建立吸血蝠肾细胞系 FKDR 并评估其对狂犬病病毒(RABV)的易感性
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时间:2025年03月06日
来源:Brazilian Journal of Microbiology 2.1
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为探究病毒 - 宿主互作,研究人员开发 FKDR 细胞系,其对 RABV 易感,利于相关研究。
吸血蝠(Desmodus rotundus)是美洲狂犬病毒(Lyssavirus rabies,RABV)的主要宿主,但由于体内实验感染存在困难,人们对该物种中病毒与宿主相互作用的了解十分有限。在这种情况下,细胞培养成为拓展对美洲自然宿主中 RABV 感染动态认知的重要工具。本研究旨在开发并鉴定一种源自吸血蝠的细胞系,并评估其对 RABV 的易感性。研究人员使用含有猿猴病毒 40(Simian Virus 40,SV40)大 T 和小 T 抗原基因序列的质粒 pSV1,使吸血蝠胎儿肾细胞的原代培养物永生化。通过有限稀释法筛选获得的克隆,并利用 PCR 检测 SV40 大 T 基因以确认转染情况。最终得到的细胞系被命名为 FKDR(Fetal Kidney Desmodus Rotundus)。研究人员对原代细胞和 FKDR 细胞培养物进行了生长曲线测定、衰老检测和核型分析。通过直接免疫荧光试验(direct fluorescent antibody test,dFAT)测定 FKDR 细胞对 RABV 的易感性,并与 BHK-21、Tb1Lu 和 CaroPe 细胞进行比较。永生化后的细胞呈现梭形外观,与原代胎儿细胞相比,无衰老标记、染色体异常,且细胞生长加快。FKDR 细胞和其他用于 RABV 感染的细胞系经免疫荧光染色均呈阳性,但未出现细胞病变效应。此处描述的细胞系在研究吸血蝠的 RABV 感染方面具有潜在价值。
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