1. 体重变化：mdx 对照组小鼠平均体重显著低于正常组，而 mdx 喂食 Neu REFIX 组与 mdx 对照组相比，平均体重无显著差异。
2. IGF - 1 表达：血浆中，mdx 喂食 Neu REFIX 组 IGF - 1 表达比 mdx 对照组显著增加 20.32%；膈肌中，mdx 喂食 Neu REFIX 组 IGF - 1 水平比 mdx 对照组高 16.27% ，且三组间差异具有统计学意义。这表明 Neu REFIX 能提升 IGF - 1 水平，而 IGF - 1 对肌肉修复和再生至关重要，它能促进骨骼肌细胞的增殖和分化。
3. Dystrophin 表达：mdx 喂食 Neu REFIX 组血浆和膈肌中的 Dystrophin 表达均高于 mdx 对照组，其中膈肌中 Dystrophin 表达比对照组增加 70.3% ，虽差异未达统计学显著水平，但已显示出积极趋势。此前研究中，基因治疗和外显子跳跃疗法在短时间内使 Dystrophin 表达有一定提升，而 Neu REFIX 作为辅助治疗，也能显著提高 Dystrophin 表达，为其成为辅助疗法提供了理论依据。
4. CD44 和 MYH3 表达：CD44 表达的 H - score 评分，mdx 喂食 Neu REFIX 组显著高于正常组和 mdx 对照组。MYH3 阳性区域面积在 mdx 喂食 Neu REFIX 组最大。这两个指标是肌肉再生和成熟的标志，其表达增加说明 Neu REFIX 能促进肌肉再生和干细胞激活，推动肌肉纤维的分化和成熟。

研究结论和讨论部分指出，Neu REFIX 在 mdx 小鼠模型中展现出作为 DMD 疾病修饰治疗佐剂的潜力。它能在 45 天内提高 Dystrophin、IGF - 1 以及肌肉再生标记物 MYH3 和 CD44 的表达。此前临床研究已证实其抗炎、抗纤维化功效，还能提高血浆中 Dystrophin 水平，此次研究进一步支持了其在 DMD 治疗中的价值。Neu REFIX 的治疗效果可能源于其强大的抗炎活性，它能改善组织微环境，促进肌肉再生，还可能通过调节肠道微生物群发挥作用。不过，该研究也存在一些局限性，如研究时长仅 45 天，部分生物标志物未达统计学显著差异；mdx 小鼠模型不能完全模拟人类 DMD 病理；缺乏免疫荧光分析确定 Dystrophin 空间定位和药代动力学分析等。未来需要开展更多长期、多中心的临床研究，深入探究其分子机制，明确其在不同阶段 DMD 患者中的疗效和安全性，评估与其他主要治疗方法联合使用的效果，为 DMD 患者带来更多希望。