L - 天冬酰胺:揭开中国猪对猪肺炎支原体易感性的关键因素

【字体: 时间:2025年03月02日 来源:Food Production, Processing and Nutrition 4

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  为探究中国猪对猪肺炎支原体(M. hyopneumoniae)易感性的原因,研究人员通过多实验得出 L - 天冬酰胺(L-Asn)是关键因素,为防控提供依据。

  # 探寻猪肺炎 “幕后黑手”:L - 天冬酰胺如何左右猪的抗病力?
在猪的养殖世界里,有一种难缠的 “病魔”—— 猪肺炎支原体(M. hyopneumoniae)引发的猪支原体肺炎,它就像一个隐匿的 “破坏者”,悄无声息地在全球猪群中肆虐。这一疾病发病率极高,广泛传播且极难根除,长期困扰着养猪业,还容易引发二次感染,给养猪户带来了巨大的经济损失。更让人头疼的是,不同猪品种对它的抵抗力差异很大,像中国的巴马小型猪和太湖猪等本土品种,一旦遭遇猪肺炎支原体,就如同脆弱的防线遭遇强攻,极易 “中招”,发病严重;而引进品种如大白猪、长白猪和杜洛克猪则相对 “皮实”,感染几率和发病程度都低很多。面对这种情况,深入了解中国猪种易感性的原因迫在眉睫,这不仅关系到猪群的健康,更关乎整个养猪产业的兴衰。
为了揭开这一谜团,南京农业大学和江苏省农业科学院的研究人员挺身而出,展开了一场与 “病魔” 的科研较量。他们的研究成果发表在《Food Production, Processing and Nutrition》杂志上,为我们揭示了其中的关键奥秘。

研究人员为了深入探究这一现象,采用了多种关键技术方法。在样本采集方面,从巴马小型猪和大白猪获取血液和支气管肺泡灌洗液(BALF)样本。代谢组学分析上,运用超高效液相色谱 - 串联质谱(UHPLC-MS/MS)技术,全面分析血清代谢物。还通过定量实时 PCR、细胞黏附和细胞毒性实验等,研究猪肺炎支原体的生长、代谢、黏附及致病能力。

下面来看看具体的研究结果:

1. 不同猪种血清对猪肺炎支原体生长的影响


研究人员将猪肺炎支原体的多个菌株(168、168L、NJ、J 和 LH)分别在添加不同猪种血清的培养基中培养。结果发现,添加中国猪种血清的培养基中,猪肺炎支原体的生长速度明显更快,培养 14 天后,其生长滴度比添加引进猪种血清的培养基更高。特别是巴马小型猪血清,能让猪肺炎支原体的生长速度显著提升,生长滴度的 CCU50值比大白猪和杜洛克猪血清培养的高出约 0.25 - 0.5 log,在高毒力菌株上表现得更为明显。这表明不同猪种血清中可能存在某些特殊物质,影响着猪肺炎支原体的生长。

2. 代谢组学分析筛选差异代谢物


研究人员对巴马小型猪和大白猪的血清进行非靶向代谢组学分析。主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)结果显示,两组样本的代谢物存在明显差异,且模型可靠。进一步筛选发现,共检测到 1114 种代谢物,其中 428 种存在显著差异。通过分析,发现巴马小型猪血清中 L - 天冬酰胺(L-Asn)的含量比大白猪血清高 15 - 18 倍。此外,肌醇(Ino)和花生四烯酸(LCT4)等物质在巴马小型猪血清中也显著上调。

3. L-Asn 对猪肺炎支原体生长、代谢和致病性的影响


研究人员在培养基中添加不同浓度的 L-Asn,观察猪肺炎支原体的生长情况。结果显示,一定浓度的 L-Asn 能显著促进猪肺炎支原体的生长。高毒力菌株如 NJ 和 168 需要较高浓度的 L-Asn,而低毒力菌株 J 和 168L 则对 L-Asn 浓度要求较低。同时,添加 L-Asn 后,猪肺炎支原体的代谢能力增强,其 DNA 拷贝数增加。在细胞黏附和细胞毒性实验中,巴马小型猪血清和 L-Asn 都能促进猪肺炎支原体对细胞的黏附,增加细胞毒性。添加 400 μM L-Asn 后,猪肺炎支原体的黏附能力和细胞毒性显著增强,且巴马小型猪血清组的影响更明显。

4. 感染前后血清和 BALF 中代谢物浓度变化


研究人员通过 ELISA 检测发现,感染猪肺炎支原体后,巴马小型猪血清和 BALF 样本中的 L-Asn、Ino 和 LCT4浓度比大白猪更高。而且,感染后这些代谢物的浓度比感染前有所降低,说明它们在感染过程中被消耗,进一步表明 L-Asn 与猪肺炎支原体的生长代谢和致病性密切相关。

综合上述研究,研究人员得出结论:通过非靶向代谢组学分析,筛选出 L-Asn、Ino 和 LCT4这三种代谢物,推测它们可能是中国本土猪种对猪肺炎支原体易感性的关键因素,其中 L-Asn 是最显著的血清代谢标志物。明确了 L-Asn 对猪肺炎支原体的生长、代谢能力和致病性的影响,400 μM 和 50 μM 的 L-Asn 可促进猪肺炎支原体的生长和代谢,400 μM 的 L-Asn 还能促进其黏附和细胞毒性。

这项研究意义重大,它为中国本土猪种更易感染猪肺炎支原体的现象提供了部分解释,为防控猪支原体肺炎提供了理论依据。基于这些发现,未来有望开发新的防控策略,比如通过调控猪体内 L-Asn 的含量来降低感染风险,或者优化猪肺炎支原体的培养基,提高检测和研究效率,从而推动养猪业的健康发展。不过,目前 L-Asn 参与猪肺炎支原体感染的详细机制尚未完全明确,有待进一步深入研究。
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