葡萄体细胞胚胎发生及稳定转化体系的研究：解锁葡萄生物技术应用新密码

为探索葡萄细胞再生植株方法，研究人员测试 10 种葡萄基因型花序愈伤组织胚性能力，建立稳定转化体系。

　　体细胞胚胎发生（Somatic embryogenesis）是葡萄从细胞再生植株的首选方法。在这项研究中，研究人员测试了 10 种葡萄基因型（涵盖多种酿酒葡萄（Vitis vinifera）和非酿酒葡萄（Vitis）品种）花序来源的愈伤组织的胚胎发生能力。研究人员描述了葡萄品种 “阿里高特（Aligote）”、“马尔贝克（Malbec）”、“萨别拉维（Saperavi）”、“佳美娜（Carménère）”、“马加拉奇的礼物（Podarok Magaracha）” 以及砧木 “SO₄” 的高效且可重复的愈伤组织诱导和再生方案。愈伤组织的诱导分两个阶段进行：首先，获得胚性愈伤组织（1），然后将其转移到诱导胚性愈伤组织形成的培养基上（2）。所得愈伤组织可在液体培养基中体外保存，或用于体细胞胚胎的起始和植株再生。体细胞胚胎的形成和发育分三个阶段：（1）首先，在低生长素含量的培养基上起始体细胞胚胎；（2）接着，将其转移到体细胞胚胎维持培养基上；（3）随后，仅将发育好的体细胞胚胎转移到体细胞胚胎萌发和芽发育的培养基上。为了便于后续对所研究品种进行生物技术应用，研究人员基于农杆菌介导的转化（Agrobacterium - mediated transformation）为其建立了稳定的转化系统。所开发的农杆菌介导的转化条件，经 Southern 印迹法证实，成功获得了 “阿里高特” 和 “马加拉奇的礼物” 品种的稳定转化株系，转化效率为 0.36 - 0.43%。