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为解决 2 型糖尿病（T2D）治疗难题，研究人员构建双酶反应器筛选 α-Glu 和 PTP1B 双抑制剂，该方法高效且应用前景广。
2 型糖尿病（T2D）是一种主要由胰腺 β 细胞功能障碍和胰岛素抵抗引起的复杂疾病。它在全球范围内备受关注，因其发病率高且会引发严重并发症。许多抗糖尿病药物，比如二甲双胍，虽能有效治疗高血糖，但无法满足所有临床需求，还可能随着时间推移失效，引发胃肠道问题等不良反应，所以急需更高效、副作用更少且能提高患者依从性的新疗法。
多靶点药物为治疗 2 型糖尿病带来了新选择。小肠细胞膜上的 α- 葡萄糖苷酶（α-Glu）有助于调节餐后血糖，而内质网上的蛋白酪氨酸磷酸酶 1B（PTP1B）会抑制胰岛素和瘦素的信号传导，这两种酶都是 2 型糖尿病治疗的关键靶点。研究发现，同时阻断 PTP1B 和 α-Glu 能提高胰岛素敏感性、降低餐后血糖并助力减肥，因此这一治疗策略颇具潜力。
天然产物因其独特的化学结构和多样的生物活性受到关注，在 2 型糖尿病治疗方面有积极作用，但从其中筛选活性化合物颇具挑战。目前筛选糖尿病抑制剂的研究多聚焦单酶靶点，多靶点抑制剂的鉴定主要依赖计算机虚拟筛选，现有的同时筛选多种酶抑制剂的方法存在成本高、适用性有限等问题。
各种亲和选择 - 质谱技术已广泛用于从天然产物提取物中筛选活性化合物。中空纤维具有良好的生物相容性和介孔结构，能有效固定酶、模拟体内环境并保持生物活性；亲和超滤在筛选游离酶抑制剂方面优势明显，将二者结合，再融入生物识别和分子对接技术，有望开发出经济、高效、通用的双酶抑制剂筛选方法。
本研究构建了一种基于中空纤维配体垂钓和亲和超滤技术的 α-Glu 和 PTP1B 双酶抑制剂筛选新体系。该体系通过构建双酶反应器，进样一次就能同时检测化合物与两种酶的结合情况。样品先与中空纤维中的 α-Glu 相互作用，再与游离的 PTP1B 进行超滤，捕获潜在生物活性化合物，然后用液相色谱 - 串联质谱（LC-MS/MS）鉴定，最后通过分子对接和酶测试验证结果。该方法成功应用于白茶、蛇床子和陈皮的筛选，操作简单、成本低、灵敏度高、重复性好且选择性强，为鉴定双靶点抑制剂提供了全面的筛选系统，相比其他方法，无需复杂预处理，简化了化合物分离过程，能快速可靠地鉴定抑制剂，在药物研发领域有广阔的应用潜力。
研究用到的化学试剂和仪器设备列于补充材料（S1 部分）。实验前，将干燥的白茶、蛇床子和陈皮研磨并过 40 目筛，取 1g 粉末用 20mL 70% 甲醇水溶液超声提取（600W，40kHz）两次，每次 30 分钟，收集滤液后在 55°C 低压蒸发。
研究采用多种物理和生化方法对固定化中空纤维进行表征，以区分空白中空纤维和包埋酶的中空纤维，判断 α-Glu 是否成功包埋在中空纤维中。扫描电子显微镜（SEM）图像显示 α-Glu 吸附在中空纤维内壁，傅里叶变换红外光谱（FTIR）分析表明吸附后出现了新的酰胺带（1650cm-1），证实 α-Glu 成功包埋。
本研究构建的双酶抑制剂筛选系统，能基于亲和作用快速高效地筛选多靶点抑制剂，模拟了体内酶反应过程，成本低、适用性广、可循环利用且能同时筛选多个靶点。
